负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞对大鼠Th细胞增殖的影响

目的探讨负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞对大鼠Th细胞增殖的影响。方法将CTLA4Ig重组腺病毒与Wistar大鼠未成熟树突状细胞于37℃共孵育6h后,经尾静脉注射该大鼠作实验组,另外分别设立Wistar大鼠未成熟树突状细胞、CTLA4Ig重组腺病毒、生理盐水经尾静脉注射为对照。1周后,用0.3%戊巴比妥麻醉各组大鼠后抽血检测CTLA4Ig。取脾脏,经流式细胞术分选出Th1、Th2细胞及CD4 T细胞,行混合淋巴细胞培养检测Th细胞的增殖。用免疫组织化学法检测Th1、Th2细胞的比例。结果实验组血清CTLA4Ig水平(0.654±0.13)显著高于CTLA4Ig重组腺病毒组(0.392±0.10,P<0.01),树突状细胞组及生理盐水组未检出。实验组Th1细胞的增殖指数(742±161)、Th1/Th2(0.16±0.05)均显著低于各对照组(分别与未成熟树突状细胞组、CTLA4Ig重组腺病毒组、生理盐水组相比,P均<0.01);而Th2细胞的增殖指数(9162±598)显著高于各对照组(P均<0.01)。结论负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞可显著抑制大鼠Th1细胞增殖,促进Th2细胞增殖,使Th细胞由Th1向Th2显著偏移,诱导有效的免疫耐受。     

负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞对大鼠Th细胞增殖的影响

目的 探讨负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞对大鼠Th细胞增殖的影响.方法 将CTLA4Ig重组腺病毒与Wistar大鼠未成熟树突状细胞于37C共孵育6h后,经尾静脉注射该大鼠作实验组,另外分别设立Wistar大鼠未成熟树突状细胞、CTLA4Ig重组腺病毒、生理盐水经尾静脉注射为对照.1周后,用0.3%戊巴比妥麻醉各组大鼠后抽血检测CTLA4Ig.取脾脏,经流式细胞术分选出Th1、Th2细胞及CD4+T细胞,行混合淋巴细胞培养检测Th细胞的增殖.用免疫组织化学法检测Th1、Th2细胞的比例.结果 实验组血清CTLA4Ig水平(0.654±0.13)显著高于CTLA4Ig重组腺病毒组(0.392±0.10,P＜0.01),树突状细胞组及生理盐水组未检出.实验组Th1细胞的增殖指数(742±161)、Th1/Th2(0.16±0.05)均显著低于各对照组(分别与未成熟树突状细胞组、CTLA4Ig重组腺病毒组、生理盐水组相比,P均＜0.01);而Th2细胞的增殖指数(9162 ±598)显著高于各对照组(P均＜0.01).结论 负载CTLA4Ig重组腺病毒的未成熟树突状细胞可显著抑制大鼠Th1细胞增殖,促进Th2细胞增殖,使Th细胞由Th1向Th2显著偏移,诱导有效的免疫耐受.     

骨化三醇治疗对糖尿病肾病维持性血液透析患者心脏结构、功能的影响

目的研究骨化三醇治疗对糖尿病肾病(DN)维持性血液透析患者心脏结构和功能的影响。方法 41例DN维持性血液透析患者接受骨化三醇治疗(0.25μg口服,每天1次)共24周,观察治疗前后血清25(OH)D_3、25(OH)D_2、脑钠肽(BNP)、甲状旁腺素(iPTH)、Ca⁽²⁺⁾水平、QT离散度/校正的QT离散度(QTd/QTed)、左心房内径(LAD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室后壁舒张期厚度(LVPWDT)、室间隔舒张期厚度(IVSDT)、左室射血分数(LVEF)及舒张早期和舒张晚期二尖瓣口最大血流速度之比(E/A)等的变化并对比分析。结果治疗后,血25(OH)D_3及血Ca(2+)水平、QT离散度/校正的QT离散度(QTd/QTed)、左心房内径(LAD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室后壁舒张期厚度(LVPWDT)、室间隔舒张期厚度(IVSDT)、左室射血分数(LVEF)及舒张早期和舒张晚期二尖瓣口最大血流速度之比(E/A)等的变化并对比分析。结果治疗后,血25(OH)D_3及血Ca⁽²⁺⁾水平明显上升,BNP、iPTH水平明显下降,QTd及QTcd明显缩短,LVEDD、LVPWDT、LAD、IVSDT、LVEF、E/A均有明显改善(P<0.01,P<0.05);25(OH)D_3与血BNP、iPTH、QTd、QTcd、LAD、LVPWDT、IVSDT、LVEDD均呈负相关,(r=-0.39,r=-0.49,r=-0.65,r=-0.66,r=-0.48,r=-0.49,r=-0.50,r=-0.52,P<0.05,P<0.01),与LVEF及E/A呈正相关(r=0.47,r=0.46,P<0.01)。结论 25(OH)D_3治疗可改善DN维持性血液透析患者的心脏结构和功能,减轻心室肌复极不同步性及不稳定性。     

黑骨藤化学成分与生态因子和土壤因子的相关性

目的 研究不同产地苗族药黑骨藤中8个化学成分含量与生态因子和土壤因子的相关性。方法 采用超高液相色谱法（UPLC）同时测定新绿原酸,绿原酸,隐绿原酸,异绿原酸B,异绿原酸A,异绿原酸C,原花青素A₂和杠柳毒苷的含量。收集各产地样品根系土壤,并进行多种土壤因子检测。利用ArcGIS软件提取气候数据,GPS记录地形数据。利用SPSS 24.0统计软件对不同产地药材中的8个化学成分含量与生态因子和土壤因子进行双变量分析和逐步回归分析。结果 建立了8个化学成分含量与生态因子和土壤因子的逐步回归方程,分析其结果,新绿原酸与最冷季度降水量呈负相关;绿原酸与最干月降水呈负相关;隐绿原酸与最冷季度降水量和最暖季节平均温度呈负相关,与硒呈正相关;异绿原酸B主要受到土壤因子的影响,与有效铁和钼呈正相关,与全磷和有效磷呈负相关;异绿原酸A与钼呈正相关,与降水变异系数呈负相关;异绿原酸C与交换性镁呈正相关;原花青素A₂与钼呈正相关,与速效钾呈负相关;杠柳毒苷与降水变异系数负相关。结论 明确了黑骨藤中8个化学成分与生态因子和土壤因子之间的相关性,为黑骨藤引种栽培、规范化种植提供参考,以及进一步研究生态因子和土壤因子与黑骨藤品质形成机制提供理论基础。     

角膜上皮细胞体外培养技术的研究进展

体外重建组织工程角膜并将其用于角膜移植是使角膜盲患者复明的惟一有效途径,其中角膜上皮种子细胞的来源成为急需解决的关键问题。由于体外生长的角膜上皮细胞生命周期短,因此通过改进体外培养技术来获得增殖能力强的细胞成为解决角膜上皮种子细胞来源问题的首要任务。本研究从角膜上皮细胞的体外培养技术包括培养方法和培养条件这两方面进行了综述。     

负载Ad-CTLA4Ig的未成熟树突状细胞延长大鼠移植肾存活时间的探讨

目的 探讨负载细胞毒性淋巴细胞抗原4免疫球蛋白基因重组腺病毒(Ad-CTLA4Ig)的受者未成熟树突状细胞(DC)对大鼠移植肾存活时间的影响.方法 选择雄性SD大鼠为供者,雄性Wistar大鼠为受者,建立大鼠肾移植模型.将受者随机分为4组,每组12只.制备Ad-CTLA4Ig及受者未成熟DC悬液,37℃混合孵育6 h,于移植前7 d,实验组经腹腔内注射负载Ad-CTLA4Ig的DC悬液;Ad-CTLA4Ig对照组、重组腺病毒空载体(Ad-VG)对照组和生理盐水(NS)对照组分别经腹腔内注射1 ml Ad-CTLA4Ig、Ad-VG和NS.观察各组移植肾的存活时间、组织形态学改变、受者血液中腺病毒中和抗体滴度、血清CTLA4Ig水平及混合淋巴细胞反应(MLR)的变化.结果 实验组移植肾存活时间为(94.6±9.0)d,较各对照组显著延长:[Ad-CTLA4Ig对照组为(39.6±10.6)d,Ad-VG对照组为(8.6±2.8)d,NS对照组为(8.4±2.6)d],差异均有统计学意义(P＜0.01),实验组移植肾组织损伤程度较轻,血液中腺病毒中和抗体滴度及混合淋巴细胞反应指数均较各对照组显著减少;实验组血清CTLA4Ig水平较Ad-CTFLA4Ig对照组显著升高.结论 负载Ad-CTLA4Ig的受者未成熟DC可减少腺病毒中和抗体,维持CTLA4Ig的稳定表达,从而延长大鼠移植肾的存活时间.     

酚试剂分光光度法测定水中微量戊二醛

[目的]建立一种快速有效地检测水中微量戊二醛的酚试剂分光光度法。[方法]采用戊二醛与酚试剂(3-甲基-苯并噻唑腙,MBTH)反应生成嗪,嗪在酸性溶液中能够被高铁离子氧化生成蓝绿色化合物,利用产生的颜色与戊二醛含量成正比的原理,采用酚试剂分光光度法对水中微量戊二醛含量进行测定,分析入射波长、酚试剂浓度、显色剂酸溶解条件、显色温度和显色时间等因素对实验结果的影响并确定最佳条件。[结果]确定了604 nm处为最佳吸收波长;MBTH和硫酸高铁铵的最佳用量分别为200 mg/L和1 800 mg/L;在30℃下放置15 min后MBTH与戊二醛能够充分反应生成嗪;其次研究了显色剂酸溶解条件,其最佳盐酸溶解用量为0.2 mol/L;最后研究得出最佳显色温度和显色时间为40℃下静置40 min。在最佳测试条件下,吸光度与戊二醛浓度在0.005~1.00 mg/L范围内呈现良好线性关系,检测限为0.005 mg/L,相对标准偏差为0.34%,平均加标回收率为98.13%。[结论]该方法检测限低、灵敏度高、线性范围宽,能够快速有效地检测水中微量戊二醛。     

雷公藤多甙对糖尿病肾病患者Th1/Th2细胞平衡的影响

目的:观察雷公藤多甙治疗糖尿病肾病患者的安全性,及对Th1/Th2细胞平衡的影响。方法:符合纳入标准的糖尿病肾病患者24例(所有患者均有降压降糖基础治疗),随机分为两组各12例,对照组不使用雷公藤多甙片,治疗组口服雷公藤多甙片,60mg/天,分3次给药,并设健康成年人12例为空白对照组,不用药。观察周期为1个月。治疗后留取血及尿标本,检测理化指标,流式细胞仪检测Th1/Th2。结果:与对照组比较,治疗组24 h尿蛋白定量、Th1/Th2比值明显下降,差异有统计学意义。结论:雷公藤多甙片具有降低糖尿病肾病患者蛋白尿的作用,相对安全,同时具有改变糖尿病肾病患者Th1/Th2细胞平衡的作用。雷公藤多甙片可能通过改变Th1/Th2细胞平衡降尿蛋白。     

不同缺氧状态对人肝癌HepG2细胞侵袭和转移能力的影响

目的: 探讨不同缺氧状态对人肝癌HepG2细胞黏附、侵袭和转移能力的影响及其可能机制。方法: 不同浓度的低氧处理对数生长期的人肝癌HepG2细胞,采用MTT法、Transwell膜侵袭系统、免疫细胞化学方法、明胶酶谱分析和反转录PCR检测变异型白细胞分化抗原CD44v6、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、低氧诱导因子(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异。结果: HepG2细胞经低氧处理后,细胞的基质黏附率、穿透基底膜与游走迁移的细胞数均增高,以3%氧浓度最为显著(P<0.05);3%和5%氧处理还可显著促进CD44v6的表达,增加MMP-2和MMP-9的表达,并可上调HIF-1α和VEGF。结论: 适度缺氧能增强人肝癌细胞的黏附、侵袭和转移能力,其机制可能与CD44v6、基质金属蛋白酶、HIF-1α和VEGF的表达改变有关。