单缬螺复方对Beagle犬的长期毒性研究

目的 观察Beagle犬连续6个月po单硝酸异山梨酯、缬沙坦、螺内酯复方（ISMN-V-S）降压药物所产生的毒性反应,比较3种药物联合应用后,毒性是否增加或产生新的毒性。方法 健康Beagle犬40只,雌雄各半,分为5组,空白对照组、单缬螺复方15、50、150 mg/(kg?d)及缬沙坦对照组,每组8只动物。给药体积为5 mL/kg,每日ig给药1次,每周给药6 d,连续给药26周,停药观察4周。实验期间,每日进行一般状态观察,每周测定1次体质量及摄食量,并于给药前、给药第13、26周及停药恢复期第4周,分别对眼科、体温、尿常规、心电图、血液学及血液生化学进行检查,在给药期结束前及恢复期结束前测量动物血压,末次给药后及恢复期结束后分两批对动物剖检并进行病理组织学检查。结果 各组动物行为活动、饮食、饮水正常。动物体质量、摄食量组间无差异。试验进行过程中进行的眼科、体温、尿常规、心电图、血液学及血液生化学等指标的检查,未见异常。各给药组动物血压同空白对照组比较明显降低,停药后恢复正常。组织病理学检查,除个别动物肾脏发生自发性病变,其他动物未见明显病理器官改变。结论 本试验条件下,单缬螺复方降压药物除药理作用延伸引起的血压降低外,未出现药物的蓄积现象,同各成分单独使用相比,未见毒性增加或产生新的毒性。     

虹膜定位技术在斜视手术中的应用研究

目的 以虹膜定位技术为客观定量检查方法,结合临床观察斜视患者手术前、后眼球的客观旋转状态,探讨其在手术中的作用和意义,为手术改善和完善、测量标准提供新的依据.方法 收集2009年10月至2011年1月入院的共同性外斜视、上斜肌麻痹的患者各40例,并随机分为显微手术组、非显微手术组,使用WaveScan波前像差仪取坐位行虹膜识别,获得虹膜图像和数据,使用美国威视公司VISX Star S4-IR准分子激光系统行仰卧位定位,记录术前、术后虹膜(眼球)旋转的角度.结果 主斜眼、主视眼手术前、后眼球的旋转度进行配对t检验,主斜眼、主视眼的非显微手术组与显微手术组进行两样本t检验.①共同性外斜视非显微手术组:主视眼手术前、后眼球旋转度分别为(4.88±2.55)°、(4.76±2.62)°,差异无统计学意义.主斜眼手术前、后眼球旋转度分别为(2.70±2.36)°、(6.00±2.76)°,差异有统计学意义.显微手术组:主视眼手术前、后眼球旋转度分别为(2.86±2.28)°、(3.12±2.17)°,差异无统计学意义.主斜眼手术前、手术后眼球旋转度分别为(2.08±1.86)°、(3.28±2.04)°,差异有统计学意义.主斜眼非显微手术组与显微手术组进行两样本t检验,术前差异无统计学意义,术后差异有统计学意义.②上斜肌麻痹非显微手术组:主视眼手术前、手术后眼球旋转度分别为(2.88±3.58)°、(2.08±2.36)°,差别无统计学意义.主斜眼手术前、手术后眼球旋转度分别为(2.48±2.51)°、(5.73±1.98)°,差别有统计学意义.显微手术组:主视眼手术前、手术后眼球旋转度分别为(4.90±3.60)°、(4.56±1.12)°,差异无统计学意义.主斜眼手术前、手术后眼球旋转度分别为(3.12±3.07)°、(4.26±1.98)°,差异有统计学意义.主斜眼非显微手术组与显微手术组进行两样本f检验,术前两组差异无统计学意义,术后两组差异有统计学意义.结论 ①显微手术可以提高斜视手术的精细度.②虹膜定位技术可以客观地描述斜视患者的眼球旋转状态,减少手术源性旋转,并且为临床手术效果做出评价.     

TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞基质金属蛋白酶2及其抑制剂表达

目的观察转染基质金属蛋白酶2抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase2,TIMP-2)基因的豚鼠巩膜成纤维细胞不同时间增生能力及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)和TIMP-2的表达,探讨基因治疗近视的可行性。方法随机选取三色健康豚鼠,组织块法体外培养原代巩膜成纤维细胞,免疫组织化学法进行波形蛋白的鉴定,取第3～6代细胞进行实验。分子克隆构建携带TIMP-2基因的真核表达载体,转染豚鼠巩膜成纤维细胞,MTT法观察转染后12h、24h、48h、3d、5d、7d细胞增生能力。提取总RNA,二步法逆转录-聚合酶链反应检测MMP-2mRNA及TIMP-2mRNA的表达水平。结果豚鼠巩膜成纤维细胞原代、传代培养生长良好,波形蛋白鉴定阳性。转染3d、5d、7d TIMP-2基因转染组成纤维细胞的增生速度分别为0.6724±0.0092、0.7963±0.0060、0.8462±0.0064,明显快于正常对照组成纤维细胞(0.5810±0.0120、0.6525±0.0072、0.7129±0.0132),差异均具有显著统计学意义(均为P<0.01)。转染48h MMP-2mRNA表达即开始减少,转染3d时表达明显减少,达到最低,除转染12h与24h之间外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间MMP-2mRNA表达差异均有统计学意义(均为P<0.05)。TIMP-2mRNA表达在转染48h时即开始增加,除12h与24h外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间TIMP-2mRNA表达差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论转染TIMP-2基因对豚鼠巩膜成纤维细胞有促增生作用,TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞抑制MMP-2mRNA的表达,可在一定程度上阻止近视发展中巩膜组织的丢失与重塑。     

单硝酸异山梨酯、缬沙坦、螺内酯复方对大鼠的长期毒性研究

目的 观察SD大鼠连续6个月口服单硝酸异山梨酯、缬沙坦、螺内酯复方所产生的毒性反应,比较3种药物联合应用后,毒性是否增加或产生新的毒性。方法 健康SD大鼠200只,雌雄各半,分为5组：空白对照组、复方73、244、733 mg·kg-1及缬沙坦600mg·kg-1对照组,每组40只。给药体积为10mL·kg-1,每日ig给药1次,每周给药6d,连续给药6个月,停药观察4周。实验期间,每日进行一般状态观察,每周测定1次体质量及摄食量,于给药3、6个月及停药4周后,各组动物分别进行血压、血液学、血液生化学指标检测,动物剖检并进行病理组织学检查。结果 复方73、244、733 mg·kg-1及缬沙坦600 mg·kg-1对照组血压出现明显降低,为复方药物药理作用结果。244、733 mg·kg-1及缬沙坦600 mg·kg-1对照组RBC、HCT、HGB及Ret均出现明显降低,肾功能指标CREA、UREA及电解质K＋明显升高,组织病理学检查肾脏出现明显病理学改变,当停药恢复期结束后,上述各指标恢复正常。结论 本试验条件下,单硝酸异山梨酯、缬沙坦、螺内酯复方口服6个月无不良反应剂量（NOAEL）为73 mg·kg-1,当大鼠6个月给药剂量达到244 mg·kg-1时,血液学、血钾及肾功出现明显毒性反应,停药后可恢复正常。复方中3种药物联合应用,同缬沙坦单独使用相比未见毒性增加或产生新的毒性。     

间歇性外斜视手术时机探讨

目的 通过观察不同年龄、双眼视功能状态手术前后变化,探讨间歇性外斜视的手术时机.方法 将56例间歇性外斜视患者根据手术时年龄≤5岁、5～9岁和≥9岁分为A、B、C三组,再根据术前有无融合功能及远或近立体视分组,统计分析不同年龄组手术前后眼位、双眼视功能变化,以及手术前后融合功能变化、远或近立体视功能变化.结果 术后眼位正位率A组77.8%、B组91.7%、C组85.7%,差异无统计学意义.双眼视觉功能的恢复率A组88.9%、B组87.5%、C组50.0%,差异显著有统计学意义.结论 B组术后正位率优于A组,但双眼视觉功能的恢复却A组优于B组.术前具有融合点及融合范围者,术后双眼视功能恢复率高.近立体视丧失、远立体视保存者术后远立体视锐度恢复好,术后立体视的恢复由远立体视开始.间歇性外斜视的手术时机应根据病人眼位、年龄、融合状态及立体视功能多方面综合考虑.     

胰高血糖素对豚鼠巩膜成纤维细胞增生的影响及其机制

背景胰高血糖素与近视的发生密切相关，在一定浓度范围内可抑制近视的发展，但其确切的作用机制尚不明确。目的研究胰高血糖素对豚鼠巩膜成纤维细胞（GSFCs）生长的影响及作用机制。方法获取出生15d的健康纯种豚鼠的巩膜组织，采用组织块培养法进行GSFCs的培养和传代，采用免疫组织化学法检测培养的细胞中波形蛋白抗体、细胞角蛋白抗体及S-100抗体的表达。用完全随机法将培养的细胞分组，分别在不同组的培养孔中加入5、10、50、100、200μg／L胰高血糖素培养GSFCs24h，不加胰高血糖素培养的为对照组。利用MTT比色法观察各质量浓度胰高血糖素作用后及50btg／L胰高血糖素作用1、2、3、5、7dGSFCs的生长情况，酶联免疫检测仪测量波长490nm处各孔细胞的吸光度（A490）值，并用ELISA法检测培养72h不同质量浓度胰高血糖素对GSFCs中基质金属蛋白酶2／组织金属蛋白酶抑制剂2（MMP-2／TIMP-2）表达水平的影响，以酶标仪测定450nm波长处各孔细胞的A450值。结果GSFCs传代培养后密度较低时呈枝状排列，密度较高时呈束状或漩涡状排列，波形蛋白抗体反应阳性。随着胰高血糖素质量浓度的增加，细胞的A490值逐渐升高，差异有统计学意义（F=32．340，P=0．013），胰高血糖素质量浓度〉10μg／L时，细胞的A490值较对照组明显升高，差异均有统计学意义（t=5．575、6．627、16．074、12．003，P〈0．05）。培养孔中加入50μg／L胰高血糖素后随着培养时间的延长，细胞的A450值升高，差异有统计学意义（F时间=10．610，P=0．024），且与对照组比较细胞的A490值升高，差异有统计学意义（F。=9．068，P=0．039）。胰高血糖素质量浓度在5～200μg／L时，随胰高血糖素质量浓度的增加，MMP-2含量逐渐减少，差异有统计学意义（F=153．639，P=0．036），但TIMP-2含量的变化差异无统计学意义（F=24．770，P=3．250）。结论胰高血糖素可促进体外培养的GSFCs的增生，其作用呈剂量和时间依赖性，其作用机制可能是下调MMP-2在GSFCs中的表达，MMP-2／TIMP-2失衡所致。     

一株放线菌发酵液的抗菌活性及稳定性研究

目的：研究放线菌菌株GYM39-2发酵液对临床常见病原性细菌及真菌的抗菌活性,同时观察温度、光照、pH值及紫外线等理化因素对发酵液稳定性的影响.方法：利用纸片扩散法测定放线菌株GYM39-2发酵液对临床病原菌的抗菌谱,观察改变温度、光照、pH及紫外线等理化因素时对发酵液的抗菌活性及稳定性的影响.结果：菌株GYM39-2对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、白念珠菌及新生隐球菌均有抗菌活性,发酵液对温度、光照的改变及紫外线的照射均有较好的稳定性,pH在5～7之间发酵液抗菌活性最强.结论：菌株GYM39-2发酵液具有良好的抗菌活性及稳定性,能为相关研究提供菌株资源.     

尼妥珠单抗联合放疗对晚期口腔癌患者的临床疗效分析

目的 探讨尼妥珠单抗联合放疗对晚期口腔癌患者临床疗效的影响。方法 选取2018年1月～2021年10月在滨州市第二人民医院治疗的60例晚期口腔癌患者作为研究对象，通过随机数表法分为对照组和观察组，每组30例。对照组患者实施放疗进行治疗，观察组采用放疗与尼妥珠单抗联合治疗。对比两组的临床疗效、不良反应发生率和口腔黏膜炎情况。结果 观察组总有效率较对照组高，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组消化道反应发生率、皮疹发生率、口腔黏膜受损发生率、白细胞减少发生率较对照组低，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组患者口腔黏膜炎情况优于对照组，口腔黏膜炎病程较对照组短，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 尼妥珠单抗联合放疗可提高晚期口腔癌临床疗效，减少不良反应，从而达到促进患者康复的目的。     

贵州及广西地区临床新生隐球菌微卫星分型研究

新生隐球菌（ Cryptococcus neoformans ）是临床上重要的致病真菌,主要可导致艾滋病、器官移植等免疫抑制患者发生新生隐球菌病［1］。本文采用多位点微卫星基因分型法（ MLMT ）［1］对贵州及广西地区的新生隐球菌临床株进行分析,同时对不同微卫星型的菌株进行了药物敏感性的比较,以帮助临床上深入认识新生隐球菌的流行病学及发病机制。     

几类主要病原需氧放线菌菌属的SecA1基因分析研究

目的 了解几类主要病原需氧放线菌不同菌属间SecA1基因碱基突变特点,为病原需氧放线菌的实验室诊断,分类及致病性提供一定的实验室理论数据。方法 以162株需氧放线菌为实验研究对象,通过分子生物学方法对需氧放线菌SecA1基因扩增测序,及收集NCBI数据库中已发表的需氧放线菌SecA1基因,运用多序列对比及DNAStar软件对需氧放线菌SecA1序列进行特异性基序分析及SecA1蛋白的二级结构和表位特性预测。结果 需氧放线菌不同菌属间SecA1序列在300~350 bp区域有着特异性差异,经预测该区域编码的SecA1蛋白二级结构属间大致相同,而蛋白质柔性区域、亲水性及表面可及性等性质在属间存在差异,其中以Mycobacteria菌属的差异较为明显。结论 需氧放线菌SecA1基因不同菌属间具有特异性的碱基突变,这种突变导致属间SecA1蛋白部分性质有差异,与各菌属致病性可能存在着一定的相关性。