胆汁淤积与胆汁酸转运蛋白关系的研究进展

胆汁不仅能够帮助消化和吸收脂肪,还能将某些代谢产物从肝脏排出体外,对正常的代谢活动起了至关重要的作用。机体内的胆汁在正常生理状况下处于肠肝循环的动态平衡之中,当胆汁的生成或是流动受到影响时就会引起胆汁淤积。胆汁酸作为胆汁主要成分之一,它的合成、转运、分泌以及重吸收的任何一个环节出现差错,胆汁的肝肠循环都会受到影响。     

总乳香酸与乳香肝毒性比较研究

目的:研究乳香和从中提取的总乳香酸对大鼠肝脏毒性作用。方法:60只Wistar大鼠随机分为对照组、乳香组、总乳香酸低、中、高剂量组。乳香组给药剂量为6g生药/kg,总乳香酸低、中、高剂量组给药剂量分别为1.5、3、6g生药/kg。连续灌胃给药4周后,检测血清AST、ALP及ALT指标和血清、肝组织中氧化应激指标MDA、SOD;进行大鼠骨髓微核试验。结果:与对照组相比,乳香组肝系数显著升高;血清ALT、MDA升高,肝组织MDA升高,SOD降低;总乳香酸组血清SOD升高,肝组织MDA、SOD降低;各给药组微核率与对照组无明显差异。结论:乳香在6g生药/kg剂量下有一定的肝毒性,总乳香酸没有明显的肝损伤;乳香及总乳香酸无明显遗传毒性。     

乳香没药对细胞色素P450活性的影响

目的:考察乳香没药对细胞色素P450活性的影响。方法:56只小鼠分为对照组和乳香+没药3.15,2.10,1.05 g.kg-1剂量组,连续ig给药7 d;48只小鼠分为对照组和乳香、没药、乳香+没药组,ig给药3.15 g.kg-11次。所有小鼠末次药后30 min ip给予戊巴比妥钠,观察乳香没药对P450的影响。40只大鼠分为对照组、乳香组、没药组、乳香+没药组,以3.00 g.kg-1连续ig给药14 d,取肝脏制备各组动物肝微粒体,并用cocktail探针法考察乳香没药对大鼠CYP1A2,CYP2E1,CYP3A4的影响。结果:乳香+没药3.15,2.10,1.05 g.kg-1剂量连续给药7 d均可使戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠率降低(P<0.05,P<0.01),而单次给药3.15g.kg-1有使戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠率升高的趋势。乳香、没药及乳香+没药混合物组大鼠肝微粒体体外对非那西丁、氯唑沙宗代谢率显著高于对照组,而氨苯砜无明显差异。结论:乳香、没药连续用药均使CYP1A2,CYP2E1活性增强,而对CYP3A4则无显著影响。     

补骨脂4种组分对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子的影响

目的 探讨补骨脂4种组分补骨脂素、corylifol A、新补骨脂异黄酮、补骨脂酚对巨噬细胞RAW264.7细胞炎症因子的影响。方法 ELISA法测定补骨脂4种组分对LPS刺激RAW264.7细胞TNF-a,IL-1β,IL-6分泌的影响及雌激素受体抑制剂(ICI 182.170)的拮抗作用。结果 与正常对照组比较,脂多糖(LPS)组可以显著升高RAW264.7细胞表达TNF-α,IL-1β,IL-6(P < 0.05); corylifol A、补骨脂酚在10 μmol·L-1浓度下能显著降低TNF-α的分泌(P < 0.05);补骨脂素、corylifol A、新补骨脂异黄酮在10 μmol·L-1浓度下能显著降低IL-1β的分泌(P ＜ 0.05);corylifol A、新补骨脂异黄酮、补骨脂酚在10 μmol·L-1浓度下显著降低IL-6的分泌。补骨脂4种组分的抗炎作用与补骨脂雌激素样活性无关。结论 补骨脂4种不同组分对LPS刺激引起的炎症因子的释放有抑制作用,其抗炎作用与雌激素受体样活性无关。     

补骨脂酚对HepG2的细胞毒性及BSEP、NTCP、FXR、CYP7A1的影响

目的 观察补骨脂酚对体外HepG2细胞的毒性和对胆汁酸转运体的影响。方法 用MTT法检测不同浓度补骨脂酚作用于HepG2细胞2、6和24 h对细胞增殖的影响,计算相应IC50值,并检测细胞培养基中AST和ALP活性。用实时定量PCR检测BSEP、NTCP、FXR和CYP7A1的mRNA。结果 HepG2细胞的存活率与补骨脂酚终浓度和作用时间呈负相关,在62.5~187.5μmol/L之间有良好的量效关系。补骨脂酚作用HepG2细胞6 h的IC50=177.9μmol/L,24 h的IC50=41.6μmol/L。补骨脂酚作用24 h的细胞毒性明显,细胞培养基中的AST和ALP活性显著升高,而60μmol/L的环孢菌素A(CsA)几乎可以完全对抗补骨脂酚对HepG2细胞的抑制作用。实时定量PCR检测表明,补骨脂酚作用于HepG2细胞2 h时BSEP被抑制,而24 h时BSEP、NTCP、FXR和CYP7A1的mRNA增加。结论 补骨脂酚对HepG2细胞的细胞毒性可能需要通过线粒体,并可能与其影响肝细胞胆汁酸转运有关。     

乳香没药对大鼠胆汁分泌的影响*

[目的]观察乳香、没药对大鼠胆汁分泌的影响。[方法]Wistar大鼠连续给予乳香、没药及乳香没药2周,剂量均为生药3 g/kg,对照组给予自来水。末次给药后收集胆汁,分别测试胆汁中总胆汁酸(TBA)、谷胱甘肽(GSH)含量。Western blot法检测肝脏法尼醇X受体(FXR)、胆盐输出泵(BSEP)蛋白表达。各组胆汁及乳香、没药生药用乙酸乙酯萃取,采用高效液相色谱(HPLC)法检测。[结果]乳香、没药及乳香没药组胆汁流量明显高于对照组(P<0.05),但各给药组胆汁中TBA、GSH浓度均明显低于对照组(P<0.05),通过胆汁分泌的TBA量乳香、乳香没药组显著低于对照组(P<0.05),而GSH量各给药组无明显变化。与对照组相比,给药组BSEP蛋白表达量差异无统计学意义,FXR有上调趋势;HPLC图中给药组在2~5 min出现乳香、没药成分色谱峰。[结论]乳香、没药均可使大鼠胆汁分泌量增加,但TBA排出量减少,可能是乳香、没药或其代谢产物在排入胆管时竞争性抑制胆汁酸的排出。     

补骨脂乙素诱导HepG2细胞凋亡及对Bcl-2家族表达的影响

目的:观察补骨脂乙素对人肝癌细胞HepG2凋亡及其相关蛋白的影响。方法:用不同浓度补骨脂乙素(3、4、5、6和7mg/ml)处理HepG2细胞24h后,MTT法检测药物对细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:补骨脂乙素4mg/ml即能抑制HepG2细胞的增殖并诱导其凋亡,7mg/ml时凋亡率可达94.57%,在浓度4～7 mg/ml之间有良好的量效关系。补骨脂乙素浓度为7mg/ml时促凋亡蛋白Bax、Bid表达明显增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。结论:补骨脂乙素4mg/ml能诱导HepG2细胞凋亡,可能与其影响Bcl-2家族蛋白的表达有关。     

壮骨1号方镇痛抗炎作用研究

[目的] 观察壮骨1号方镇痛和抗炎作用.[方法] 采用小鼠热板法和醋酸扭体法,观察壮骨1号方的镇痛作用;采用木瓜蛋白酶缓释剂法建立大鼠关节炎模型,观察壮骨1号方的抗炎作用.[结果] 壮骨1号方3.08、1.54 g/kg剂量能明显延长热板所致的小鼠舔后足时间(60 min,19.78 s,P<0.05和20.56 s,P<0.01)、(90 min,20.67 s和20.56 s,P<0.05),显著减少小鼠扭体反应的次数(P<0.01);壮骨1号方各剂量能明显减少大鼠白细胞数和中性粒细胞数(P<0.01),降低大鼠关节周围软组织IL-6含量(P<0.01)、降低关节液IL-6和前列腺素E2(PGE2)含量(P<0.01).[结论] 壮骨1号方具有明显的镇痛和抗炎作用.     

壮骨1号方镇痛抗炎作用研究

[目的]观察壮骨1号方镇痛和抗炎作用。[方法]采用小鼠热板法和醋酸扭体法,观察壮骨1号方的镇痛作用;采用木瓜蛋白酶缓释剂法建立大鼠关节炎模型,观察壮骨1号方的抗炎作用。[结果]壮骨1号方3.08、1.54 g/kg剂量能明显延长热板所致的小鼠舔后足时间(60 min,19.78 s,P0.05和20.56 s,P0.01)、(90 min,20.67 s和20.56 s,P0.05),显著减少小鼠扭体反应的次数(P0.01);壮骨1号方各剂量能明显减少大鼠白细胞数和中性粒细胞数(P0.01),降低大鼠关节周围软组织IL-6含量(P0.01)、降低关节液IL-6和前列腺素E2(PGE2)含量(P0.01)。[结论]壮骨1号方具有明显的镇痛和抗炎作用。     

中药补骨脂的药理作用研究进展

对近年来补骨脂的药理作用研究作了综述,补骨脂中主要含有香豆素类、黄酮类、萜酚类成分,具有治疗白癜风、血管性痴呆、骨质疏松、抗癌、抗炎、抗抑郁等药理作用。