bFGF和IGF-Ⅰ对人PDL细胞在牙面生长的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对人牙周膜(PDL)细胞在离体牙根面上附着、增殖的影响。方法应用细胞计数法和扫描电镜观察法,观察细胞因子作用离体正常和牙周病患牙根面上PDL细胞附着和增殖的情况。结果正常对照组人牙周膜细胞增殖率为80·0%,而病变对照组为50%。加入bFGF和IGF-Ⅰ后,正常牙根面细胞附着数量比正常对照增加22·2%和37·26%,比病变根面多36·4%和37·6%,病变根面组比病变对照组增加12·34%和25·03%;正常牙根面组增殖率为212·8%和205·5%,牙周病牙根面增殖率为185·7%和177·0%。扫描电镜下病变牙根面上PDL细胞数量少,形态细长,突起伸展不够充分,边缘皱缩,附着较松散;经生长因子作用后,细胞附着较为紧密,数量有所增加,状态明显改善。结论无论是否加入生长因子,PDL细胞在正常牙根面上的附着数量均明显多于病变根面;生长的因子能有效促进PDL细胞在牙根面的附着和增殖。     

碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子-1对牙周膜细胞增殖的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对人牙周膜(PDL)细胞增殖的影响。方法通过体外细胞培养技术,用噻唑盐(MTT)法检测bFGF和IGF-1单独或联合应用时对人PDL细胞增殖的影响。结果bFGF和IGF-1单独应用时均可明显促进PDL细胞增殖,在实验的5d范围内,bFGF浓度在1～100ng/ml和IGF-1浓度在1～100ng/ml时呈浓度-时间依赖关系,bFGF最佳效应浓度为10ng/ml(比对照组增加了247.8%),IGF-1最佳效应浓度为100ng/ml(比对照组增加了236.5%),两者的最佳效应时间均为3d。以二者的最佳效应浓度联合应用时,作用更为显著,培养3d时比对照组增加了290.4%(P<0.001)。结论bFGF和IGF-1均能促进人PDL细胞的分化和增殖,二者联合应用有协同效应。     

人外周血单个核细胞在尼古丁作用下白细胞介素-1β的分泌

目的吸烟是增加慢性牙周炎发病率的危险因素,本试验研究体外培养正常人和重度牙周炎患者外周血单个核细胞(PBMC)在尼古丁作用下的白细胞介素-1β(IL-1β)分泌情况。方法采集20例重度牙周炎患者和20例健康志愿者的PBMC,体外培养并与尼古丁(浓度分别为5,25,50,100和200 ng/ml)作用,分别在培养1,2,3,4,5 d后收集上清液,用ELISA法检测上清液中IL-1β的水平。结果5 ng/ml尼古丁对PBMC分泌IL-1β几乎没有影响,与对照组比较差异无显著性(P>0.05),随着尼古丁浓度增加,IL-1β分泌明显增加(P<0.001),并呈浓度时间依赖关系,但当尼古丁浓度超过100 ng/ml,PBMC分泌IL-1β的水平随浓度的增加而下降,与50 ng/ml时比较,差异有显著性(P<0.01)。牙周炎患者PBMC培养3 d后,IL-1β含量为(31.2±7.8)pg/ml,与对照组(23.6±8.1)pg/ml比较差异有显著性(P<0.01);50 ng/ml尼古丁时,牙周炎患者IL-1β为(197.9±26.5)pg/ml,明显高于对照组(117.4±16.8)pg/ml,差异有显著性(P<0.001)。结论尼古丁可致PBMC分泌IL-1β增加,在一定浓度范围内呈时间剂量依赖关系,但高浓度却抑制其分泌;重度牙周炎对尼古丁的刺激更加敏感,提示IL-1β的变化可能是吸烟影响牙周病的机制之一。     

Bmp-2对牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 探讨骨形成蛋白-2（BMP-2）对人牙周膜（PDL）细胞增殖及碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法 通过体外细胞培养技术。用噻唑盐（MTT）法检测BMP-2刺激前后人PDL细胞增殖的情况，用酶动力学方法检测ALP活性。结果 BMP-2可明显促进PDL细胞增殖。在实验的5d范围内，浓度在25-400μg／ml时呈浓度-时间依赖关系，最佳效应浓度为200μg／ml（比对照组增加了193．4％），最佳效应时间均为3d。BMP-2可显著增强PDL细胞的ALP活性，25μg／L作用下ALP活性已经比对照组差异有显著性（P〈0．01）。浓度为100μg／L时效果最佳（P〈0．001），从第2d起。能增强人PDL细胞的ALP活性，第5d时作用趋于缓和。结论 BMP-2能促进人PDL细胞的分化和增殖，能促进细胞ALP的活性。     

PDGF和EGF对牙周膜细胞增殖、纤维结合蛋白和碱性磷酸酶活性的影响

目的探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)和表皮生长因子(EGF)对人牙周膜(PDL)细胞增殖、纤维结合蛋白(Fn)和碱性磷酸酶(APLase)活性的影响。方法体外培养人PDL细胞,与不同浓度的PDGF-BB、EGF或PDGF-BB+EGF作用,用噻唑盐(MTT)法观察PDL细胞增殖的情况,ELISA法检测Fn水平,用酶动力学方法检测ALPase的活性。结果PDGF-BB明显促进PDL细胞增殖,在1～50ng/ml和5d范围内,呈浓度-时间依赖关系,最佳效应时间和浓度为3d和10ng/ml,比对照组增加了256.1%(P<0.001),但对PDL细胞Fn水平无明显影响(P>0.05),却显著抑制PDL细胞的ALPase活性(P<0.01)。低浓度的EGF对PDL细胞的增殖没有影响(P>0.05),(10～50)ng/ml的EGF从第3天起,可促进PDL细胞的增殖,差异显著(P<0.05),但10ng/ml与50ng/ml之间无显著性差异(P>0.05),其最佳效应浓度为10ng/ml,最大效应在用药后4d,此时与对照组相比增加了124.1%,EGF可使PDL细胞Fn水平明显提高(P<0.01),但抑制ALPase的活性(P<0.001)。PDGF-BB和EGF二者联合应用,在促进增殖、提高Fn的水平和抑制ALPase活性方面均具有协同效应。结论PDGF-BB、EGF均可促进人PDL细胞的增殖、抑制PDL细胞的ALPase活性,但PDGF-BB对其Fn水平没有明显影响,而EGF可使其Fn水平明显提高,二者联合具有协同效应。     

TGF和bFGF对牙周膜细胞ALP活性及Fn合成的影响

目的探讨转化生长因子α,β(TGFα,β)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜(PDL)细胞碱性磷酸酶(ALP)活性及纤维结合蛋白(Fn)合成的影响。方法体外培养人PDL细胞,与一定浓度的TGFα,β或bFGF作用后,用ELISA法检测Fn含量,用酶动力学方法检测ALP活性。结果TGFα使PDL细胞合成Fn的水平(0.937±0.036)比对照组(0.687±0.023)增加了136.4%(P<0.05),TGFβ使Fn的水平(2.885±0.052)明显提高(P<0.001),bFGF组(0.738±0.041)则没有明显影响(P>0.05)。与对照组(2.431±0.051)相比,TGFβ(1.748±0.042)可抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.05),bFGF(1.138±0.046)显著抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.01),TGFα(0.331±0.022)的抑制作用更强(P<0.01)。结论TGFα,β和bFGF可能通过调节PDL细胞的ALP活性和合成Fn的水平,发挥PDL细胞在牙周组织的再生中的作用。     

血小板衍生生长因子-BB和转化生长因子-β对人牙周膜细胞增殖的影响

目的探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)和转化生长因子-β(TGF-β)对人牙周膜(PDL)细胞增殖的影响。方法体外培养人PDL细胞,与不同浓度的PDGF-BB、TGF-β或PDGF-BB+TGF-β作用,用噻唑盐(MTT)法观察PDL细胞增殖的情况。结果PDGF-BB和TGF-β均明显促进PDL细胞增殖,在1～50ng/ml和5d范围内,呈浓度-时间依赖关系,PDGF-BB最佳效应时间为3d,最佳效应浓度为10ng/ml,其增殖比对照组增加了256.1%(P<0.001),TGF-β最佳效应时间为4d,最佳效应浓度为5ng/ml,比对照组增加了187.7%(P<0.01),在时间上TGF-β的促增殖作用晚于PDGF-BB。PDGF-BB与TGF-β联合应用时,二者有协同作用,可非常显著地促进PDL细胞增殖,其最大效应作用发生在用药后3d,此时与对照组相比增加了326.9%(P<0.001)。结论PDGF-BB、TGF-β可促进人PDL细胞的增殖,二者联合应用有协同效应。     

白细胞介素-1β对人牙周膜细胞生物活性的影响

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养人牙周膜(PDL)细胞生物活性的影响。方法体外培养人PDL细胞,分别与0.1、0.5、1、5和10ng/ml的IL-1β作用3d,或在10ng/ml的IL-1β作用1、2、3、4、5d后,用噻唑盐(MTT)法检测PDL细胞增殖的情况;在10ng/ml的IL-1β作用4d后用ELISA法检测纤维连接蛋白(Fn)的含量,用酶动力学方法检测碱性磷酸酶(ALP)活性。结果IL-1β以浓度依赖的方式抑制PDL细胞的增殖,最小抑制浓度为1ng/nl(P<0.05)。在IL-1β作用下,PDL细胞合成Fn的水平明显下降(P<0.001),并强烈抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.001)。结论IL-1β可能通过抑制PDL细胞的增殖以及抑制ALP活性和Fn的合成,影响牙周病的发生和修复。     

血小板衍生生长因子-BB对人牙周膜细胞在牙根面上附着和生长的影响

目的:探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)对人牙周膜(PDL)细胞在离体牙根面上附着、增殖的影响.方法:应用细胞计数法和扫描电镜观察法,观察在细胞因子作用下,离体正常和牙周病患牙根面上PDL细胞附着和增殖的情况.结果:无论是否加入PDGF-BB,PDL细胞在正常牙根面(N组)上的附着数量均明显多于病变(P组)根面(P＜0.01);与对照(C组)相比,PDGF-BB(S组)既能促进PDL细胞在正常根面的附着(P＜0.01),也能促进PDL细胞在牙周病变根面上的附着(P＜0.05).不加PDGF-BB时,PDL细胞在NC上的增殖率为80.0%,PC只有50%;加入PDGF-BB后,NS增殖率为249.4%,PS的增殖率为213.09%,与对照(C)组相比,PDGF-BB既能明显促进PDL细胞在正常根面的增殖(P＜0.01),又能显著提高PDL细胞在病变牙根面上的增殖(P＜0.01);扫描电镜下病变牙根面上生长的PDL细胞数量较少,形态细长,细胞的突起伸展不够充分,边缘皱缩,与根面附着较松散,经PDGF-BB作用后,细胞与根面的附着状态有所改善,较为紧密,数量有所增加.结论:PDGF-BB是一种有效的促PDL细胞生长的因子,可促进PDL细胞在牙根面的附着和增殖.