棕背鼠平性别的快速鉴定

目的 野生棕背鼠平因其活动敏捷?性情凶猛?不易抓取,很难从外表对其性别做出准确判断,影响分笼及后期的实验室繁育,拟建立一种快速?准确?简便的性别鉴定方法?方法 以棕背鼠平的新鲜被毛为材料,Chelex?100 提取毛囊DNA,利用PCR 技术分别扩增锌指结构基因(ZFY/ZFY)片段和Y 染色体性别决定区基因(SRY)片段,并建立双重PCR 扩增方法?结果 雄性棕背鼠平扩增出ZFY/ZFY和SRY 两个基因片段,而雌性棕背鼠平只扩增出ZFY/ZFY基因片段?利用这种方法对23 只棕背鼠平?10 只Wistar 大鼠和8 只BALB/ c 小鼠进行性别鉴定,扩增结果与表型判断和解剖结果一致?结论 以被毛为实验材料,减少了对棕背鼠平的惊吓和损伤;建立的双重PCR 扩增方法准确?快速,可应用于鼠的性别鉴定?     

棕背性别的快速鉴定

目的野生棕背因其活动敏捷、性情凶猛、不易抓取,很难从外表对其性别做出准确判断,影响分笼及后期的实验室繁育,拟建立一种快速、准确、简便的性别鉴定方法。方法以棕背的新鲜被毛为材料,Chelex-100提取毛囊DNA,利用PCR技术分别扩增锌指结构基因(ZFY/ZFX)片段和Y染色体性别决定区基因(SRY)片段,并建立双重PCR扩增方法。结果雄性棕背扩增出ZFY/ZFX和SRY两个基因片段,而雌性棕背只扩增出ZFY/ZFX基因片段。利用这种方法对23只棕背、10只Wistar大鼠和8只BALB/c小鼠进行性别鉴定,扩增结果与表型判断和解剖结果一致。结论以被毛为实验材料,减少了对棕背的惊吓和损伤;建立的双重PCR扩增方法准确、快速,可应用于鼠的性别鉴定。     

棕背(鼠平)的实验室繁育

目的 建立棕背（鼠平）的实验室繁育方法,测定棕背（鼠平）生长和繁殖数据,为开展棕背（鼠平）实验动物化研究提供基础。方法 将黑龙江省牡丹江市牡丹峰林地的野生棕背（鼠平）引入实验室,于大型硬壁式啮齿动物负压隔离器内进行人工饲育、繁殖,测定棕背（鼠平）生长和繁育数据,评价棕背（鼠平）实验室繁育效果。结果 棕背（鼠平）在实验室条件下可以实现人工饲育、繁殖。妊娠率54.55%,平均妊娠期为20.4 d（18~22 d）;一个繁殖期内平均繁殖2.9次,最高繁殖次数为7次,远远超过自然条件下所统计到的繁殖次数（1~4次）;平均窝产仔数（4.3±1.22）只,单窝最高产仔数为8只;幼仔离乳率94.8%,生长发育状况良好。结论 实现了棕背（鼠平）的实验室繁育,测定了棕背（鼠平）在实验室条件下的生长和繁育数据,为棕背（鼠平）实验动物化打下了基础。     

结核分枝杆菌糖代谢的研究进展

人们普遍认为结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)优先依靠脂质代谢来建立和维持慢性感染,但是MTB的代谢网络可以对多种碳底物同时进行分解代谢,代谢的多功能性已经日益被认为是一种重要的致病机制。糖代谢在MTB的发病机制中占据重要地位,完整的糖代谢对于维持MTB稳态起着重要作用。作者以MTB糖代谢为线索,就MTB对糖类的转运、生成及分解代谢过程中的功能酶进行梳理和分析,并且探讨了糖代谢协助MTB维持稳态的机制,以期望为新型抗结核药品的研发提供科学依据。     

抗原85复合物的致病机制及其在结核病疫苗研制中的应用进展

结核分枝杆菌(MTB)的传播亟需开发有效的疫苗来控制。目前已鉴定出多种MTB免疫原性分子,其中,抗原85(Ag85)复合物(Ag85A、Ag85B和Ag85C)是重要的毒力因子,介导MTB的黏附和侵袭及其细胞壁的合成。Ag85抗原已被用作多种新型疫苗的构建中,如重组减毒疫苗、蛋白佐剂疫苗和病毒载体疫苗。作者综述了Ag85复合物的致病机制及其在结核病疫苗研制中的应用进展,探讨了Ag85复合物作为抗原在不同类型疫苗研制中的作用。     

水貂阿留申病毒、肠炎病毒与犬瘟热病毒多重PCR检测方法的建立与应用

目的水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病,拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法。方法针对三种病毒基因保守区分别设计了3对特异性引物,对貂阿留申病毒(ADV)和水貂肠炎病毒(MEV)的DNA模板和犬瘟热病毒(CDV)的RNA模板进行了多重PCR扩增和扩增条件优化。结果 PCR可同时扩增出601 bp(ADV)、205 bp(MEV)和451 bp(CDV)的特异性目的条带,敏感性试验表明最低核酸检出量为ADV每微升2.67×10~4拷贝、MEV每微升3.02×10~4拷贝和CDV每微升1.72×10~5拷贝。临床样品检测结果表明多重PCR和单一PCR检测结果一致。结论建立的多重PCR检测方法可快速地检测ADV、MEV和CDV单一或混合感染的临床样品。     

牛分枝杆菌脂多糖在动物结核病血清学诊断中的应用价值

目的:评价牛分枝杆菌脂多糖在动物结核病血清学诊断中的临床应用价值。方法:从灭活的牛分枝杆菌中提取具有生物活性的脂多糖，用提取的脂多糖进行酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA),检测阴性牛血清和结核病、副结核病、布鲁氏菌病、口蹄疫、衣原体病和新孢子虫病阳性牛血清，判断脂多糖用于动物结核病诊断的特异性。同时，收集牛血清样本245份[结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test, TST)阳性177份，TST阴性68份],梅花鹿血清样本29份(TST阳性10份，TST阴性19份),獐子血清样本14份(TST阳性14份),通过ELISA方法检测血清中的抗体水平，以TST结果为参照，评估脂多糖在动物结核病血清学诊断中的临床应用价值。结果:除结核病阳性牛血清外，其余阳性病牛血清的检测结果与阴性牛血清差异无统计学意义(P>0.05),且均低于Cut off值。基于脂多糖建立的ELISA抗体检测方法与TST结果的总符合率为88.54%(255/288),总敏感度为87.56%(176/201),总特异度为90.80%(7...