新型重组人肿瘤坏死因子药代动力学的实验方法

目的 为探讨新型重组人肿瘤坏死因子（nrTNF α）药代动力学而建立生物样品中nrhTNFα的检测方法。方法 （1）方法Ⅰ（RA）：动物肌注^125 Ⅰ标记的nrhTNFα后，测定各生物样品中的总放射活性；（2）方法Ⅱ（HPLC－RA）；上述生物样品无经HPLC分离后，收集并测定其中^125Ⅰ－nrhTNFα部分的放射活性；（3）方法 ⅢELISA法。结果 RA，HPLC－RA法检测的nrhTNFα质量浓度与放射性呈直线相关（RA，r=0.999HPLC－RA,r=0.999)。ELISA法证明nrhTNFα的酶联免疫检测药盒适用于nrhTNFα的检测，nrhTNFα的标准曲线与nrhTNFα的标准曲线显正相关，r=0.994,这一检测系统与其他细胞因子包括IFNα，TNFβ，IL－2和IL－6无交叉反应。结论 RA，HPLC－RA和ELISA法均可作为nrhTNFα的药代动力学实验方法。     

恒河猴肌注新型重组人肿瘤坏死因子的药代动力学

目的　研究新型重组人肿瘤坏死因子 (nrh TNFα)在恒河猴体内的药代动力学行为 .方法　采用 EL ISA法测定恒河猴 im nrh TNFα后的血药浓度 .结果　恒河猴按 40 μg·kg- 1 剂量 im nrh TNFα后 ,血液中的平均达峰时间为 1.7h;峰浓度的个体差异较大 ,范围为 5 75～ 112 0 ng· L- 1 ,平均峰浓度为 833ng· L- 1 ;药物在血液中的消除符合一房室模型 ,半衰期 T1 / 2 为 1.4～ 2 .4(平均 1.9) h.结论　 nrh TNFα im后 ,能被恒河猴吸入血 ,在血液中的消除符合一房室模型 ,在灵长类动物恒河猴的药代动力学行为与啮齿类动物小鼠的相类似 ,但吸收入血和消除均较小鼠的慢     

常压色谱分离纯化重组人白细胞介素2

作采用７ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍直接裂解重组人白细胞介素２（ｒｈＩＬ－２）工程菌，溶解包含体蛋白，利用硫水色谱、凝胶过滤、离子交换分离纯化ｒｈＩＬ－２，各步收率分别为１４０％，８５％，７０％。终产品比活性为１．９×１０＾６Ｕ／ｍｇ，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定为单一条带，得到高比活高纯度的ｒｈＩＬ－２。本方法利用疏水色谱既能分离又能促进ｒｈＩＬ－２复性的特点，克服了包含体蛋白较难溶解双易聚合的缺点，提出了ｒｈ     

胰性腹水与胸腔积液

胰性腹水综合征常有长期饮酒史或急慢性胰腺炎的发作史,为无痛性腹水,且量大对利尿剂无反应,必须经特殊处理才能消退。胰性腹水患者往往体重减轻甚至明显消瘦,以及出现Cameron三联征。本征见于成人,主要是慢性酒精性胰腺炎,在儿童则是创伤性胰腺炎。过去曾误认为胰性腹水形成的原因是由于腹内或腹膜后淋巴管阻塞或胰酶所致的亚急性腹膜炎。现已明确,胰性腹水是由于胰腺管的破裂。胰液漏入小网膜囊或游离腹腔。胰管的破裂可能是继发于急性炎症或者由创伤所致。如胰液进入小网膜囊,可能在胃后壁与横结肠系膜之间形成假性囊肿。在慢性胰腺炎时,由于瘘不能被包裹或者有假性囊肿持续漏出胰液所致。如这个通道位于胰腺的前     

一种新的恒河猴T淋巴细胞活化抗原PTA1

实验动物、动物实验与医学研究和发展汤钊猷（上海医科大学附属中山医院，上海２０００３２）我是外科医生。由于参与和承担一些科研任务，在我大学毕业不久即与“实验动物和动物实验”打交道，至今整整４０年了。现在指导研究生，仍然离不开实验动物和动物实验。通过动...     

透明质酸钠滴眼液对角膜及隐形眼镜的保护和润滑作用

观察透明质酸钠滴眼液对角膜及隐形眼镜的保护和润滑作用。方法；选用正常新鲜人脐带为原料，经蛋白水解酶酶解消化，氯代十六烷基吡啶和乙醇逐级沉淀，获得透明质酸粗品，精制成钠盐成品，理化分析及质量标准控制达到眼科外用要求，按照眼药配制标准，制成滴眼液。     

胰蛋白酶抑制剂亲和层析柱的制备及猪胰脏中胰蛋白酶抑制剂的？…

本文结合胰脏多酶联产物实验对胰蛋白酶抑制剂进行了探讨。制备了Ｔｒｙｐｓｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱，采用硫酸铵，三氯醋酸沉淀，离心，色谱，冷冻干燥等技术，为猪胰脏中胰蛋白酶抑制剂进行分离纯化，测定各步中的活性，对有活性的终产品进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定分析。亲和柱偶联率为９５．７６％，亲和率为９．５６ｍｇ蛋白／ｍｌ胶。从０．７Ｓ（ＮＨ４）ＳＯ４沉淀溶解液中亲和吸附胰蛋白酶后液体中与从０．９     

猪血小板衍生生长因子的提取和纯化

目的 :建立简单、有效的猪血小板衍生生长因子 (p PDGF)纯化方法。方法 :采用超声裂解、酸醇抽提、离子交换色谱、凝胶色谱等方法提纯 p PDGF,用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其相对分子质量 ,并检测其生物学活性。结果 :纯化的 p PDGF相对分子质量为 (2 .879～ 3.0 78)× 10 4,纯化倍数为 75 82倍 ,活性回收率为 3% ,比活性为 3.41176× 10 5 U/ mg。 结论 :提取和纯化 p PDGF的方法简单 ,且达到较好的结果 ,为进一步研究 PDGF的理化性质及生物学特性打下基础。     

新型基因工程人肿瘤坏死因子-α的临床前研究

目的 研究一种新型基因工程人肿瘤坏死因子－α(nrhTNF-α)的临床前药理、毒理和药代动力学特性。方法 观察nrhTNF-α对动物移植性肿瘤的抑制作用、毒副作用（如急性中毒反应和死亡情况，过敏反应，以及对神经系统、呼吸系统、心血管系统、造血系统和免疫系统的影响）及药代动力学变化。结果 nrhTNF-α具有明显的抑瘤作用且呈剂量依赖性。对动物的急性中毒表现及病理变化与rhTNF-α相似，未见其他不良反应。结论 nrhTNF-α的抑瘤作用明显，毒副反应低，具有良好的临床应用前景。     

应用基因工程方法制备新型重组人肿瘤坏死因子-α

目的　应用基因工程技术 ,制备一种新型的重组人肿瘤坏死因子 α (novelrecombinanthumantumornecrosisfactor α ,nrhTNF α) ,并对其生物学活性、理化性质进行鉴定 ,为进入临床前研究提供基础。方法　应用PCR技术 ,将hTNF α基因的 5′端 17个氨基酸的编码序列删除 ,基因中Pro8Ser9Asp10 的编码序列用Arg Lys Arg的编码序列取代 ,同时Leu157的密码子被Phe的密码子所取代。将hTNF α突变基因 ,插入原核高效表达载体pBV2 2 0中 ,构建高表达工程菌株。纯化表达产物 ,对连续 3批制备的新型rhTNF α,按人用《重组DNA制品质量控制要点》检定要求进行鉴定。结果DNA序列分析和蛋白质N末端、C末端部分氨基酸序列分析表明 ,nrhTNF α与天然的hTNF α相比较 ,N末端缺失了 7个氨基酸 ,13位氨基酸为Arg Lys Arg ,其后为天然hTNF α 11位以后的氨基酸。 15 7位Leu的密码子被Phe的密码子所取代。产物表达量占菌体蛋白的 6 7.4 %。经 (NH4) 2 SO4沉淀、Q SepharoseF .F .及S SepharoseF .F .柱层析分离纯化后 ,产品的纯度达 99% ,比活性达 1× 10 9IU/mg蛋白。结论成功地制备了nrhTNF ,对连续 3批制备的nrhTNF α按人用《重组DNA制品质量控制要点》检定要求进行鉴定 ,所有项目均合格