苯并芘(Bap)联合血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)微泵释放法建立实验性小鼠腹主动脉瘤模型

目的 探讨苯并芘（Bap）腹腔注射联合血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）皮下微泵释放法建立实验性小鼠腹主动脉瘤模型的可行性。方法 48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组：对照组、低剂量4周组、低剂量6周组、高剂量6周组。各实验组小鼠经处理后,取腹主动脉瘤、观察其大体形态;切片行HE染色、Masson染色,进行统计学及组织学的评估;采用免疫组织化学法检测各组腹主动脉MMP-12表达水平。结果 高剂量6周组小鼠腹主动脉瘤形成率（83.3%）较其他3组（50.0%、41.7%、0）显著升高（P<0.05）,高剂量6周组平均血管周长与其他3组比较也显著增大（1607±225μm vs 1408±246μm、1394±230μm、935±109μm,P<0.05）。免疫组织化学法检测提示高剂量6周组小鼠腹主动脉壁MMP-12表达（0.62±0.11）较其他3组（0.51±0.10、0.48±0.09、0.11±0.04）显著增多（P<0.05）。结论 高剂量血管紧张素：[0.90mg/（kg·d）]皮下微泵释放6周联合苯并芘（Bap）腹腔注射能够高效地建立腹主动脉瘤模型。     

黄芪甲苷对苯并芘诱导RAW264.7细胞MMPs表达的保护作用

目的 观察黄芪甲苷（astragaloside IV,ASIV）对苯并芘（benzopyrene,Bap）诱导RAW264.7巨噬细胞MMPs表达的保护作用,探讨腹主动脉瘤防治的可能新策略。方法 应用Western blot法观察Bap对RAW264.7巨噬细胞基质金属蛋白酶-9/12（MMP-9、MMP-12）、NF-κB、TNF-α等表达的变化及黄芪甲苷的作用,利用流式细胞仪观察黄芪甲苷对巨噬细胞ROS表达的影响。结果 Bap能够诱导RAW264.7巨噬细胞MMP-9、MMP-12等金属蛋白酶的表达升高和NF-κB、TNF-α等炎性指标的活化。黄芪甲苷具有降低RAW264.7巨噬细胞因Bap诱导而表达升高的MMP-9、MMP-12、NF-κB、TNF-α,同时具有清除ROS的作用。结论 黄芪甲苷能够降低Bap刺激RAW264.7巨噬细胞引起的MMP-9、MMP-12、NF-κB、TNF-α的表达升高,并具有清除ROS的作用。     

阿米福汀对苯并[a]芘诱导腹主动脉瘤形成的作用

目的:研究阿米福汀对苯并[a]芘(Ba P)诱导C57BL/6J小鼠腹主动脉瘤(AAA)形成的作用,并探讨相关机制。方法:体外培养RAW264.7单核巨噬细胞,分为正常对照组,溶剂对照组(即DMSO组),Ba P组,低剂量(1μmol/L)阿米福汀组,中剂量(5μmol/L)阿米福汀组及高剂量(25μmol/L)阿米福汀组,应用Western blot法检测体外培养的RAW264.7单核巨噬细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-12、TNF-α、NF-κB表达。48只C57BL/6J小鼠(8月龄,雄性)随机分为对照组、模型组(AngⅡ+Ba P组)、低剂量(50 mg/kg)阿米福汀组、高剂量(100 mg/kg)阿米福汀组。6周后取腹主动脉察看标本形态;行HE、Masson染色观察血管形态结构;测定腹主动脉的血管周长。Western blot、免疫组化法评价腹主动脉组织中的巨噬细胞浸润情况及MMP-9、MMP-12、TNF-α、NF-κB的表达。结果:Western blot发现Ba P刺激使巨噬细胞MMP-9、MMP-12、TNF-α、NF-κB的表达升高,而阿米福汀对此有显著抑制作用,且呈剂量依赖性(P0.05)。动物实验可见对照组成瘤率为0,高剂量阿米福汀组成瘤率为16.67%,与模型组(58.33%)和低剂量阿米福汀组(33.33%)相比显著降低(P0.05)。免疫组化结果显示高剂量阿米福汀组腹主动脉壁的巨噬细胞浸润程度及TNF-α、MMP-9、MMP-12、NF-κB的表达较模型组和低剂量阿米福汀组相比显著下降(P0.05)。Western blot实验结果证实高剂量阿米福汀组腹主动脉壁TNF-α、MMP-9、MMP-12、NF-κB的表达较模型组和低剂量阿米福汀组相比显著下降(P0.05)。结论:阿米福汀可以抑制Ba P诱导的巨噬细胞的活化,同时可以抑制Ba P诱导的小鼠腹主动脉瘤发生、发展,其机制可能跟抑制NF-κB途径、巨噬细胞浸润及MMPs、TNF-α的表达有关。