靶向FPR2新型探针99mTc-WRWWWW的制备及其在炎症小鼠模型的初步研究

目的：构建靶向甲酰肽受体2(FPR2)的新型分子探针99mTc-WRWWWW,并评估其在正常昆明小鼠体内的药代动力学特点及在炎症模型鼠中的靶向效能。方法：核素99mTc标记WRWWWW,高效液相色谱法（HPLC）测定标记产物的放射化学纯度及体外稳定性。生物分布实验（30、60、120、240 min时间点）研究探针在正常昆明鼠体内药代动力学特点。构建急性肌肉炎症及结肠炎模型鼠,并进行小动物SPECT/CT显像。HE染色与免疫组化验证炎症组织免疫细胞浸润及FPR2表达水平。结果：成功构建新型探针99mTc-WRWWWW,标记率大于90%,放化纯大于99%,体外稳定性良好。正常昆明小鼠生物分布显示99mTc-WRWWWW主要经肝、肾代谢,60 min时肝、肾摄取值分别为（15.33±0.76）和（4.50±1.50）%ID/g。小动物SPECT/CT显像示实验组小鼠肌肉及结肠炎症病灶处放射性摄取较对照组小鼠明显增高,并能被过量非标记肽所阻断,探针具有较好的灵敏度和特异性。HE染色及免疫组化证实炎症肌肉内见大量免疫细胞浸润,FPR2表达水平升高,进一步验证了体内显像结果。结论：本研究成功制备...     

转铁蛋白受体靶向分子探针99Tcm-T7的放射性标记及肿瘤显像研究

目的 制备靶向转铁蛋白受体（TfR）的多肽分子探针99Tcm-组氨酸-精氨酸-脯氨酸-酪氨酸-异亮氨酸-丙氨酸-组氨酸（简称99Tcm-T7）,并评估其在荷瘤裸鼠模型micro SPECT/CT显像中的效果。 方法 采用间接标记法,在共配体N-三（羟甲基）甲基甘氨酸和乙二胺二乙酸的协同下,制备99Tcm-T7。采用流式细胞术测定人胰腺癌PANC-1细胞和人乳腺癌MX-1细胞表面TfR的表达水平,采用体外细胞结合及细胞竞争抑制实验评估99Tcm-T7体外结合TfR的亲合力及特异性。构建荷瘤裸鼠模型,注射99Tcm-T7后进行micro SPECT/CT显像及生物学分布实验。采用离体组织放射性磷屏自显影成像及组织病理学检查,观察TfR的表达情况。2组间的比较采用独立样本t检验。 结果 成功制备了分子探针99Tcm-T7,其标记率＞95%,分别在与生理盐水、胎牛血清的混合液中孵育4 h后的放射化学纯度为（95.3±0.3）%和（90.6±0.4）%。流式细胞术实验结果显示,PANC-1细胞与TfR单克隆抗体的结合率为（98.9±0.1）%,而MX-1细胞与TfR单克隆抗体的结合率为（0.2±0.1）%。体外细胞结合实验结果表明, PANC-1细胞与99Tcm-T7共孵育60 min后结合率达到峰值[(16.12±0.01)%],高于MX-1细胞[（1.20±0.01）%],且二者间的差异有统计学意义（t=28.67,P<0.001）;细胞竞争抑制实验结果表明,PANC-1阻断组与99Tcm-T7 的结合率降低至（2.40±0.01）%,与PANC-1实验组的差异有统计学意义（t=26.91,P<0.001）。荷瘤裸鼠体内micro SPECT/CT显像结果显示,99Tcm-T7可从血液中迅速清除,主要通过肾脏排泄。PANC-1荷瘤裸鼠模型在注射99Tcm-T7后30 min时肿瘤轮廓显示清晰,肿瘤/肌肉比值达2.80±0.22。生物学分布实验结果显示,肿瘤及各脏器对99Tcm-T7的摄取[每克组织百分注射剂量率（%ID/g）]与显像结果一致,且99Tcm-T7在PANC-1细胞中的摄取[（0.55±0.18）%ID/g]高于MX-1细胞[（0.16±0.11）%ID/g],差异有统计学意义（t=6.42,P<0.001）。放射性磷屏自显影结果显示,在注射99Tcm-T7 30 min后,相较于MX-1细胞,PANC-1细胞显著摄取99Tcm-T7;在正常组织脏器中,以肾脏摄取最为显著,其次为肝脏。苏木精-伊红染色法及免疫组织化学染色法结果显示,肿瘤实质内未见明显坏死,在PANC-1细胞中TfR呈高表达,而在MX-1细胞中TfR呈低表达。 结论 成功制备了靶向TfR的特异性多肽分子探针99Tcm-T7,其在荷瘤裸鼠模型中具有良好的显像效能,有望为在体监测肿瘤TfR的表达提供新的影像学手段。     

基于七甲川菁构建并初步评估双模态PET/近红外荧光探针

目的 基于七甲川菁染料MHI148构建新型PET/近红外荧光(NIRF)双模态探针，并初步评估其用于肿瘤模型小鼠成像的能力。方法 采用双功能螯合剂DOTA修饰MHI148构建MHI148-DOTA,对其光物理、光热性能进行表征；以放射性核素⁶⁸Ga标记MHI148-DOTA,合成探针⁶⁸Ga-MHI148,测定其放射化学纯度及稳定性。建立小鼠乳腺癌4T1及人脑胶质母细胞瘤U-87MG皮下瘤模型，以⁶⁸Ga-MHI148探针对其进行小动物PET显像，观察成像效果及该探针在小鼠体内的生物分布。结果 MHI148-DOTA光物理及光热性能优异。以之构建的探针⁶⁸Ga-MHI148放射化学纯度>99%,稳定性良好；小动物PET成像可清晰显示肿瘤，肿瘤摄取随时间延长而逐渐升高，6 h时U-87MG及4T1肿瘤/肌肉摄取比值分别为4.55±0.20及8.08±2.26;⁶⁸Ga-MHI148小鼠体内主要分布于血液、肺、肝及肾脏。结论 成功构建的双模态⁶⁸Ga-M...