鸡T淋巴细胞表面受体研究进展

本文以结构、组织分布、个体发育、生物学特性及功能等方面综述了鸡T淋巴细胞表面受体的研究进展，并将其与哺乳动物、人和鼠作了比较。它们在很多方面都很相似，但鸡又有自身的特点。     

鸡T淋巴细胞功能的检测方法研究进展

Ｔ淋巴细胞功能的检测是研究鸡免疫功能的一个重要方面，近年来鸡细胞免疫的研究进展很快，鸡Ｔ淋巴细胞功能的研究也越来越受到重视。本文综述了鸡Ｔ淋巴细胞功能的检测方法及其特点，并与哺乳动物进行了比较。     

清远市2003～2004年HIV/AIDS监测

目的 了解清远市HIV／AIDS流行特点和变化趋势,为制定防治措施提供科学依据。方法 对2003～2004年的常规监测、哨点监测和人行为学调查资料进行统计分析。结果 全市2003～2004年共监测各类人群45716人次,检出HIV感染者89例,检出率为19．47／万。感染者仍以吸毒人群为主（62．92％）;感染者中以20～39岁的青壮年比例居多（70．78％）,经性传播的感染例数是1999～2002年的3倍。结论 清远市注射吸毒人群HIV检出率维持在较高水平,经性传播感染例数呈明显上升趋势,表明清远市HIV流行速率明显加快,控制吸毒和卖淫活动,提高各类人群的自我防范意识是减低艾滋病流行的重要手段。     

抗HER2靶点抗体偶联药物大鼠重复给药毒性研究

目的：通过对大鼠尾静脉重复注射给药重组抗HER2人源化单克隆抗体偶联美登素衍生物DM1,对其进行临床前安全性评价。方法：大鼠随机分成5个试验组,包括空白对照组、受试物低（5 mg·kg^-1）、中（11 mg·kg^-1）、高（22 mg·kg^-1）剂量组和已知对照药品组（22 mg·kg^-1,Kadcyla?）,每组30只动物,雌性各半。尾静脉注射给药,每周给药1次,连续给药3次,末次给药后恢复3周。研究期间,在不同时间点对动物临床症状、体重、摄食量、体温、尿液、血液学、血清生化及组织病理学等指标进行检测。结果：给药后,动物出现一定程度的不良反应,且作用强度呈剂量依赖性递增。毒副反应症状包括摄食量减少、尿液pH值改变;血液学检查发现,动物Lymph、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、APTT下降,WBC、Neut、Mono、Eos、Baso、Retic计数升高;血清生化检查发现,动物TG、A/G、Na⁺、K⁺下降,ALT、AST、ALP、GGT、CHO、LDH、BUN、TP升高;骨髓检查发现,受试物影响动物红系细胞成熟分化;受试物引起动物肝脏、脾脏、肺（含支气管）重量增加,睾丸、附睾重量减少;组织病理学检查发现,肝脏、肾脏、脾脏、垂体、肾上腺、舌、皮肤细胞有丝分裂项增加,睾丸生精细胞数目减少和变性坏死,附睾精子减少和纤维组织增生。对照品组动物,给药后出现上述同样的改变。试验结果表明,受试物和已知对照药品两种药物的大鼠毒性研究结果具有相似性。结论：大鼠尾静脉重复注射给予重组抗HER2人源化单克隆抗体偶联美登素衍生物DM1后,毒性靶器官为肝脏、肾脏、脾脏、胸腺、肺（含支气管）、肠系膜淋巴结、十二指肠、睾丸、附睾、眼球、垂体、肾上腺、皮肤、舌、胸骨（骨髓）。未见毒性反应剂量（NOAEL ≤ 5 mg·kg^-1）。上述研究结果支持该药物成功获得临床试验批准,为后续开展临床研究提供了参考依据。     

I型鸭肝炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用

目的 建立快速诊断I型鸭肝炎病毒的荧光定量RT-PCR方法。方法 根据NCBI下载的20个来自我国不同省份的的I型鸭肝炎病毒的基因序列,找出其保守序列,设计合成一对引物和一条TaqMan探针,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性。结果 该方法敏感性达20拷贝,比常规PCR敏感性高。其特异性强,对番鸭细小病毒(MDPV),鹅细小病毒(GPV),新城疫病毒(NDV)和禽流感(AIV),鸭减蛋综合征病毒(EDSV),禽网状内皮组织增生症病毒(REV),鸭坦布苏病毒(DTMUV),禽呼肠弧病毒(ARV)8种病毒的检测均为阴性,I型鸭肝炎病毒检测结果为阳性。用建立的方法检测了江苏徐州采集100份样品,阳性率为92%。说明I型鸭肝炎病毒在江苏徐州地区的鸭群中普遍存在。结论 建立了I型鸭肝炎病毒荧光定量PCR方法。     

新城疫La Sota疫苗免疫雏鸡T细胞亚类的动态变化

<正>新城疫病毒(NDV)可引起鸡急性高度致死性感染。疫苗免疫是预防和控制该病的主要措施,可引起大多数鸡明显的体液免疫反应,但也有人报道认为有些检测不到中和抗体的鸡对强毒的攻击具有抵抗力,并提出细胞免疫的作用。我们的研究发现,疫苗免疫鸡T细胞亚类的数量与正常对照无特殊病原体(SPF)鸡明显不同,而且免疫鸡在受到强毒攻击后T淋巴细胞的功能状态发生明显改变。为进一步探讨新城疫疫苗引起的细胞免疫的作用,本研究应用抗鸡T淋巴细胞表面受体分子(TCR)的单克隆抗体(McAbs)对La Sota疫苗免疫鸡胸腺、脾脏及外周血液中TCR1T(rδT)、TCR2T(αβT)和TCR3T(αβT)细胞的数量进行了检测,为进一步揭示新城疫疫苗免疫中T淋巴细胞的作用机制提供理论依据。     

新城疫油苗免疫鸡血清IgG抗体含量及T细胞亚类的观察

是接ＥＬＩＳＡ方法和流式细胞分检仪（ＦＡＣｓ）检测了人工免疫新城疫油苗后，雏鸡表中ＩｇＧ抗体含量及胸腺、脾脏和外周血中Ｔ淋巴细胞亚类的变化规律，实验表明，用新城疫油苗免疫后，雏鸡外周血中ＩｇＧ抗体含量明显升高。其脾脏和外周血中ＣＤ３Ｔ和ＣＤ４Ｔ细胞逐增，而ＣＤ８Ｔ数量则减少。雏鸡胸腺中各亚类Ｔ细胞的变化不明显。提示在新城疫苗免疫中，体液免疫和细胞免疫都起作用，而且二者具有一定的相关性。     

山羊IL-2基因的克隆、表达及其多克隆抗血清的制备

应用RT-PCR方法从山羊外周血淋巴细胞中克隆了山羊白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）基因并测序，将编码山羊白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达载体pET30a（＋）上，构建重组质粒并进行确证性测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）并用IPTG于37℃诱导培养。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在。SDS-PAGE分析显示，表达的山羊IL-2融合蛋白分子量约为18kD。包涵体被6mol/L盐酸胍裂解后，通过ProBondTM蛋白纯化试剂盒纯化。用所获得的重组山羊IL-2纯化产物经3次肌内注射新西兰白兔，制备了兔抗山羊IL-2多克隆血清，并用Western blot进行了证明。本次试验成功地表达、纯化了山羊IL-2融合蛋白，并制备了抗山羊IL-2多克隆抗血清，为下一阶段关于山羊IL-2重组蛋白生物学特性及其应用的研究打下了坚实的基础。     

心脏基因工程研究：柯萨奇B2病毒云南分离株VP1基因的分子特征

目的：探讨CVB2云南分离株编码主要中和抗原的衣壳蛋白VP1基因?B5姆肿犹卣鳎云谖泄鶦VB2感染致病的分子基础、基因疫苗的研制和心脏基因工程实施提供参考依据。方法：采用逆转录PCR技术扩增CVB2云南分离株VP1基因，经分子克隆获得pMD18-T-CVB2VP1并测序，应用生物信息学进行其序列、同源性分析、预测蛋白质二级结构，并建立进化树。结果：CVB2云南分离株VP1基因全长约846bp，无起始密码及终止密码，与Ohio-1株(GenBank登录号：AF081312)核苷酸、氨基酸序列同源性最高为98％。BC环的BB区与BC区之间缺失6个腺嘌呤，其编码2个构成无规卷曲结构的赖氨酸。CVB的共同抗原表位区中RIYFKPKHVKA高度保守，为云南分离株及其他参考毒株的共同序列，变异主要在CVB2云南株的251～252位，W→Y，V→I。结论：CVB2云南分离株与Ohio-1株同源性最高，亲缘关系最近，以主要中和抗原表位区存在缬氨酸缺失，CVB共同抗原表位区存在具有规律性的变异及保守序列等为其主要分子特征。