体外培养的肝癌细胞株与正常肝细胞株蛋白质的差异表达

目的:运用SELDI蛋白质芯片技术分析体外培养的肝癌细胞株(HepG2)与正常肝细胞株(L02)蛋白质表达差异．方法:在体外培养HepG2和L02细胞株,收获细胞,将细胞用细胞裂解液裂解后,采用SELDI蛋白质芯片技术用IMAC3 及WCX2芯片检测HepG2、L02的蛋白质谱．结果:体外培养的肝癌细胞株与正常肝细胞株的蛋白质存在差异表达,IMAC3芯片共捕获61个蛋白,发现差异峰7个,与 L02细胞相比,其中3个差异蛋白在肝癌细胞中高表达,4个差异蛋白在肝癌细胞中低表达．WCX2芯片共捕获91个蛋白, 发现差异峰14个,其中3个差异蛋白在肝癌细胞中高表达,11 个差异蛋白在肝癌细胞中低表达．结论:SELDI蛋白芯片技术检测肝癌细胞株与正常肝细胞株蛋白质的差异表达方法简便,敏感性高,重复性好．     

注意缺陷多动障碍儿童体内铅、锌、铁含量的检测分析

目的 探讨儿童注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)和血铅(Pb)、锌(Zn)、铁(Fe)水平的关系。方法 选择70例ADHD患儿和60例正常对照儿童,采用原子吸收光谱法测定血铅、锌、铁含量。 结果 ADHD组儿童锌(74.39±10.71)μmol/L,铁(8.52±0.58)mmol/L,明显低于健康对照组儿童(80.60±9.07)μmol/L,(8.76±0.51)mmol/L,差异有统计学意义(t=3.538,2.536,P<0.01或<0.05)。ADHD组儿童血铅(57.3±20.9)μg/L,明显高于健康对照组儿童(45.9±17.4)μg/L,差异有统计学意义(t=3.357,P<0.01)。 结论 部分ADHD患儿存在高血铅、锌、铁缺乏,在诊治时应常规检测并及早纠正。     

运用SELDI蛋白质芯片技术检测Vero细胞感染HSV-1后蛋白质的差异表达

目的 运用SELDI（Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization）蛋白质芯片技术检测Vero细胞感染HSV-1后蛋白质的差异表达,从而为从蛋白质水平研究HSV-1感染的致病机制奠定基础.方法 常规培养Vero细胞,感染HSV-1,孵育12 h、24 h、48 h后用细胞裂解液裂解细胞.裂解上清经蛋白定量后应用IMAC3（固定金属亲和）和WCX2（弱阳离子交换）芯片,SELDI-TOF-MS技术检测细胞感染HSV-1前后蛋白质表达的差异.结果 感染24 h细胞出现明显细胞病变效应（CPE）,感染12 h质谱分析即可见蛋白的差异表达.共19个蛋白表达水平发生变化,其中IMAC3芯片发现差异峰9个, WCX2芯片发现差异峰10个.结论 SELDI蛋白质芯片技术检测Vero细胞感染HSV-1后蛋白质的差异表达方法简便,敏感性高,从而为从蛋白质水平研究HSV-1感染的致病机制,HSV-1与宿主细胞的相互作用,及抗感染治疗靶位的寻找奠定了一定的基础.     

抽动症患儿体内铅含量对T细胞活性的影响

目的 研究抽动症患儿体内血铅含量对T淋巴细胞亚群活性的影响.方法 选择44例抽动症患儿、30例健康儿童采用原子吸收光谱法测定血铅含量,同时采用间接免疫荧光染色法测定该组患儿外周血T淋巴细胞亚群各类细胞的免疫活性.结果 抽动症患儿外周血CD3 、CD4 、CD4 /CD8 [(57.65±7.16)%,(34.56±3.07)%,(1.0246.±0.1265)]较正常对照组[(62.59±4.11)%,(36.12±2.16)%,(1.4324±0.1460)]显著降低,而CD8 [(32.16±3.96)%]较对照组[(27.11±2.13)%]显著升高(P＜0.005).44例抽动症患儿血铅测定结果为112.58±49.07 μg/L,其中有32例超过100 μg/L,铅中毒率为72.73%,对照组血铅测定结果为50.78±24.57 μg/L,有1例超过100 μg/L,铅中毒率为3.3%.结论 抽动症患儿体内血铅含量明显增高,T淋巴细胞亚群平衡失调,免疫活性降低,且患儿体内血铅含量与淋巴细胞免疫活性有明显相关性.     

不孕不育夫妇CT、UU检测结果分析及临床意义

目的了解解脲支原体（UU）和沙眼衣原体（CT）感染与不孕不育的关系,同时了解不孕不育夫妇之间的交叉感染情况,为生殖医学提供相关的医学依据,以便采取相应的治疗和有效预防措施,提高受孕率。方法用荧光定量PCR方法检测200对夫妇（不孕不育组100对,正常对照组100对）女性宫颈分泌物、男性精液标本中的解脲支原体一DNA和沙眼衣原体一DNA含量,并对相关实验数据进行医学统计学处理。结果不孕不育组女性解脲支原体-DNA阳性率46%,沙眼衣原体-DNA阳性率25%,解脲支原体或沙眼衣原体的总感染率为55%,男性解脲支原体-DNA阳性率21%,沙眼衣原体-DNA阳性率20%,解脲支原体或沙眼衣原体的总感染率为36%,一对夫妇同时感染同一种病原体者32%;正常对照组女性则分别为15%、9%、20%,男性分别为12%、6%、15%,一对夫妇同时感染同一种病原体者11%,两组间有显著性差异。结论解脲支原体和沙眼衣原体是引起男女不孕不育的重要病原体之一,应引起生殖医学工作者的足够重视,同时积极加强不孕不育夫妇之间交叉感染的预防,也是提高不孕不育夫妇受孕率的方法之一。     

应用SELDI-TOF-MS技术筛选肝癌血清蛋白标记物

目的 运用表面增强激光解吸附/离子化时间飞行质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测肝癌患者血清蛋白质的特异性生物标志,建立筛选血清蛋白质图谱模型并初步验证.方法 选择肝癌患者30例,HBV阳性携带者20例及正常人20例,应用SELDI-TOF-MS技术及相应的计算机软件进行比较分析,检测肝癌血清蛋白质的特异性生物标志,建立肝癌的筛选模型,并对其进行了双盲法验证.结果 肝癌组与对照组共有25个蛋白质差异有显著性,以其中5个蛋白标志物(6 888、13 764、6 487、3 450和6 814 Da)建立的筛选模型检测灵敏度为96.7％( 29/30),特异性为90.0％(36/40),盲法验证,灵敏度为95.5％(21/22),特异性为90％(27/30).结论 SELDI-TOF-MS技术具有高灵敏度和特异性,在肝癌的诊断及肿瘤特异性生物标志的筛选等方面具有一定价值.     

巨细胞病毒感染新生儿T细胞亚群的变化

目的探讨巨细胞病毒感染新生儿T细胞亚群的变化及意义。方法选择本院儿科巨细胞病毒感染新生儿43例,按有无症状性感染分2组,症状性感染20例,无症状性感染23例,健康查体新生儿16例,分别检测他们的T细胞亚群。结果症状性感染组患儿CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋比无症状性感染组和健康对照组均降低（P〈0．05或P〈0．01）,CD8^＋比其它组升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论症状性感染新生儿细胞免疫异常,对CMV感染新生儿进行T细胞亚群的检测,可作为CMV活动感染的参考,对指导临床诊治具有指导意义。     

SELDI蛋白质芯片技术检测膝骨性关节炎患者黏附关节液中蛋白质的差异改变

目的运用表面增强激光解吸附离子化飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术检测膝骨性关节炎患者关节液中蛋白质的差异改变，寻找骨性关节炎特异的生物标志，以期用于骨性关节炎的早期诊断。方法使用WCX2芯片，SELDI-TOF—MS技术检测20例膝骨性关节炎患者和8例正常对照关节液中蛋白质谱的改变。结果膝骨性关节炎患者与正常人比较，关节液中的蛋白质存在差异表达，共有6个蛋白表达水平发生变化，其中5754Da和15522Da蛋白峰仅在患者中表达，在正常人中不表达，13412．3Da蛋白符合Cys—tatin-c。结论SELDI蛋白芯片技术可以检测关节液标本，检测膝骨性关节炎患者关节液蛋白质的差异表达敏感性高，从而为骨性关节炎的早期诊断提供了一种新的方法。     

运用SELDI蛋白质芯片技术检测Vero细胞感染HSV-1后蛋白质的差异表达

目的运用SELDI(Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization)蛋白质芯片技术检测Vero细胞感染HSV-1后蛋白质的差异表达,从而为从蛋白质水平研究HSV-1感染的致病机制奠定基础。方法常规培养Vero细胞,感染HSV-1,孵育12 h、24 h、48 h后用细胞裂解液裂解细胞。裂解上清经蛋白定量后应用IMAC3(固定金属亲和)和WCX2(弱阳离子交换)芯片,SELDI-TOF-MS技术检测细胞感染HSV-1前后蛋白质表达的差异。结果感染24 h细胞出现明显细胞病变效应(CPE),感染12 h质谱分析即可见蛋白的差异表达。共19个蛋白表达水平发生变化,其中IMAC3芯片发现差异峰9个,WCX2芯片发现差异峰10个。结论 SELDI蛋白质芯片技术检测Vero细胞感染HSV-1后蛋白质的差异表达方法简便,敏感性高,从而为从蛋白质水平研究HSV-1感染的致病机制,HSV-1与宿主细胞的相互作用,及抗感染治疗靶位的寻找奠定了一定的基础。