1,25(OH)2D3对miR-130b转染的高糖条件下HMC细胞TGF-β1/Smad3及Col-Ⅳ表达的影响

目的观察高糖环境下1,25（OH）2D3对miR-130b转染肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad3、Col-IV表达水平的变化,探索1,25（OH）2D3是否可通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程。方法 HMC细胞传代培养,miR-130b mimics及miR-130b inhibitor经LipofectamineTM 2000转染肾小球系膜细胞,依据分组加入1,25（OH）2D3 1.0×10-8 mol/L,37℃、5%CO2饱和湿度条件下继续培养48 h,共分为6组:（1）空白对照组;（2）细胞+无水乙醇组（A组）;（3）细胞+miR-130b mimics+无水乙醇组（B组）;（4）细胞+miR-130b mimics+1,25（OH）2D3组（C组）;（5）细胞+miR-130b inhibitor+无水乙醇组（D组）;（6）细胞+miR-130b inhibitor+1,25（OH）2D3组（E组）。以实时荧光定量PCR检测细胞miR-130b及TGF-β1、Smad3、Col-IVmRNA的表达水平,以Western blot方法检测细胞TGF-β1、Smad3、Col-IV蛋白的表达水平。采用多组间比较的单因素方差分析及组内两两比较采用LSD、Dunnett’s T3法比较各组数据。结果空白对照组与A组细胞miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平,差异无统计学意义（P>0.05）,与A组相比,B组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显升高（P<0.05）,D组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低（P<0.05）。经1,25（OH）2D3治疗发现,与B组相比,C组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低（P<0.05）,与D组相比,E组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低（P<0.05）。结论 1,25（OH）2D3可降低miR-130b转染肾小球系膜细胞miR-130b及纤维化相关因子TGF-β1、Smad3、Col-IV的表达水平,1,25（OH）2D3可能通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程。