人白细胞介素-15cDNA真核表达载体的构建及其在肺癌细胞中的表达

目的观察人ＩＬ－１５ｃＤＮＡ在腺癌细胞内的表达。方法将人ＩＬ－１５ｃＤＮＡ于ＥｃｏＲＩ、ＢａｍＨＩ位点正向克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ,构建ｐＬ－ＩＬ－１５－ＳＮ的重组质粒。以Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导将该重组质粒转染到人肺鳞癌细胞（ＰＧ细胞系）和小鼠肺腺癌细胞（ＬＡ７９５细胞系）。经Ｇ４１８条件培养筛选,获得阳性细胞克隆。再经ＣＴＬＬ－２细胞增殖法测阳性细胞ＩＬ－１５的表达活性。结果获得３个ＰＧ细胞和４个ＬＡ７９５细胞阳性克隆,ＩＬ－１５活性测定显示其表达水平在２４ｈ内分别在１４２～２０１或１３８～１７８Ｕ／（ｍｌ·１０６细胞）。结论ＩＬ－１５ｃＤＮＡ转导的人和小鼠肺癌细胞可表达有生物学活性的ＩＬ－１５。     

转化生长因子β：参与结核病致病的免疫分子

转化生长因子 β(ＴＧＦ β)不仅在结核病发展过程中产生过量而且在结核分支杆菌感染的活动性病灶部位表达。ＴＧＦ β能够抑制Ｔ细胞的激活及其功能 ,其中包括一些重要的细胞因子如白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )、γ干扰素 (ＩＦＮ γ)等的产生。ＴＧＦ β和其他细胞因子如肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ α)具有协同作用 ,可以形成具有结核病特征的组织破坏。ＴＧＦ β过量产生引起结核病的免疫病理改变提示 ,ＴＧＦ β的抑制剂可以作为活动性结核病感染过程抗结核化疗的辅助治疗。一、ＴＧＦ β的免疫功能1.ＴＧＦ β抑制Ｔ细胞的免疫应答 :ＴＧＦ β抑…     

人白细胞介素—15cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

从正常人外周血中分离粘附的单核细胞，加入ＬＰＳ刺激４ｈ后提取细胞ｍＲＮＡ反转录获得ｃＤＮＡ第一链，用两对特异引物进行巢式ＰＣＲ扩增出含ＢａｍＨＩ酶切位点的编码人１Ｌ－１５成熟蛋白的ｃＤＮＡ，其大小约３６０ｂｐ。用ＰＥＧ法回收其片段并将其连接到ｐＢＳＳＫ载体的ＳｍａⅠ位点上进行序列分析，结果表明其序列与文献报道一致。然后再将其片段亚克隆插入到ｐＧＥＸ－２Ｔ的ＢａｍＨＩ位点。筛选插入方向正确的克隆，转化大肠杆菌ＪＭ１０９，以１ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导５ｈ收集菌体直接进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，与阴性对照相比，ＭＷ４４ＫＤ处多出一条带，紫外扫描显示此带占菌体蛋白总量的８．８％。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ证实此带能够特异地与兔抗人ＩＬ－１５的抗体发生反应。证明ＲＴ－ＰＣＲ所得的人ＩＬ－１５ｃＤＮＡ在大肠杆菌中获得了表达，为进一步探讨人ＩＬ－１５的生物学作用打下基础。     

人IL-15基因修饰肺癌细胞的抗肿瘤作用研究

本研究构建了重组质粒pL-IL-15-SN,以Lipofectin脂质体介导将其分别转染到人肺鳞癌细胞(PC细胞系)、小鼠肺腺癌细胞(LA795细胞系),经G418筛选后获得阳性表达克隆,我们选用了两株高表达IL-15的细胞克隆——人PG1细胞(201 U/ml/10~6 cells/24小时)和小鼠LA795A(178 U/ml/l0~6cells/24小时)细胞作为研究对象进行体内外实验.     

ANTITUMOR EFFECTS OF HUMAN IL-15 GENE MODIFIED LUNG CANCER CELL LINE

ＡＮＴＩＴＵＭＯＲＥＦＦＥＣＴＳＯＦＨＵＭＡＮＩＬ－１５ＧＥＮＥＭＯＤＩＦＩＥＤＬＵＮＧＣＡＮＣＥＲＣＥＬＬＬＩＮＥＳｈｅｎＹｏｎｇｑｕａｎ１沈永泉ＣｕｉＬｉａｎｘｉａｎ２崔莲仙ＨｅＷｅｉ１何维ＸｕｅＬｉ１薛莉ＢａＤｅｎｉａｎ１巴德年１Ｉｎｓｔ...     

瘤浸润淋巴细胞抑制小鼠肺腺癌转移的研究

采用Ｔ＿（７３９）近交系小鼠进行实验，发现小鼠ＬＡ＿（７９５）肺腺癌实体瘤中的瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）体外经白细胞介素２（ＩＬ＿２）激活，具有明显的抗肿瘤作用。体外杀瘤活性用氚－胸腺嘧啶核苷（￣３Ｈ－ＴｄＲ）释放法测定表明：ＴＩＬ的杀瘤活性明显高于自然杀伤细胞（ＬＡＫ）。体内的抗肿瘤作用主要观察ＴＩＬ抑制自发性肺转移作用。实验１静脉注射或瘤周注射ＴＩＬ的自发性肺转移抑制率分别为７３．５％，７９．９％；实验２的结果与实验１相似，且ＴＩＬ治疗组的自发性肺转移抑制作用强于ＬＡＫ细胞治疗组３倍。     

白细胞介素－15的研究进展（综述）

白细胞介素－１５的研究进展（综述）沈永泉综述何维巴德年审阅（中国医学科学院，中国协和医科大学基础医学研究所，北京１００００５）在免疫细胞的发育成熟及免疫应答过程中，众多的细胞因子以协同或拮抗的方式相互影响和制约，形成一个网络，以网络作用方式进行调控。...     

白细胞介素-15及其受体

白细胞介素-15(IL-15)是一种新发现的细胞因子,其生物学性质与IL-2相似。IL-15的受体由IL-15Rα、IL-2Rβ、IL-2Rγ组成,其中IL-2Rγ是参与IL-15信号传递过程的必要成分。IL-15和IL-2的体内表达及受体分布存在差异预示着IL-15在体内具有独特的生物学作用。