辅助生殖中电子标签应用于患者身份信息核对及配子的标记识别

目的探讨基于无线射频识别技术(radio frequency identification,RFID)的电子标签在女性胚胎移植环节和男性精液收集2个关键环节的效率与可靠性。方法电子标签中涵盖患者身份证、指纹及头像三重唯一信息,本研究将500名胚胎移植患者随机分成传统标签(A1)组和电子标签(A2)组,另将500名精液交样患者随机分成传统标签(B1)组和电子标签(B2)组,分别比较这2个关键环节身份核对所需的工作量、核对所需时间及对掺杂近似姓名标签的纠错率。结果 A2组增加了腕带RFID标签环节,在患者上手术台前,有充分时间实施三重身份核对并扣带腕带式RFID标签,这使得手术台上的术前身份确认需要的时间[(2.17±1.31)s]明显短于A1组[(35.32±20.65)s,P=0.00)],A1组指纹核对一次识别失败比例达17.0%,需要多次调整按压位置。在精液收样时确认标签一致性的环节,B2组的感应核对耗时[(2.02±1.41)s]显著低于B1组的人工核对[(37.52±13.12)s,P=0.00],且在模拟混杂近似标签时,短时间内人工对传统标签的纠错率为89.6%,而感应器对电子标签的纠错率为100%(P=0.00)。结论采用含有三重信息的电子标签可以高效可靠地辨识患者身份信息,保证人与标签的一致性、多个标签的一致性,多个环节上优化身份核对流程,提高了辅助生殖中门诊及胚胎实验室管理的效率与安全性。     

小鼠精子激活力减弱模型制备技术的初步研究

[目的]:人类辅助生殖技术中,低受精率的发生机理及辅助激活提高受精率的安全性尚不清楚,缺乏激活力减弱的精子模型是其中一个主要研究障碍.本研究拟探索减弱小鼠精子激活力的新技术.[方法]首先,分别对精子进行化学破膜、机械脱尾及其联合操作于37℃孵育12h,比较各操作对显微授精后的受精率的影响;然后进一步结合时间因素,观察处理时间与精子激活力减弱程度的联系.同时,对操作后的胚胎早期发育的影响也进行了相应观察.[结果]①化学破膜法与机械脱尾法对精子破膜并温育后,均能有效降低精子受精率;②相对于正常的精子,对小鼠精子进行吹打机械脱尾,37℃下温育2、4、8、12h后,受精率和卵裂率均出现程度逐步增加的显著降低(P＜0.01);③与对照相比,以吹打机械脱尾并37℃下温育后的精子进行显微授精后,其受精卵的囊胚率和孵出率也显著降低(P＜ 0.001).[结论]将小鼠精子机械脱尾并在37℃下温育,精子激活力随温育时间增加而显著降低,同时其胚胎发育能力下降.本研究初步探索了程度可控的降低精子受精激活力的新技术,其安全性及导致精子激活力下降的机制尚需进一步研究.     

精子脱尾温育降低小鼠卵胞浆内单精子显微注射的受精率

目的 脱尾的精子头注射是小鼠显微授精的一种常用方法,脱尾对精子造成的膜损伤是否影响卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的受精率和卵裂率尚不清楚,该研究拟初步探索精子的机械脱尾等膜损伤以及不同温育条件对ICSI的受精率和卵裂率的影响.方法 首先,用机械吹打法处理小鼠精子悬液,使得部分精子脱尾,于不同温度下孵育,观察孵育温度对ICSI的受精率和卵裂率的影响;然后比较精子化学破膜与吹打脱尾处理后温育一定时间对显微授精的受精率、卵裂率的影响.结果 相对于对照组,对小鼠精子进行吹打脱尾,经37℃下温育12h后的显微授精双原核形成率和卵裂率显著下降(75.6％ vs 15.1％,P＜0.01;91.1％ vs 18.9％,P＜0.01),而4℃下温育12h的结果未见正常受精率和卵裂率受显著影响.用Triton-100精子进行化学破膜后温育,尽管其没有机械脱尾法效果显著,也同样明显降低了受精率和卵裂率(P＜0.01).结论 该研究初步提示,精子脱尾等破膜损伤在经37℃较长时间温育后会降低小鼠ICSI的受精率,常规小鼠ICSI操作中小鼠精子批量脱尾处理后不宜在37℃下放置过久.     

磷脂酶C-zeta在卵子激活中的作用及研究进展

磷脂酶C-zeta(PLC-ζ)是特异分布于睾丸组织的一种磷脂酶C,在哺乳动物的卵母细胞激活中起着极其重要的作用;其编码基因、蛋白分子和生化性质的改变与卵子激活缺陷、不育症密切相关。本文综述了PLC-ζ的结构和功能及其在卵子激活中的作用以及与男性不育的关联等内容,并对其最近的研究进行了简要概述。     

一种非Piezo依赖的高卵子存活率小鼠显微授精技术

目的对已建立的非Piezo依赖的小鼠显微授精技术作进一步改良,以获得更高的卵子存活率。方法将卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术中对卵子深吸持后直接深穿刺(一步法非Piezo-ICSI组)的步骤分成两步进行(两步法非Piezo-ICSI组):先浅吸持后浅穿刺,再进一步深吸持后深穿刺;另以孤雌激活发育的卵子作为卵子质量对照组。比较两步法非Piezo-ICSI组与一步法非Piezo-ICSI组卵子的存活率、原核出现率和卵裂率。结果两步法非Piezo-ICSI组的卵子存活率(92.2%)显著高于一步法非Piezo-ICSI组(83.7%)(P<0.01);而原核出现率和卵裂率与一步法非Piezo-ICSI组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠卵子胞膜在被新型持卵管深吸持时的变形造成了部分卵子胞膜变脆,两步法吸持穿刺在深吸持前进行了穿刺,避免了脆性敏感时的穿刺,有利于卵子存活。