经胰管弓状刀乳头括约肌预切开术在ERCP困难性胆管插管患者的应用

目的 总结经胰管弓状刀乳头括约肌预切开术在内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)困难性胆管插管的应用效果。方法 因胆管插管困难行乳头括约肌预切开术患者187例中,114例患者采用经胰管弓状刀(A组),73例采用针状刀(B组),比较两组手术成功率与并发症。结果 A、B组插管成功率相仿(93.9%vs.91.8%)(P>0.05)。A组胰腺炎和出血发生率为5.3%和3.5%,低于B组的15.1%和12.3%(P<0.05)。两组胆管炎发生率相仿(4.4%vs.5.5%)(P>0.05),均无穿孔及死亡病例。结论 经胰管弓状刀或针状刀乳头括约肌预切开术均能有效提高困难性ERCP胆管插管的成功率;前者胰腺炎和出血发生率较低。     

乙型肝炎病毒X蛋白通过降低P4启动子甲基化水平上调人IGF-II基因的转录

目的:构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝癌细胞株HepG2-HBx,探讨HBx对胰岛素样生长因子 II(IGF-II)基因P4启动子甲基化水平及转录表达的影响。方法:应用基因重组技术,构建含HBx基因的重组逆转录病毒载体pBABE-puro-HBx,采用磷酸钙共沉淀法将其转染293FT包装细胞产生逆转录病毒,感染HepG2肝癌细胞,采用嘌呤霉素进行阳性克隆筛选,Western blotting鉴定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx。采用亚硫酸氢盐测序法及实时荧光定量RT-PCR检测HepG2-HBx细胞中P4启动子甲基化水平及P4 mRNA表达水平变化。进一步将体外甲基化的人IGF-II基因P4启动子驱动的荧光素酶报告载体pGL3-P4及含HBx基因的pCMV-tag2B-X质粒共转染HepG2肝癌细胞,采用亚硫酸氢盐测序法及双萤光素酶实验检测pGL3-P4载体上P4启动子甲基化水平及转录调控活性变化。结果:(1)经Western blotting鉴定,成功构建了稳定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx;(2)表达HBx蛋白的HepG2-HBx细胞中P4启动子甲基化CpG位点的比例(9.0%)明显低于对照细胞HepG2-control(25.0%)(P<0.01),而其P4 mRNA表达水平则为对照细胞HepG2-control的2.8倍;(3)共转染pCMV-tag2B-X质粒的HepG2细胞中pGL3-P4载体上P4启动子甲基化CpG位点的比例(60.8%)明显低于共转染对照质粒pCMV-tag2B的HepG2细胞(84.1%)(P<0.01),而前者P4启动子相对萤光素酶活性(14.12±0.89)则明显高于后者(4.61±0.76)(P<0.01)。结论:HBx蛋白可降低IGF-II基因P4启动子甲基化水平,进而上调其转录表达。     

以腹部症状为首要表现的系统性硬化病1例

患者,女,53岁。因腹痛伴反酸、嗳气2年余,加重伴吞咽困难1个月,于2010年10月6日入院。患者2年前无明显诱因下出现腹痛,呈阵发性胀痛,以剑突下及上腹部为主,下午及夜间发作,持续约2 h后缓解,与进食无明显关系,伴反酸、嗳气。于多家医院就诊,考虑"慢性胃炎",给予抑酸剂、胃黏膜保护剂等药物治疗,症状未见明显缓解。1个月前上述症状加重,并伴吞咽困难、双侧手指发硬。患者自发病以来,睡眠精神欠佳,胃纳差,大小便正常,体重无     

抑制IGF2基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用

目的:研究抑制人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用。方法:将重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控抑制IGF2基因的siRNA表达载体pGL3-h AFP-hTERT-siRNA3(简称siRNA3)转染Huh-7细胞和正常肝L-02细胞,另设阴性对照(载体p GL3-hAFP-hTERT)组和空白对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞转染48 h后IGF2 mRNA表达;酶标仪检测转染0、24、48、72 h后的细胞活性;流式细胞仪检测转染48h后细胞周期、细胞凋亡;Western blot法检测细胞IGF2、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)E2、Cyclin D2、Cdc2、Bcl-2蛋白表达水平。结果:与阴性对照组和空白对照组比较,转染siRNA3的Huh-7细胞中IGF2 mRNA表达明显减弱,转染48、72 h后Huh-7细胞活性明显降低,G1期Huh-7细胞明显增加,S期Huh-7细胞明显减少;Huh-7细胞早期、晚期及总凋亡百分比均明显增加,IGF2、PCNA、Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2和Bcl-2蛋白表达均明显减弱,以上差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。转染siRNA3表达载体的L-02细胞上述指标均无明显变化(P>0.05)。结论:重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF2基因的siRNA可特异性抑制Huh-7细胞IGF2表达及细胞增殖,其可能与下调IGF2 mRNA及蛋白表达,进而引起细胞增殖相关基因PCNA、细胞周期调控相关基因Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2及细胞凋亡调控相关基因Bcl-2蛋白表达下调有关。     

青年胃癌并腹壁及全肠道转移1例

患者,男,29岁,因纳差、呕吐、消瘦5个月余,加重伴腹胀、腹泻3个月于2010年12月17日入院.患者5个月前无明显诱因下感食欲不振、恶心、呕吐,呈进行性加重,呕吐物为胃内容物,伴乏力、消瘦.3个月前,上述症状加重,并出现腹胀、腹泻,自觉腹部稍隆起并发硬.     

hAFP及hTERT双启动子调控的针对人IGF-II基因的siRNA特异性抑制人肝癌细胞生长

 目的：设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子II（IGF-II）基因的小干扰RNA（siRNA）序列,构建由重组人甲胎蛋白（hAFP）和人端粒酶逆转录酶（hTERT）双启动子调控的该siRNA表达载体,观察其对肝癌细胞生长的影响。方法：根据siRNA设计原则,参照IGF-II mRNA序列设计3对siRNA序列及1对阴性对照序列,转染人肝癌Huh7细胞,转染24 h后采用实时荧光定量PCR检测IGF-II mRNA表达量变化,筛选干扰效率最高的siRNA序列。采用PCR扩增出hAFP及hTERT启动子的核心序列,应用基因重组技术构建重组hAFP和hTERT双启动子调控的该siRNA表达载体。将上述siRNA表达载体转染Huh7细胞及L-02人正常肝细胞,观察IGF-II mRNA表达及细胞生长情况变化。结果：实时荧光定量PCR显示,siRNA3在25 nmol/L浓度时抑制效率最高,约90%。成功扩增hAFP及hTERT启动子核心序列,将其分别克隆入pGL3-Basic载体,构建成重组pGL3-hAFP-hTERT载体;将siRNA3克隆至pGL3-hAFP-hTERT载体,构建成重组pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3表达载体。Huh7细胞IGF-II mRNA表达量显著降低,抑制效率达86%,细胞增殖受到明显抑制,G1期细胞比例显著增加;L-02细胞上述指标无明显改变。结论: 成功构建双重RNA聚合酶II启动子（hAFP及hTERT双启动子）调控的针对IGF-II基因的siRNA表达载体,即pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3;该siRNA表达载体可特异性抑制IGF-II mRNA表达及肝癌细胞生长。     

胶囊内镜诊断老年肠道蛔虫病1例

患者女,61岁。2010年11月24日因"反复上腹痛2年余"入院。患者2年前无明显诱因出现上腹隐痛,多位于剑突下,有时感右上腹钝痛并向后背部放射,与饮食及体位无明显关系。多次到门诊就医,诊断为"慢性浅表性胃炎、胃肠功能紊乱"等,予以抑酸、保护胃黏膜、促胃肠动力等治疗,     

益生菌制剂治疗轻微型肝性脑病的荟萃分析

目的:评价益生菌制剂治疗轻微型肝性脑病(minimal hepatic encephalopathy,MHE)的疗效.方法:检索PubMed、EMBASE、WebofScience、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化期刊全文数据库等关于益生菌制剂治疗MHE的临床随机对照试验(RCT),使用Cochrane图书馆提供的Review Manager4.3软件对入选试验进行荟萃分析.结果:共9项试验满足纳入标准而入选本研究,荟萃分析表明:与对照组相比,益生菌制剂可明显缩短数字连接试验(NCT)反应时间(WMD=13.60,95%CI:1.53-25.66,P=0.03),有效降低血氨水平(SMD=0.98,95%CI:0.25-1.71,P=0.008),减轻内毒素血症(SMD=1.03,95%CI:0.65-1.42,P<0.00001),改善ALT水平(WMD=11.72,95%CI:5.57-17.88,P=0.0002),并降低临床肝性脑病的发生率(RR=0.15,95%CI:0.0...     

多发性骨髓瘤伴高淀粉酶血症1例

患者女,77岁.因"反复腰背部疼痛不适2个月,加重伴腹痛1周"于2011年7月入院.患者2月前无明显诱因出现腰背部疼痛不适,伴有全身关节酸胀,无明显缓解因素,无发热、黄疸,无恶心、呕吐,曾于外院腰椎平片检查考虑"L1-L2骨折",给予对症支持治疗,症状未见明显缓解.一周前患者出现上腹部胀痛不适,伴呕吐,在当地医院查血清淀粉酶1 132 U/L,诊断为"急性胰腺炎",予禁食、消炎、解痉、补液等治疗,疗效欠佳,为求进一步诊治,来我院就诊,拟"急性胰腺炎"收入我科.患者自起病以来,精神、睡眠较差,胃纳差,大小便正常,体重下降约3 kg.     

替比夫定与拉米夫定治疗慢性乙型肝炎疗效比较的Meta分析

目的比较替比夫定与拉米夫定对慢性乙型肝炎患者的疗效。方法检索PUBMED、EMBASE、Web of Science、TheCochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化期刊全文数据库等有关替比夫定与拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床随机对照试验,采用RevMan 4.2.10软件对入选试验进行Meta分析。结果共7项随机对照试验包含2672例慢性乙肝患者符合入选标准。Meta分析结果显示:替比夫定组的HBV DNA阴转率、HBeAg消失率、HBeAg血清学转换率、治疗应答率均明显高于拉米夫定组,RR值分别为1.46(95%CI:1.35~1.57,P<0.00001)1、.28(95%CI:1.13~1.45,P=0.0001)1、.31(95%CI:1.14~1.52,P=0.0002)1、.31(95%CI:1.23~1.40,P<0.00001),而病毒耐药率和病毒学突破率则显著低于拉米夫定组,RR值分别为0.58(95%CI:0.48~0.69,P<0.00001)和0.52(95%CI:0.44~0.60,P<0.00001)。替比夫定组的ALT复常率和一般药物不良反应率与拉米夫定组比较无统计学差异(RR=1.13,95%CI:0.99~1.27,P=0.06;RR=1.05,95%CI:1.00~1.11,P=0.07)。替比夫定组肌酸激酶(CK)升高率高于拉米夫定组,RR值为3.26(95%CI:2.28~4.67,P<0.00001)。结论替比夫定可强效抑制乙肝病毒复制,对慢性乙型肝炎的疗效优于拉米夫定,且相对较为安全,但其引起CK值升高应予以注意。