Pim1在体外培养大脑皮层神经元氧糖剥夺/复氧损伤中的表达及作用

目的 探讨原代培养大脑皮层神经元缺氧缺血损伤后Pim1的表达及其对细胞凋亡的作用。方法 取新生1日龄C57BL/6小鼠的大脑皮层神经元进行原代培养，培养第8天更换无糖无血清DMEM培养基，于1% O₂条件下培养3 h后，换为正常条件下培养，即氧糖剥夺/复氧（OGD/R）处理，以模拟体内神经元缺氧缺血状态。分别于OGD/R后0、6、12、24 h收集细胞，同时设立神经元正常培养组。原代培养神经元中分别转染Pim1过表达质粒或空质粒，然后分别进行正常培养或OGD/R处理，分别命名为Pim1组、对照组、OGD/R组和OGD/R+Pim1组；采用Real-time PCR检测Pim1 mRNA的表达，采用Western blot检测Pim1蛋白和凋亡相关蛋白活化的半胱氨酸蛋白酶（CC3）的表达。采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果 Real-time PCR和Western blot结果显示，与正常组相比，OGD/R后神经元中Pim1 mRNA及其蛋白表达均显著降低，且均从OGD/R后0 h开始下降，12 h最低，24 h回升但仍维持在较低水平（P < 0.05）。Pim1过表达转染使神经元中Pim1蛋白水平增加。Pim1+OGD/R组CC3表达水平明显低于OGD/R组，Pim1+OGD/R组细胞凋亡率也较OGD/R组显著减少（P < 0.01）。结论 缺氧缺血损伤引起体外培养神经元中Pim1表达下降。过表达的Pim1可以抑制OGD/R诱导的神经元凋亡。     

振幅整合脑电图与新生儿脑功能监测

振幅整合脑电图(aEEG)是一项用于连续监测新生儿脑功能的方法,它操作方便,利用较少的电极收集EEG信息,图形直观,易于分析,广泛应用于新生儿脑发育成熟度评价、新生儿脑病、新生儿惊厥或癫痫等新生儿脑功能的监测。     

新生儿高胆汁酸血症的高危因素分析

目的探讨新生儿高胆汁酸血症的高危因素,以指导临床的预后判断及治疗。方法选择该院864例新生儿(其中高胆汁酸血症患儿120例)及其母孕期的病历资料,并对新生儿高胆汁酸血症的影响因素进行统计,采用R语言统计学方法进行分析,分析高危因素且计算回归方程。结果孕妇妊高征、高胆汁酸血症为患儿高胆汁酸血症的高危因素并呈正相关关系(P0.05);出生体质量与患儿高胆汁酸血症呈负相关关系(P0.05)。结论孕期妊高征、高胆汁酸血症均可导致新生儿高胆汁酸血症,且在一定程度上反映胎盘功能,可对患儿的预后判断具有临床指导意义。     

Ⅲ级新生儿病房643例早产儿临床流行病学现状分析

目的 探讨近年来Ⅲ级新生儿病房早产儿临床流行病学特点.方法 对我科2005年2月至2006年2月住院的643例早产儿的临床资料进行回顾性分析.结果 住院新生儿中早产儿占33.6%.早产多数有明确的原因,以胎膜早破、妊高症、多胎妊娠为主要原因.402例(62.5%)早产儿存在一种或多种并发症,主要为早产儿脑损伤、脓毒症、湿肺、肺炎、呼吸窘迫综合征、呼吸暂停、高胆红素血症.死亡的主要原因是呼吸窘迫综合征、脓毒症、肺出血、新生儿持续肺动脉高压.胎龄愈小、出生体重愈低,病死率愈高(P<0.05).结论 Ⅲ级新生儿病房早产儿发生的常见原因以及影响早产儿转归的因素明确,应加强围生期保健和监护,降低早产儿出生率,防止院内感染,降低早产儿病死率,改善预后.     

限制性输血与非限制性输血对贫血极低出生体重早产儿病情预后的影响

目的观察限制性输血与非限制性输血对贫血极低出生体重早产儿病情预后的影响，为早产儿贫血合理输血提供一定的临床依据。方法，对86例贫血的极低出生体重早产儿诊治的临床资料进行回顾性分析，按其首次输血前的具体病情及输血的红细胞压积（Hot）数值分为限制性输血组（44例）和非限制性输血组（42例）。记录患儿输血情况：每次输血前血Hot、每次输血量、总的输血量、输血次数。比较两组患儿治疗恢复及并发症发生情况。结果限制性输血组每人总输血量明显高于非限制性输血组（t=19．82，P〈0．01），每人输血次数明显多于非限制性输血组（t=3．52，P〈0．01）；限制性输血组患儿在吸氧时间、无创持续气道正压通气（NCPAP）时间上明显高于非限制性输血组（t=5．53，2．95，P〈0．01），机械通气使用时间长于非限制性输血组（t=2．42，P〈0．05）；限制性输血组颅内出血例数、院内感染发生例数高于非限制性输血组（χ2=4．36，4．95，P〈0．05）。结论采用非限制性输血策略能及时纠正贫血，既能缩短患儿呼吸机辅助通气时间及吸氧时间，又可降低院内感染及颅内出血等并发症，有利于病情好转与康复。输血时要权衡利弊，结合患儿病情进行科学合理用血。     

高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞生长状况的影响

目的 探讨高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AECⅡ)的活力、生长情况、增殖和凋亡的影响. 方法 取孕19d的胎鼠肺组织,利用差速贴壁法进行AECⅡ的原代培养及纯化,将AECⅡ随机分为高氧组及空气组.空气组细胞置于5％CO2孵育箱中培养,高氧组细胞置于5％CO2 ±95％O2的混合气体孵育箱中培养.在培养的2、4、6、8d分别观察细胞的生长情况,检测细胞活力、细胞周期、细胞凋亡情况.时间点与培养组间的交互作用采用析因设计的方差分析.2组资料比较采用独立样本t检验,多组资料比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用Bonferroni方法. 结果 (1)细胞生长状况:高氧组培养2、4、6和8d时细胞数随培养时间延长逐渐减少,分别为(7.29±0.43)×105/ml、(2.68±0.37)×105/ml、(0.23±0.10)×105/ml和(0.00±0.00)×105/ml,低于相应时间点空气组[分别为(10.41±0.24)×l05/ml、(27.90±1.91)×105/ml、(27.12±0.85)×105/ml和(26.29±1.59)×105/ml],差异均有统计学意义(t分别为10.992、38.912、94.166和49.696,P均=0.000).(2)细胞活力:高氧组在2、4、6d时细胞活力逐渐下降,活细胞率分别为(79.00±0.71)％、(52.80±1.14)％和(31.60±1.52)％,均低于相应时间点空气组,分别为(97.00±0.71)％、(97.20±0.84)％和(95.00±0.71)％,差异均有统计学意义(t分别为31.213、70.519和84.722,P均=0.000).(3)细胞周期变化:高氧组G1期和S期细胞百分率在4和6d时与2d时比较均有升高,且高于空气组,差异均有统计学意义(P＜0.05).(4)细胞凋亡变化:高氧组Annexin-V+/PI亚群在4d时所占比例最高,为(23.89±0.52)％,高于2d和6d时[(21.32±0.43)％和(1.47±0.61)％];Annexin-V+/PI+亚群细胞所占比例6d时最高,为(53.92±1.64)％,其次是4d时[(45.03±1.01)％],最低是2d时[(12.17±0.60)％];高氧组各时间点Annexin-V+/PI-和Annexin-V+/PI+亚群所占比例与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 高氧对AECⅡ的生长、活力、增殖能力、细胞周期具有明显的抑制作用,对细胞凋亡有促进作用.     

振幅整合脑电图在新生儿缺氧缺血性脑病中的诊断价值

目的 观察缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)新生儿振幅整合脑电图(amplitude integrated electroencephalography,aEEG)的变化,分别研究aEEG分类与HIE临床分度、HIE头颅CT分度的关系,探讨aEEG在HIE诊断中的价值。方法 选择48例有窒息史的HIE新生儿为研究对象。根据临床分度分成轻、中、重度HIE组,分别为20例、16例、12例;根据头颅CT分度分成轻、中、重度HIE组,分别为18、18、12例。按aEEG分类标准将研究对象分为正常、轻度异常和重度异常3种。观察48例HIE新生儿aEEG的特点。结果 临床轻、中、重度HIE患儿aEEG异常率分别为13.3%、86.7%、100%,aEEG异常程度与HIE临床分度密切相关(r=0.853,P＜0.000 5);头颅CT轻、中、重度HIE患儿aEEG异常率分别为10.5%、82.4%、100.0%,aEEG异常程度与HIE头颅CT分度密切相关(r=0.825,P＜0.000 5)。结论 aEEG异常程度与HIE临床分度、HIE头颅CT分度均密切正相关,在早期诊断HIE、判断HIE病情程度及预测预后方面有很大的应用价值。