三种不同的DNA分型技术在158株结核杆菌研究中的应用

目的评价IS6110限制性片段长度多态性(RFLP)、间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)及分枝杆菌散在重复单位(MIRU)三种分型方法在结核病流行病学研究中的应用。方法对158株结核分枝杆菌临床分离株应用IS6110RFLP、Spoligotyping及MIRU三种分型方法进行鉴定。结果应用三种分型方法产生的类型数分别为118、20和105个。IS6110RFLP的分辨率大于Spoligotyping,MIRU的分辨能力与IS6110RFLP接近。在MIRU的12个区中,重复区4、10、26、40具有较高的多态性。广东地区与其他地区成簇率和北京基因型所占比例差异有统计学意义(P<0.05),广东地区成簇率和北京基因型所占比例均显著低于其他地区。结论应用IS6110RFLP、Spoligotyping及MIRU三种分型方法进行结核病流行病学研究具有重要意义且非常有效,可以发现中国不同地区菌株的不同特点。     

世界卫生组织中国结核病耐药监测的结果评价

目的及时掌握我国各个省份的结核病药物耐药性水平，并且作到国际可比。方法采用WHO推荐的《结核病药物耐药性监测指南》规定的统一方法进行监测设计和操作。根据各省前一年的涂片阳性的病例数，计算出应监测的病例数，采用随机抽样的方法，在各省选择30个监测点（广东为40个监测点），将监测病例平均分配到各个监测点。每个监测点连续选取涂片阳性的病例，收集痰标本，进行分枝杆菌培养及利福平（RFP或R）、异烟肼（INH或H）、链霉素（SM或S）和乙胺丁醇（EMB或E）4种药物的药物敏感性实验。结果河南、山东、浙江、广东、湖北、辽宁、河南省第二轮监测以及内蒙古自治区的初始耐药率分别是：35．0％（226／646）、17．6％（178／1009）、14．8％（120／809）、18．6％（267／1432）、17．5％（150／859）、42．1％（344／818）、29．8％（364／1222）和35．7％（313／876）；获得性耐药率分别为：66．0％（479／726）、50．0％（110／220）、59．3％（86／145）、33．7％（56／166）．44．5％（106／238）、55．8％（48／86）、60．8％（161／265）和65．3％（252／386）。结论从开展耐药性监测的各省耐药监测结果看，我国的耐药状况仍处于很高的水平。应当引起我们的高度重视，采取有力措施，加强结核病控制工作，控制耐药结核病，减少耐药菌株的蔓延。     

结核分枝杆菌DNA分型技术及其应用

在结核分枝杆菌基因组插入序列中，IS6110是最有特点的插入序列，同时结核分枝杆菌基因组内除IS6110插入序列外。还有多个插入序列和重复元件。如IS1081、PGRS、VNTR、DR等等，利用这些插入序列或重复序列，通过扩增或酶切杂交获得象人体指纹一样的特异带型，即DNA指纹图谱，由此建立的方法就称为DNA指纹技术。     

关于儿童结核病应用免疫学检测的思考

结核病已经出现了几千年而结核病的致病菌一直到1882年才被德国的科学家柯霍氏发现。在此期间结核病在全球蔓延．造成了无数人的死亡；即使在结核分枝杆菌被发现后的100多年里也有2亿多人死于结核病，迄今全球有1／3（约20亿）的人受到结核菌的感染。每年约1000万新发病例，每年约300万人死于结核病。     

结核病控制项目地区复治肺结核病人既往不规则治疗原因探讨

目的 探讨复治肺结核病人既往不规则治疗的原因.方法 病人不规则治疗原因调查以调查表的方式入户进行.结果 复治肺结核病人既往不规则治疗的主要原因是病人自感症状好转停药,其次是经济困难.结论 为提高肺结核病人的治疗依从性,减少复治病人,特别是耐药病人的发生,最有效的手段是督导化疗,其次是实行免费治疗,减轻病人的经济负担,还要加强对结核病人的宣传教育,提高其对结核病,特别是对结核病治疗的正确认识.     

结核病易感基因的研究进展

结核病的发病是多因素综合作用的结果.随着人类基因组计划的完成,已有多个易感基因被发现,这些易感基因的发现和研究对于建立和健全结核病预防和控制措施起到不可忽视的作用.     

应用蛋白芯片技术快速诊断肺结核病的研究

目的评价结核分枝杆菌蛋白芯片在检测临床标本中结核分枝杆菌抗体的应用价值。方法应用结核分枝杆菌蛋白芯片检测117例结核病患者的血清标本、103例肺部其他疾病患者和健康入的血清标本，并与痰涂片镜检法相比较。结果在菌阳肺结核、菌阴肺结核中，结核分枝杆菌抗体芯片检测的阳性率分别是100％（26／26）、49．6％（45／91），在肺部其他疾病患者和健康人中，结核分枝杆菌抗体芯片检测的阴性率是98．1％（101／103）。结论结核分枝杆菌抗体检测蛋白芯片是一种集基因工程技术、芯片技术和免疫学技术的检测一体化的新型结核病快速诊断方法，具有简便、快速、大量、敏感性高和特异性强、检测成本较低的特点，是结核病、尤其是菌阴结核病辅助诊断的有效方法。     

儿童结核病的实验室诊断

结核病已经出现了几千年而结核病的致病菌一直到1882年才被德国的科学家柯霍氏发现。在此期间结核病在全球蔓延，造成了无数人的死亡；即使在结核分枝杆菌被发现后的100多年里也有2亿多人死于结核病，迄今全球有1／3（约20亿）的人受到结核菌的感染，每年约1000万新发病例，每年约300万人死于结核病。     

艾滋病合并耐多药结核杆菌感染1例报告

患者男,19岁,因间断发热3个月,发现HIV抗体阳性3d于2010年7月16日入院。患者3个月前无明显诱因出现发热,体温最高达39℃,在当地诊所对症治疗,效果不佳。2周前在外院就诊,考虑合并结核感染可能性大,予利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇治疗．体温仍波动于38．0～39．5℃。     

结核分枝杆菌Rv0440 CTL表位肽的免疫原性研究

目的 体外鉴定结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）Rv0440蛋白序列中表位肽362 370 aa和369-377 aa的HLA A＊0201限制性CD8＋ CTL表位的免疫原性,为基于表位的结核疫苗研究提供实验依据.方法 根据T2细胞HLA-A＊ 0201分子与多肽结合力分析实验结果,选取结核分枝杆菌Rv0440蛋白质氨基酸序列中对HLA-A＊ 0201分子高亲合力的Rv0440 1（362-370 aa,KLQERLAKL）和Rv0440-2（369 377 aa,KLAGGVAVI）作为候选表位肽.用候选表位肽刺激PPD（＋＋＋）健康志愿者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）检测细胞分泌IFN γ的水平.用候选表位肽诱导特异性CTL细胞,检测特异性CTL细胞对负载表位肽的T2细胞的杀伤活性,观察Rv0440-1和Rv0440 2的HLA-A＊ 0201限制性CD8＋ CTL表位的免疫原性.结果 ELISPOT实验结果显示,表位肽Rv0440-1能够明显诱导HLA-A＊ 0201（＋）、PPD（＋＋＋）健康志愿者PBMC分泌IFN γ（P＜0.05）;且表位肽Rv0440-1负载DC诱导的CTL在效靶比为10：1时对负载相应表位肽的T2细胞的特异性杀伤活性高于对照组（P＜0.05）;与对照组相比,表位肽Rv0440 2没有诱导能力.结论 表位肽Rv0440-1（362-370 aa,KLQERLAKL）具有良好的免疫原性,是有效的结核分枝杆菌的HLA-A＊0201限制性CTL表位.