山核桃叶总黄酮及其单体化合物对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的抑制作用

目的：研究山核桃叶总黄酮及其4种单体化合物球松素查尔酮、松属素、白杨素、汉黄芩素对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMC）增殖和迁移的作用。方法：组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC。调细胞密度2.0×10⁴/mL,血清饥饿处理后用100 nmol·L^-1 AngⅡ诱导增殖12 h。调细胞密度6.0×10⁴/mL,用100 nmol·L^-1 AngⅡ诱导迁移12 h。均给予12.5~62.5 mg·L^-1总黄酮,10~50 mg·L^-1球松素查尔酮、松属素、白杨素、汉黄芩素作用12 h。用细胞计数法检测VSMC增殖,伤口愈合实验检测VSMC迁移。结果：12.5 mg·L^-1总黄酮可剂量依赖性地显著抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖,50 mg·L^-1球松素查尔酮、白杨素和汉黄芩素对AngⅡ诱导的VSMC增殖有微弱抑制。12.5 mg·L^-1总黄酮,10 mg·L^-1球松素查尔酮、松属素、白杨素、汉黄芩素均能剂量依赖性地显著抑制AngⅡ诱导的VSMC迁移。其中总黄酮、白杨素、汉黄芩素的效果优于松属素和球松素查尔酮。结论：山核桃叶总黄酮能有效抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖和迁移;白杨素、汉黄芩素、松属素和球松素查尔酮对AngⅡ诱导的VSMC迁移的抑制作用强于对其诱导的VSMC增殖的抑制作用。     

小豆蔻明诱导K562细胞凋亡及其相关凋亡蛋白的表达

目的：探讨小豆蔻明诱导K562细胞凋亡与PTEN、p-Akt、NF-κB、Bcl-2等抑凋亡蛋白及促凋亡蛋白表达量的关系。方法①普通光镜观察小豆蔻明作用K562细胞48h后的细胞形态学变化。②采用MTT法检测小豆蔻明作用K562细胞48h后的凋亡情况,计算IC50。③应用流式细胞仪检测小豆蔻明作用K562细胞48h后的细胞凋亡率。④采用RT-PCR技术检测小豆蔻明作用K562细胞48h后Bcl-2、Bax的mRNA表达量。⑤采用Westernblot技术检测小豆蔻明作用K562细胞48h后PTEN、p-Akt、NF-κB、Bcl-2的蛋白表达量。结果小豆蔻明作用K562细胞48h后,形态学出现明显凋亡现象。MTT提示K562细胞增殖抑制明显且呈量效和时效关系。早期凋亡率与空白组比有显著增加（P＜0.05）,呈剂量依赖关系。Bcl-2mRNA的表达较空白组明显下降（P＜0.05）,BaxmRNA的表达较空白组明显升高（P＜0.05）,呈现浓度依赖性。PTEN蛋白表达量随小豆蔻明的浓度增加明显增加,而p-Akt、NF-κB、Bcl-2蛋白表达量则减少。结论小豆蔻明通过增加PTEN蛋白的表达量,同时下调p-Akt、NF-κB、Bcl-2蛋白的表达量促进K562细胞的凋亡,且呈剂量依赖性。     

山核桃叶总黄酮诱导人多发性骨髓瘤U266细胞株凋亡作用研究

目的研究山核桃叶总黄酮诱导人多发性骨髓瘤（U266）细胞株凋亡的作用及其作用机制。方法体外培养U266细胞,CCK-8比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术定量分析细胞凋亡程度,Western Blot分析不同浓度总黄酮对U266细胞蛋白激酶B（Akt）和p-Akt蛋白表达的影响。结果山核桃叶总黄酮以浓度依赖性方式显著诱导U266细胞株凋亡并抑制p-Akt蛋白的表达。结论山核桃叶总黄酮诱导U266细胞凋亡的作用与其抑制Akt磷酸化相关。