树突状细胞疫苗对胃癌术后患者外周血白细胞介素12水平及Th1/Th2平衡的影响

目的探讨胃癌患者术后应用树突状细胞(dendritic cells,DCs)疫苗治疗后机体免疫功能的变化.方法采用外周血单个核细胞及自体肿瘤抗原在体外制备DCs疫苗.采用临床随机对照研究将50例胃癌患者分为2组,常规治疗组在胃癌术后予以化疗,疫苗治疗组术后化疗2周后开始进行DCs疫苗皮下注射,共注射4次.在治疗前后相应各时相点采取患者外周血检测白细胞介素12(IL-12)、IL-4及干扰素γ(IFN-γ)的水平.结果疫苗治疗组患者DCs注射前及注射后2周、4周和8周的外周血IL-12的水平分别为(37±4)pg/ml、(68±6)pg/ml、(96±12)pg/ml和(59±9)pg/ml;IFN-γ的水平分别为(61±12)pg/ml、(134±19)pg/ml、(145±20)pg/ml和(111±15)pg/ml;IL-4的水平分别为(55±7)pg/ml、(49±6)pg/ml、(46±5)pg/ml和(50±8)pg/ml.而常规治疗组患者外周血IL-12、IFN-γ及IL-4的水平分别为(39±7)pg/ml、(45±9)pg/ml、(44±10)pg/ml、(44±6)pg/ml;(63±10)pg/ml、(61±13)pg/ml、(62±11)pg/ml、(61±7)pg/ml;(52±11)pg/ml、(55±9)pg/ml、(53±10)pg/ml、(55±8)pg/ml.疫苗治疗组患者外周血IL-12及IFN-γ水平在疫苗治疗后明显提高,与同期正常对照组相比差异有显著意义(P<0.05).结论 DCs疫苗可提高胃癌患者术后外周血IL-12的水平,并促进 T 细胞向Th1方向发展,临床应用无明显不良反应.     

树突状细胞疫苗对胃癌患者术后免疫功能影响的初步观察

目的探讨树突状细胞(DCs)疫苗治疗胃癌术后患者的临床疗效。方法采用外周血单个核细胞及自体肿瘤抗原在体外制备DCs疫苗,将50例胃癌术后患者随机分为两组,对照组予以常规化疗;疫苗治疗组常规化疗2周后进行DCs疫苗皮下注射,每周1次、共4次。治疗前后检测患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞百分比的变化,观察DCs疫苗治疗的初步临床效果及不良反应。结果疫苗治疗组外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞百分比在DCs注射2周后开始上升,4周后上升至最高值犤CD3 (71.2±9.8)%,CD4 /CD8 (1.76±0.24)%,NK细胞(13.5±2.6)%犦,第8周下降;与同期对照组犤CD3 (58.8±9.2)%,CD4 /CD8 (1.26±0.29)%,NK细胞(10.8±2.3)%犦相比,差异有显著性意义(P<0.05)。疫苗治疗组患者血常规及肝肾功能检测均正常,未出现明显毒副反应。结论DCs疫苗可明显改善胃癌术后患者T细胞亚群及NK细胞百分比,临床应用无明显不良反应。     

转染rhscIL-12对人树突状细胞功能的影响

目的观察rhscIL-12基因转染的人树突状细胞(dendritic cells,DCs)功能的改变.方法构建rhscIL-12和逆转录病毒载体的重组体,脂质体介导转染人外周血来源DCs,以流式细胞仪分析细胞表型改变,ELISA检测IL-4、IL-12和IFN-γ的水平.结果rhscIL-12转染DCs后可进一步上调DCs表面分子的表达,IL-12的分泌量明显提高;在混合淋巴细胞反应中,Th1型细胞因子IFN-γ的水平明显上升,Th2型细胞因子IL-4显著下降;随着IL-12的分泌量的增加,IFN-γ含量明显增加,二者存在着显著正相关关系(r=0.955 678,P＜0.01).结论rhscIL-12体外转染DCs能上调DCs表面分子表达,诱导Th0向Th1分化,增强机体抗肿瘤免疫效应.     

临床用的抗肿瘤树突状细胞疫苗的制备及保存

目的探讨在体外制备可供临床使用的肿瘤树突状细胞疫苗的有效途径及冻存方法.方法采用外周血单核细胞诱导DCs,自体胃癌细胞裂解抗原负载DCs,制备树突细胞疫苗.分别观察、检测了新鲜制备的DCs疫苗和冻存2周及2月的DCs疫苗的大体形态,免疫表型及刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力,并行细菌学检查.结果新鲜制备的DCs疫苗高表达成熟DCs表面标志物HLA-DR、CD80及CD83,具有很强的刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力.疫苗冻存2个月以内,DCs细胞表型及刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力无明显下降.结论采用本方法制备的DCs疫苗,无论从数量及质量均达到了临床应用的要求.并且证实疫苗冻存2月以内对疫苗质量无明显影响.