HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中的知母皂苷B-Ⅱ

目的建立快速、灵敏和准确的大鼠血浆中知母皂苷B-Ⅱ液质联用(HPLC-MS/MS)定量分析方法。方法大鼠血浆样品用乙腈沉淀蛋白,上清液经Alltima HP C18柱(2.1mm×50mm,5μm)分离,采用负离子检测多反应监测模式(MRM)、电喷雾离子化(ESI)对知母皂苷B-Ⅱ进行定量分析,内标为ParisaponinⅠ(重楼皂苷Ⅰ)。检测离子对为知母皂苷B-Ⅱ离子对(m/z919.4→757.4)与"重楼皂苷Ⅰ"离子对(m/z1033.5→901.4)。结果方法的线性范围为5～2000μg·L-1,最低定量下限5μg·L-1。日内精密度<10.9%,日间精密度<6.6%,准确度为-8.6%～7.5%;每样品分析时间为3min。结论该法准确、灵敏、特异,适用于血浆中知母皂苷B-Ⅱ的测定。     

反相高效液相色谱结合柱前衍生化法测定人血清中L-门冬酰胺

目的:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)快速准确测定人血清中L-门冬酰胺(L-ASN)。方法:用已耗竭L-ASN的人血清为空白生物基质建立标准曲线,邻苯二甲醛在线柱前衍生样品,ZORBAX Eclipse AAA柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离衍生化产物。采用内标法根据荧光响应值定量分析。结果:L-ASN与内标高丝氨酸的衍生物均在16 min内出峰,在2～100μmol.L-1的范围内方法线性关系良好(r>0.999),最低定量限为2μmol.L-1,日内与日间精密度(RSD)均小于12.9%,回收率在96.9%～108.3%之间,平均提取回收率为58.2%,血清中L-ASN-80℃冻存四周保持稳定。结论:建立了RP-HPLC结合柱前衍生化测定人血清中L-ASN的方法,并应用于临床血清样品中L-ASN的定量测定。     

JOSD1在肝细胞癌中的表达及对细胞增殖、克隆、迁移的影响研究

目的探讨含约瑟芬结构域的蛋白1（JOSD1）在肝细胞癌（HCC）中的表达及对HCC细胞增殖、克隆、迁移的影响。方法利用公共生物信息学分析平台（http://gepia.cancer-pku.cn/detail.php）分析JOSD1在HCC组织及癌旁组织的表达差异;收集2022年10月至2023年5月在嘉兴市第一医院行肝癌根治术的4例HCC组织及癌旁组织标本,分析两种组织中的JOSD1蛋白表达差异;选择人HCC细胞株（Huh7）,转染特异性小干扰RNA（siRNA）,并设立JOSD1敲低组（siJOSD1组）和阴性对照组（siNC组）;CCK-8法、克隆形成实验、Transwell迁移实验检测敲低JOSD1对Huh7细胞增殖、克隆、迁移能力的影响;Westernblot法检测敲低JOSD1对Huh7细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达水平的影响。结果公共生物信息学分析显示HCC组织中JOSD1表达水平明显高于癌旁组织（P＜0.05）,进一步临床样本验证发现,HCC组织JOSD1蛋白表达水平明显高于癌旁组织（P＜0.05）;与siNC组相比,siJOSD1组Huh7细胞的增殖、克隆、迁移能力均下降（均P＜0.05）,E-cadherin蛋白表达水平上调（P＜0.05）,N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均下调（均P＜0.05）。结论HCC中JOSD1表达上调,敲低JOSD1可显著降低HCC细胞的增殖、克隆、迁移能力,可能通过上调E-cadherin,下调N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平发挥作用。     

某医院新生儿重症监护病房导管相关感染目标性监测结果分析

摘要 目的 了解医院新生儿重症监护病房(NICU)导管相关感染情况。方法 采用前瞻性目标性监测法,对某医院NICU住院所有新生儿导管相关感染进行目标性监测分析。结果 2014-2018年共监测NICU住院新生儿2 135例,住院总共日数28 756 d,发生导管相关感染284例,医院感染率为13.30%,日感染率10.64‰。感染以呼吸机相关性肺炎(VAP)为主,日感染率为14.38‰。NICU医院感染患儿送检标本共分离出病原菌414株,其中革兰阴性菌266株,占64.25%|革兰阳性菌103株,占24.88%|真菌45株,占10.87%。4种主要革兰阴性杆菌对头孢类抗菌药物耐药率均达到50%以上,仅对亚胺培南等碳青霉烯类抗菌药物敏感|金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌等葡萄球菌属对多数抗菌药物耐药率均达到75%以上,只对替考拉林和万古霉素敏感|未发现真菌的耐药菌株。结论 该NICU住院患儿发生导管相关感染发生率较高,应加强导管相关感染监测,有针对性地采取防控措施。     

长期索拉菲尼暴露促进Huh7肝癌细胞上皮间质变的实验研究

目的探讨索拉菲尼耐药肝癌细胞发生上皮间质变(EMT)及侵袭、转移能力增强的机制。方法通过药物连续诱导人肝癌细胞株Huh7建立索拉菲尼耐药肝癌细胞株Huh7R,显微镜下观察细胞形态学变化;CCK-8细胞增殖试验检测Huh7R细胞增殖能力;荧光定量PCR检测ABC家族耐药基因ABCB1、ABCC1、ABCG2及EMT相关调控锌指蛋白转录因子Snail、Slug基因表达水平;Westernblot检测耐药蛋白ABCG2,EMT标记分子E-cadherin、Vimentin及N-cadherin,转录因子Snail、Slug蛋白表达水平;Transwell小室侵袭试验检测Huh7R细胞迁移、侵袭能力。结果Huh7R细胞呈细长形,伴纤维状突起,形态学上符合EMT改变;CCK-8细胞增殖试验显示在索拉菲尼作用下,Huh7R细胞生存率高于Huh7细胞;荧光定量PCR结果显示,Huh7R细胞ABCB1、ABCC1、ABCG2及Snail、Slug基因表达水平均高于Huh7细胞（均P＜0.05）;Westernblot显示,Huh7R细胞上皮标记蛋白E-cadherin表达水平低于Huh7细胞（P＜0.05）,而间质标记蛋白Vimenti、N-cadherin及Snail、Slug蛋白表达水平均高于Huh7细胞（均P＜0.05）;Transwell小室侵袭试验显示Huh7R细胞迁移、侵袭能力均较Huh7细胞增强。结论长期低剂量索拉菲尼暴露会促进肝癌细胞Snail和Slug表达,诱导肿瘤细胞发生EMT,增强其侵袭、转移能力。     

新生儿B族链球菌败血症15例临床分析

<正>B族链球菌(group B streptococcus,GBS)又称无乳链球菌(s.agalactiae),是西方国家新生儿败血症、肺炎及脑膜炎的最常见病原菌之一,我国发病率较低,以个案报道多见。但近几年国内有关新生儿感染GBS报道较前明显增多[1-2]。现将本院收治的15例GBS败血症病例总结分析如下。1临床资料选择2010年4月—2014年4月温州市儿童医     

放射性同位素示踪技术在反义核酸研究中的应用

用放射性同位素标记反义核酸,可方便地对反义核酸的体内行为进行研究,或者进行反义显像和反义治疗。目前已有多种不同性质的放射性同位素被用于反义核酸标记,标记方法也不断得到完善。本文对常用于反义核酸标记的放射性同位素的特点及其标记方法进行综述,介绍其在反义治疗药物和反义显像研究中的应用情况,并评述了反义核酸同位素标记存在的问题和发展趋势。     

2000～2002年上海市南汇区食物中毒情况分析

预防控制食物中毒历来是卫生行政部门的重点工作。为了解和探索本区食物中毒发生规律和特点 ,为预防食物中毒提供科学依据 ,现将本区卫生监督所成立以来 (2 0 0 0～ 2 0 0 2年 )的食物中毒情况分析如下 :1　材料与方法资料来自本区 2 0 0 0～ 2 0 0 2年食物中毒季度、年度报表及其调查资料。按照食物中毒发生的时间、中毒原因、责任单位、中毒食品、中毒致病因素等进行统计分析[1] ,提出预防对策。2　结果2 .1　基本情况2 0 0 0～ 2 0 0 2年 ,本区共发生食物中毒 18起 ,中毒人数 488人 ,发病率为 2 3.2 4/10万 ,无死亡人数。2 .2　时间分布…     

产前超声检查在双胎妊娠并发症诊断及治疗中的价值探讨

目的:探讨并分析产前超声检查在双胎妊娠并发症诊断及治疗中的应用价值.方法:选取2019年6月～2020年7月在本院行产前检查的双胎妊娠孕妇98例,对其进行产前超声检查,对本组孕妇进行分型及分期监测,详细分析检查结果.结果:本组孕妇中,双绒毛膜双羊膜囊双胎(DCDA)、单绒毛膜双羊膜囊双胎(MCDA)、单绒毛膜单羊膜囊双...