SCN2A基因突变导致大田原综合征2例报告及文献复习

目的分析由SCN2A基因突变导致的大田原综合征(SCN2A-OS)表型特点及苯妥英钠的临床应用。方法回顾分析2017年10月诊治的2例SCN2A-OS患儿的表型特点,临床诊疗经过及预后,并复习相关文献。结果 2例患儿均为男性,分别于生后1天及2个月余起病,均表现为痉挛、强直发作,发育迟缓。脑电图示暴发抑制。多种抗癫痫药物治疗效果不佳。苯妥英钠治疗有效,近期随访未见明显不良反应。例1检测出SCN2A基因c.2995GA(NM_021007)新发错义突变;例2检测出c.4015AG新发错义突变。目前国内外共报道SCN2A-OS患儿25例,癫痫起病年龄波动在生后1天至60天(中位年龄1天),首次发作形式以强直发作最为常见;脑电图为典型暴发抑制,52%后期转变为高度失律;治疗随访中共11例患儿抽搐控制,9例使用苯妥英钠有效。结论 SCN2A-OS起病年龄早,预后差,多种抗癫痫药物治疗效果不佳,经典抗癫痫药物苯妥英钠可有效控制SCN2A-OS的癫痫发作。     

[Gly14]-humanin对人脐静脉内皮细胞胆固醇外排的促进作用研究

目的探讨[Gly14]-humanin（HNG）对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的内皮细胞胆固醇外排的作用,进而阐明在人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中HNG对腺苷三磷酸结合盒转运体A-1（ABCA-1）和腺苷三磷酸结合盒转运体G-1（ABCG-1）蛋白表达的影响。方法以HUVECs为研究动脉粥样硬化的工具细胞。将对数生长期的HUVECs细胞接种于6孔板中并随机分组,其中采用ox-LDL处理的5组：0滋g/mlox-LDL组、30滋g/mlox-LDL组、60滋g/mlox-LDL组、90滋g/mlox-LDL组、120滋g/mlox-LDL组;采用HNG处理的5组：0nMHNG组、50nMHNG组、100nMHNG组、1滋MHNG组、10滋MHNG组;联合用药处理的5组：空白组、ox-LDL组、ox-LDL+100nMHNG组、ox-LDL+1滋MHNG组、ox-LDL+10滋MHNG组,分别使用不同浓度的HNG预处理HUVECs细胞1h,随之加入60滋g/mlox-LDL;经培养及不同药物作用12h后收集细胞样品。另设HNG作用不同时间5组：0hHNG组、3hHNG组、6hHNG组、12hHNG组、24hHNG组,将1滋M的HNG按上述时间处理细胞后再收集细胞样品。采用Westernblot法检测各组ABCA-1、ABCG-1蛋白的表达水平。结果与0滋g/mlox-LDL组相比,60、90、120滋g/mlox-LDL组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高（均P＜0.05）。与0nMHNG组相比,1、10滋MHNG组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高（均P＜0.05）。与0hHNG组相比,12、24hHNG组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高（均P＜0.05）。与空白组比较,ox-LDL组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高（均P＜0.05）;而与ox-LDL组相比,ox-LDL+1滋MHNG组、ox-LDL+10滋MHNG组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高（均P＜0.05）。结论HNG通过上调ABCA-1和ABCG-1的蛋白表达而促进胆固醇的外排,可减少内皮细胞脂质的蓄积。     

癫痫鼠外周血磷酸化S6蛋白检测及意义

目的: 明确癫痫发作后外周血与脑组织中核糖体磷酸化S6蛋白（P-S6）含量变化的相关性。方法: 取出生后5~6周龄的C57BL/6小鼠30只和SD大鼠22只,采用红藻氨酸腹腔注射诱导癫痫发作。建立P-S6蛋白的流式细胞术检测方法用以检测小鼠及大鼠外周血中mTOR信号通路下游P-S6蛋白的变化,同时采用蛋白质印迹法检测其脑组织中P-S6的变化。采用Pearson相关性分析法分析脑组织与外周血中P-S6蛋白表达的相关性,并对大鼠外周血P-S6蛋白的表达与癫痫发作等级进行相关性分析。结果: 癫痫小鼠外周血和脑组织中P-S6的含量明显增高,其表达量分别升高至对照组的（1.49±0.45）倍（P < 0.05）和（2.55±0.66）倍（P < 0.01）;外周血中P-S6的阳性表达率和平均荧光强度均明显升高（均P < 0.01）,与脑组织中P-S6蛋白表达具有一致性（r=0.8474,P < 0.01）。大鼠自身致痫前后外周血中P-S6含量明显增加,由14.89±9.75增加至52.35±21.72（P < 0.01）,与大鼠脑组织P-S6蛋白表达变化一致（r=0.9385,P < 0.01）,且外周血P-S6含量的变化与癫痫发作等级呈正相关。结论: 癫痫鼠外周血mTOR信号通路的变化与脑组织中的变化具有良好的相关性,提示通过检测外周血P-S6的表达水平可准确反映脑组织中mTOR信号通路的变化。     

和厚朴酚对癫痫小鼠学习记忆能力的改善作用

目的: 探索和厚朴酚对癫痫小鼠学习记忆能力的改善作用并探讨其机制。方法: 5周龄雄性ICR小鼠采用腹腔注射红藻氨酸（38 mg/kg）的方式建立癫痫模型。治疗组小鼠腹腔注射和厚朴酚（3、10、30 mg/kg）10 d。Fluoro-Jade B染色法检测神经元活性;Morris水迷宫和Y迷宫实验观察小鼠学习记忆能力;蛋白质印迹法检测乙酰化超氧化物歧化酶（SOD）、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）和P62蛋白表达水平;硫代巴比妥酸法和WST-1法分别测定丙二醛和SOD等氧化应激产物的含量。结果: 与对照组比较,模型组神经元凋亡数量增加,学习记忆能力下降,乙酰化SOD和丙二醛表达量增加,SOD活性下降,LC3-Ⅱ和P62蛋白表达量增加（P < 0.05或P < 0.01）;与模型组比较,和厚朴酚10 mg/kg和30 mg/kg均可减少神经元凋亡数量,改善学习记忆能力,并可逆转癫痫发作所致的丙二醛和SOD乙酰化水平,降低LC3-Ⅱ和P62的表达量（P < 0.05或P < 0.01）,且药物剂量为30 mg/kg时效果更加显著。结论: 和厚朴酚可缓解癫痫发作导致的氧化应激和自噬降解障碍,减少神经元凋亡,从而改善癫痫小鼠的学习记忆能力。