胆总管结扎预适应减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 探讨胆总管结扎预适应减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤的可能机制.方法 C57BL/6小鼠分为3组进行实验.胆总管结扎预适应组(CBDL组)结扎胆总管(d0),2d后(d2)再通,再过2d后(d4)行左肾缺血再灌注手术;假手术组仅结扎胆囊管(d0),d4再行左肾缺血再灌注手术;对照组不进行任何处理.监测血胆红素总量(TBil)的变化情况.肾脏缺脏再灌注后24 h(dS)检测各组小鼠血清肌酐(Cr).蛋白质印迹法检测CBDL组和假手术组肾脏热休克蛋白27 (HSP-27)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达情况.结果 CBDL组胆总管结扎2d后,TBil达到最高,再通2d后,TBil基本降至正常水平.CBDL组Cr低于假手术组(P＜0.05).CBDL组HSP-27和eNOS的表达量高于假手术组(P＜0.05).结论 胆道结扎预适应能明显减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤,其机制可能与引起肾脏局部HSP-27和eNOS高表达有关.     

甲状腺激素T3减轻小鼠再灌注肾脏炎症反应

目的：甲状腺激素（T3）预处理通过调控细胞因子白介素-10（IL-10）、内源性白介素-1受体阻滞剂（IL-1Ra）的表达,减轻小鼠缺血再灌注肾脏中性粒细胞浸润所带来的炎症反应。方法：雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：正常对照组（假手术）、单纯IR组（仅行肾脏IR）、T3+IR组（肾脏IR前48h T3预处理）、0.1N NaOH+IR组（肾脏IR前48h 注射等量溶剂）,建立肾脏IR模型。各组于再灌注后24h取血标本进行肾功能检测(肌酐、尿素氮),取肾脏标本采用PAS染色评估肾脏组织形态学改变,MPO染色评估中性粒细胞浸润情况,逆转录-聚合酶链反应（Real-Time PCR）检测肾脏再灌注后1h、3h、6h、12h、24h五个时间点的IL-10、IL-1Ra mRNA的表达情况。结果：T3干预组24h血肌酐比单纯IR组低(P<0.05);T3干预组肾脏病变比单纯IR组轻(P<0.05);MPO染色示：与单纯IR组相比较,T3干预组中性粒细胞浸润明显减少(P<0.05);再灌注后12h,T3干预组IL-10 、IL-1Ra表达高于单纯IR组,差异有统计学意义（P<0.05）;而单纯IR组和0.1N NaOH+IR组在上述各项指标的变化上无明显差异。结论：T3能在肾脏再灌注的晚期阶段发挥作用,促进IL-10、IL-1Ra的表达,减轻中性粒细胞浸润所带来的炎症反应,改善肾功能。     

HSP27减轻肝脏缺血再灌注损伤及调节肝脏缺血预适应效果的作用

目的 探讨热休克蛋白27(HSP27)减轻小鼠肝脏缺血再灌注(IR)损伤及调节缺血预适应(IP)效果的作用及其机制.方法 实验动物为雄性C57BL、6小鼠.将小鼠分为3组,对照组为正常C57BL/6小鼠,重组人HSP27(rHSP27)组小鼠经门 静脉注射rHSP27后30min进行IR操作,IR组小鼠仅进行了IR操作,比较3组小鼠间再灌注后肝脏IR损伤的程度.取C57BL、6小鼠,于门静脉内注射包装有干扰HSP27表达的短发夹RNA的重组腺病毒100μl靶向抑制HSP27的表达,并将该小鼠设为实验组,以注射空病毒100μl的小鼠作为空白对照组,成功干扰HSP27表达后,进行IP和IR等处理,观察HSP27对IR损伤和IP效应的影响,比较各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶( AST)水平,评价肝组织病理损伤程度,以及检测肝组织内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6 mRNA水平.结果 与IR组相比,rHSP27组小鼠的ALT和AST水平明显下降,肝组织损伤明显减轻,TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达明显减少(P＜0.05).抑制肝内HSP27的表达,可使再灌注后血清ALT和AST水平升高,肝组织病理学损伤和炎症反应加重(P＜0.05).空白对照组小鼠经IP处理后肝内HSP27蛋白的表达较IP前显著上调(P＜0.05).在IR前使用rHSP27可以明显减轻实验组小鼠肝脏IR损伤的程度(P＞0.05)；但在IR前进行IP处理并不能减轻实验组小鼠肝脏的IR损伤.空白对照组小鼠IR前经IP处理能够明显降低再灌注后胱天蛋白酶3的表达(P＜0.05),而相同处理后实验组小鼠胱天蛋白酶3的表达无明显变化(P＞0.05).结论 HSP27在减轻小鼠肝脏IR损伤过程中发挥重要作用,并且HSP27还可调节IP减轻IR损伤的效应,这可能与HSP27减少细胞凋亡的作用密切相关.