藏药柳茶提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠降糖作用的研究

目的 研究柳茶提取物对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的空腹血糖、糖耐量及胰腺病理变化的影响.方法 腹腔注射四氧嘧啶(ALX)建立糖尿病小鼠模型,随机分为模型对照组、阳性对照组、柳茶提取物高、中、低剂量组,同时设空白组,正常给药组,连续给药14 d后,测定血葡萄糖浓度,进行小鼠糖耐量实验,取各组小鼠胰腺进行包埋、固定、HE染色观察柳茶水提物对其修复作用.结果 柳茶中、低剂量组可显著降低糖尿痛小鼠空腹血糖(P＜0.01),对其糖耐量异常有良好改善作用;高剂量组对血糖影响不明显,只延缓高血糖小鼠糖耐量曲线.各剂量对正常小鼠血糖都没有明显作用.结论 柳茶中、低剂量组对小鼠糖尿病有良好治疗作用,各剂量对四氧嘧啶造成的胰腺损伤都有一定修复作用.机制可能与修复胰岛β细胞,调节代谢有关.     

HBeAg真核表达载体的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达

目的 克隆HBeAg基因,构建重组HBeAg真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中进行表达.方法 采用PCR法从HBeAg阳性乙型肝炎患者血清HBV DNA中扩增HBeAg基因,克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中,构建重组pcDNA-HBeAg真核表达载体,经PCR、双酶切、测序鉴定后,将其转染入CHO细胞,G418筛选,用PCR、免疫斑点、Western Blot、免疫细胞化学方法检测HBeAg在CHO细胞中的表达.结果 成功克隆到HBeAg基因,并构建了重组pcDNA-HBeAg真核表达载体;基因测序证实克隆的HBeAg基因中共有12个位点发生单碱基置换突变(C1819G,A2007T,C2046T,C2061G,G2106A,C2109A,C2146T,T2172C,C2203T,A2235G,G2253A,C2298T),1个位点发生缺失突变(2346 del T);成熟HBeAg蛋白中149位缬氨酸(valine,V)突变为苯丙氨酸(phenylalanine,F)(V149F),在HBeAg蛋白羧基端融合有一段长11个氨基酸的多肽(RLESRGPVZTR).PCR、免疫斑点、Western Blot和免疫细胞化学方法证实重组pcDNA-HBeAg真核表达载体可在CHO细胞中表达分泌型HBeAg蛋白.结论 重组HBeAg真核表达载体的构建和表达为HBeAg的临床诊断和深入研究提供了条件.     

复方尼阿措提取物对高脂血症大鼠的调血脂作用

目的:探讨复方尼阿措提取物(CNAE)的调血脂作用。方法:通过灌胃脂肪乳剂制备实验性高脂血症大鼠模型。随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(1 mL.kg-1)、柳茶水提物(SAE)低、高剂量组(6.01,2.0 g.kg-1)、CNAE低、高剂量组(8.0,16.0 g.kg-1)。除正常组外,各给药组大鼠灌胃给予脂肪乳剂,基础饲料喂养,末次给药后,腹主动脉采血测定血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:CNAE能明显降低TC、TG、LDL-C和MDA含量(P<0.01),升高HDL-C浓度,显著提高SOD及GSH-Px酶活性(P<0.01),且降血脂作用优于SAE。结论:CNAE具有明显的调血脂和抗氧化作用,提示其可用于高脂血症的防治。     

如何理解和实施“病人选医生”

研究解决实施病人选择医生的方法,进行医疗机构内部改革新尝试。作者从医疗改革必须主动适应社会需求出发,介绍“医生任你点,重点药物让你知,治疗方案助你选”方案实施过程的经验,阐明了如何在充分尊重病人权益的前提下,实施以病人为中心的医改思想。     

常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞的抑制作用及基于生物信息学的机制探讨

目的 研究常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞的抑制作用及机制。方法 通过噻唑蓝（MTT）比色法、苏木素-伊红（HE）染色、4''，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色、平板克隆形成实验、划痕实验、流式细胞术测定细胞凋亡和细胞周期等，从不同角度研究了常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞的抑制作用，进一步利用Pharm Mapper、UniProt、Swissdock、STRING和Metascape等在线平台，进行靶点筛选、基因注释、分子对接验证、蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络构建、基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析，探讨其作用机制。结果 与空白组比较，常春藤皂苷B（15、30、60、120 μmol·L^-1）可显著降低HGC-27胃癌细胞存活率（P<0.01），呈浓度和时间依赖性，常春藤皂苷B低于120 μmol·L^-1时对正常细胞GES-1无增殖抑制作用；与空白组比较，常春藤皂苷B（30、60、120 μmol·L^-1）可诱导HGC-27胃癌细胞胞质空泡的形成和细胞核变形固缩，抑制其迁移能力（P<0.01），诱导HGC-27胃癌细胞凋亡和细胞周期阻滞（P<0.05，P<0.01）；当常春藤皂苷B 10、20、30 μmol·L^-1时，对HGC-27胃癌细胞独立生存能力和增殖能力有抑制作用（P<0.01）。其作用靶点可能与驱动蛋白样蛋白KIF11、3''，5''-环磷酸鸟苷特异性磷酸二酯酶、胱天蛋白酶-3、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Chk1）、原癌基因酪氨酸蛋白激酶、表皮细胞生长因子受体和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）8等相关，机制可能与癌症通路中的MAPK信号通路和幽门螺旋杆菌感染的上皮细胞信号通路中的黏附连接、局部连接、癌症中的蛋白聚糖通路等相关。结论 常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞具有抑制作用，可能是多靶点多通路协同作用的结果。     

睾丸扭转的诊治（附46例报告）

目的：提高睾丸扭转的诊治水平。方法：对46例睾丸扭转患者的临床资料进行总结：46例平均年龄17岁，左侧31例占67．4％，发病至确诊时间3小时～11天。46例均有睾丸或下腹部绞痛症状，Prehn征阳性28例；彩色多普勒超声显示29例睾丸、附睾血流减少或消失。结果：8例12小时以内手法复位或手术者，睾丸均存活；6例12～24小时手术者，3例睾丸存活；31例超过24小时手术者，仅1例睾丸存活；2例未手术。结论：彩色多普勒超声有助于睾丸扭转的早期诊断，应作为诊断该疾病的首选检查方法。早期诊断、及时治疗是提高疗效的关键。     

甘肃产百里香挥发油成分的GC/MS分析

目的:对甘肃产百里香挥发油成分进行分析比较研究。方法:水蒸气蒸馏法提取百里香挥发油,用GC/MS法对不同样品精油成分进行分析鉴定,并利用柱色谱法对挥发油中部分化合物分离纯化,辅助鉴定精油化学成分。结果:从3种精油中共鉴定出89种化合物,其中化合物相对含量大于0.5%的共有成分有10种。达宗湖产精油主要成分为香叶醇、百里香酚和长叶烯等;扎油沟产精油以芳樟醇和百里香酚等为主;天水产精油主要含有侧柏烯、桉叶醇、百里香酚和雪松醇等。结论:甘肃产百里香挥发油的主要化学成分为单萜类化合物;同种植物由于生长环境的差异,使其精油成分及相对含量产生影响。     

衍生化气相色谱法测定冠心病患者血清中游离脂肪酸的方法学研究

目的建立同时测定冠心病患者血清中11种游离脂肪酸(FFA)含量的测定方法。方法采用N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)对11种FFA进行硅烷化反应,并利用气相色谱质谱联用技术(GC/MS)同时测定冠心病患者血清冻干粉中11种FFA的含量。结果 11种FFA色谱峰完全分离,峰形良好,血清中杂质对测定不产生干扰。在测定浓度范围内线性关系良好,11种FFA的回收率均75%,日内、日间精密度和重复性实验的相对标准偏差(RSD)均10%。结论该方法具有操作简单、灵敏度高、准确性好、线性范围宽等优点,可应用于临床实际血清样品中FFA的分析检测。     

双波长HPLC同时测定金刚藤软胶囊中5个活性成分的含量

目的:建立双波长HPLC同时测定金刚藤软胶囊中绿原酸、白藜芦醇、芦丁、槲皮素和山柰酚含量的方法。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,柱温25℃,检测波长306 nm(绿原酸、白藜芦醇)和365 nm(芦丁、槲皮素、山柰酚)。结果:绿原酸、白藜芦醇、芦丁、槲皮素、山柰酚分别在0.058 5~2.34μg(r=0.999 8),0.025 3~1.01μg(r=0.999 9),0.042 2~0.844μg(r=0.999 6),0.018 1~0.722μg(r=0.999 9),0.0165~0.660μg(r=0.999 9)呈现良好的线性关系,平均回收率分别为98.0%,100.6%,96.0%,102.7%,98.5%,RSD分别为1.2%,2.2%,1.8%,2.9%,1.3%。结论:该方法操作简便、重复性好,可作为金刚藤软胶囊中5个活性成分的含量测定方法。