比较两种消化酶对分离大鼠肝细胞的影响

目的:比较胶原酶和胰蛋白酶在分离大鼠肝细胞数量、活力、原代培养及MTT试验等四个方面的差别。方法:分别用胶原酶和胰酶分离获取大鼠肝细胞,通过台盼蓝拒染试验测细胞活力并计数,将分离的肝细胞进行原代培养并观察肝细胞形态变化,采用噻唑蓝(MTT)试验测肝细胞的增殖状况。结果:胶原酶分离的肝细胞数量是胰酶的2．4倍,而胰酶分离的肝细胞活力是胶原酶的2．8倍;胶原酶分离的肝细胞原代培养时贴壁慢,生长不良,而胰酶分离的肝细胞贴壁快,生长良好;MTT试验结果表明胰酶分离培养的细胞活性明显高于胶原酶。结论:胶原酶分离的细胞数量及纯度优于胰酶,而胰酶分离的细胞活力优于胶原酶。     

力菲抗病毒液对大鼠的亚慢性毒性研究

目的:观察力菲抗病毒液对大鼠的亚慢性毒性。方法:将力菲抗病毒液每千克体重以20、10、5mL(相当于每千克体重用生药0.006、0.003和0.0015kg)剂量连续给大鼠灌胃4周,停药恢复2周。结果:在恢复期和恢复期末,动物的一般体征正常,除部分组间血液细胞学、脏器系数有明显差异外,其他体重、饲料利用率等测定值均在正常范围内。结论:力菲抗病毒液毒性很低,具有短期使用的安全性。     

齐多夫定对原代大鼠肝细胞毒性作用的研究

目的: 研究齐多夫定对原代大鼠肝细胞的毒性.方法:采用二步灌流法分离Wistar大鼠肝细胞,经台盼蓝拒染试验测定细胞活力,活力＞85%用于实验.实验分4组:药物组、阳性对照组、阴性对照组和空白对照组.肝细胞悬液(3×105个/ml)接种于各培养板:96孔板每孔200 μl,24孔板每孔1 ml,6孔板每孔2.5 ml,各板置37℃、5%二氧化碳培养箱培养4 h,弃上清液.药物组分别加入齐多夫定10、5、3.3、2、0.4、0.08mmol/L,阳性对照组分别加入四氯化碳10、2、0.5 mmol/L,阴性对照组加入含1%二甲基亚砜(DMSO)的DMEM培养液,空白对照组加入DMEM培养液.96孔板于加样后6、12、24 h进行MTT试验测定细胞活性,24孔板于加样后6、12 h测定肝细胞AST、ALT及LDH的释放量,6孔板加样后12 h将细胞苏木素-伊红(HE)染色,观察细胞形态.结果:齐多夫定浓度为3.3 mmol/L、四氯化碳浓度为2 mmol/L时,于6、12、24 h的吸光度(OD)值分别为(1.20±0.17)、(0.99±0.08)和(0.89±0.09)与(1.20±0.13)、(1.01±0.09)和(0.88±0.13),同时间点阴性对照组OD值分别为(1.34±0.08)、(1.11±0.10)和(1.03±0.11).与阴性对照组比较,齐多夫定组、四氯化碳组的细胞活力均显著降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05),但10 mmol/L 齐多夫定对细胞活性的影响远低于10 mmol/L 四氯化碳.加3.3 mmol/L齐多夫定后6和12 h,AST释放量为(18.53±2.02) 卡门单位和(26.86±2.61) 卡门单位,ALT的释放量为(15.16±2.18)卡门单位和(27.48±2.27)卡门单位,LDH释放量为(1 681.00±193.98) U/L和(2 708.55±78.73)U/L;阴性对照组同时间点AST释放量为(15.91±1.62)卡门单位和(37.71±2.54) 卡门单位,ALT释放量为(19.66±0.74)卡门单位和(23.42±1.46)卡门单位,LDH释放量为(2 036.39±134.56) U/L和(2 870.21±87.73) U/L;与阴性对照组比较,齐多夫定对AST、ALT及LDH的释放量均有显著影响,差异均有统计学意义(均P＜0.05).齐多夫定浓度≥3.3 mmol/L时,可引起细胞膜破裂、核浓缩,四氯化碳浓度为10 mmol/L时,可使细胞变小、细胞膜破裂及核碎裂.结论:齐多夫定浓度≥3.3 mmol/L时,具有肝细胞毒性作用,齐多夫定的细胞毒性低于四氯化碳.     

苏云金杆菌内外毒素混合杀虫剂的毒理学研究

对苏云金杆菌内外毒素混合杀虫剂的毒性进行了较系统的研究。结果表明：该杀虫剂的经口、经皮急性毒性低，其ＬＤ（５０）均大于５０００ｍｇ／ｋｇ，无明显皮肤致敏、致突变、致畸、蓄积性和生殖毒性。有轻度的皮肤刺激作用，剂量达到１０ｍｇ／ｋｇ时呈现出免疫毒性作用。建议在农药的毒理学安全性评价程序中，增设免疫毒性的评价方法。