芪三酚与人乳腺癌MDC1基因关系的研究

目的探讨芪三酚（Res）对人乳腺癌MDA—MB-231细胞增殖抑制的相关效应及其与MDCl基因的关系。方法以人乳腺癌MDA—MB-231细胞株为研究对象,采用MTS方法测定细胞增殖,应用吖啶橙荧光染色观察Res对乳腺癌MDA—MB-231细胞的影响,用RT-PCR与免疫印迹方法测定MDCl基因与蛋白表达水平,用小RNA干扰MDCl基因后,用流式细胞仪检测细胞的凋亡并观察其对Res的敏感性影响。结果40μmol／L以上的Res可显著抑制乳腺癌MDA—MB-231细胞的增殖（P〈0．05）,给予0、60、120μmol／LRes能明显降低MDCl基因和蛋白的表达（P〈0．05）。用小RNA干扰MDC1基因后,流式细胞术分析显示,实验组（MDCl．siRNA）的细胞凋亡率[（45．13±6．2）％]较阴性对照组[（24．34±2．6）％]和未处理组[（17．69±4．9）％]明显上升（P〈0．05）,MTS结果显示MDCl基因干扰后细胞对Res的敏感性增加。结论40μmol／L以上的Res可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖,Res可以有效降低MDC基因和蛋白的表达并促进细胞的凋亡。用小RNA干扰MDCl基因（MDCl-siRNA）后,MDA-MB-231细胞对Res的敏感性增加。     

露蜂房蛋白抑制大鼠支气管平滑肌细胞增殖的可能机制

目的 观察露蜂房蛋白[NVP(1)]对大鼠支气管平滑肌细胞增殖的抑制作用及其可能机制。方法 用原代细胞培养，MTT法, 流式细胞术和免疫印迹法（Western- blotting）检测细胞增殖。结果 6.4×10-3g/L的NVP(1)明显抑制支气管平滑肌细胞增殖，并且阻断在细胞周期的G1期(对照组G1期为64.6％，NVP(1)处理组为90.5％) 。NVP(1)能增强细胞周期蛋白激酶抑制剂（p21）蛋白的表达，降低细胞周期蛋白激酶（cdk2）蛋白的表达。结论NVP(1)阻断支气管平滑肌细胞增殖于细胞周期的G1期。     

小鼠十二指肠运动中NO对NA作用的影响及机制

目的观察去甲肾上腺素(noradrenaline ,NA)对离体小鼠十二指肠肌条收缩幅度及一氧化氮(nitricoxide ,NO)对NA作用的影响;探讨NO和NA之间的关系及影响机制。方法用器官浴槽孵育离体小鼠十二指肠肌条,以肌张力收缩幅度抑制比为指标观察NA对肌条收缩幅度及NO对NA作用的影响。结果NA对肌条的收缩幅度有明显的抑制作用,在浓度1.2×10 -4～1.2×10 -8mol/L范围内,呈剂量-效应关系,其中1.2×10 -8mol/L组与对照组之间无显著性差异(P >0 .0 5 )。L Arg对肌条的收缩幅度有明显的抑制作用,在浓度2×10 -2 ～2×10 -6mol/L范围内,呈剂量-效应关系。除2×10 -6mol/L组外,其余各浓度的L Arg与对照组均有显著性差异(P <0 .0 0 1)。用无反应剂量2×10 -6和2×10 -3 mol/L的L Arg孵育标本后加入NA ,浓度为1.2×10 -5,1.2×10 -6,1.2×10 -7,1.2×10 -8mol/L的NA对肌条收缩幅度的抑制作用明显增强,与单独NA组的作用相比差异有显著性(P <0 .0 0 1) ;而1.2×10 -4mol/LNA组与单独NA组的作用相比差异无显著性(P >0 .0 5 )。分别用一氧化氮合酶(NOS)的抑制剂L NNA、可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)抑制剂ODQ、α肾上腺素能受体阻断剂酚妥拉明(phentolamine)均使NA对肌条收缩幅度抑制效应明显减弱,与对照组比较有显著性差异(P <0 .0 0     

细胞原纤毛与骨相关疾病的研究进展

纤毛广泛存在于体内的细胞表面,其中“9+0”型纤毛又被称为原纤毛。纤毛在机体发育和调节过程中必不可少,与许多疾病的发病有关,尤其是骨方面。本文就纤毛和原纤毛的结构、调控、作用,及原纤毛在骨发育、骨相关细胞中作用和原纤毛相关骨疾病进行综述。      

生物化学与分子生物学教学内容的优化整合

通过对国内外多个著名医学院校的生物化学与分子生物学课程设置和教学内容进行调研与分析,在此基础上对生物化学与分子生物学的教学内容进行了优化整合,以期为推动该课程的进一步教学改革和总体课程体系改革奠定坚实的基础.     

IFT20蛋白在不同肿瘤组织中表达的研究

  目的  探讨IFT20（Intraflagellar Transport,IFT）蛋白在人卵巢癌、肺癌、胰腺癌、小肠癌、前列腺癌、骨癌、胃癌和乳腺癌癌组织和癌旁组织的表达分布情况,为人类肿瘤的诊断和治疗寻找新的靶点。  方法  采用免疫组织化学方法,研究IFT20蛋白在人的八种癌组织和癌旁组织的表达。  结果  结果发现,IFT20蛋白在卵巢癌组织中大量表达,在卵巢癌癌旁组织低量表达。IFT20蛋白在小肠癌,胃癌和乳腺癌组织中中量表达,在小肠癌,胃癌和乳腺癌癌旁组织中低量表达。IFT20蛋白在胰腺癌,骨癌,肺癌癌组织中低量表达,在胰腺癌、骨癌、肺癌癌旁组织中几乎不表达。IFT20蛋白在前列腺癌组织和癌旁组织中均未见表达。  结论  实验结果证实,IFT20蛋白可能经过多种途径直接或间接调节卵巢癌、肺癌、胰腺癌、小肠癌、骨癌、胃癌和乳腺癌的发生,发展过程,并且IFT20可能是卵巢癌、肺癌、胰腺癌、小肠癌、骨癌、胃癌和乳腺癌肿瘤药物治疗的潜在靶点。      

低电导钙激活的钾通道(rSK3,rIK)抑制露蜂房蛋白1(NVP(1))抗细胞增殖作用

目的研究rSK3,rIK通道在细胞增殖中的作用。方法用凝胶层析和液相色谱从露蜂房水提物中分离一种纯蛋白,并检测此蛋白的抗细胞增殖作用;转染;Southern blot检测rSK3,rIK基因;细胞计数检测SK通道在细胞增殖中的作用。结果从露蜂房水提物中分离一种纯蛋白,分子量为6.6 ku,命名为NVP(1),能抑制Hek-293细胞增殖。Southern blot检测转基因rSK3,rIK成功。转rSK3,rIK基因后,能消减NVP(1)抗细胞增殖的作用。结论rSK3,rIK促进细胞增殖。     

C反应蛋白激活原纤毛抑制颅骨成骨细胞的增殖和分化

目的研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对原代培养SD大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖及成骨分化的影响。方法取SD乳鼠颅骨组织用胰蛋白酶和胶原蛋白酶Ⅰ消化得到原代ROB,随后将ROB用α-MEM培养基培养,传代3次后用于后续实验。在对照组和5 mg/mL CRP的处理组中,成骨分化培养基诱导3 d进行免疫荧光检测两组Ki-67和acetylated-α-tubulin和γ-tubulin表达情况;同时,蛋白质印迹分析osteopontin(OPN)、alkaline phosphatase(ALP)、acetylated-α-tubulin和γ-tubulin的表达;成骨分化培养基诱导21 d茜素红染色检测成骨基质矿化结节量。结果免疫荧光显示,5 mg/mL CRP抑制成骨细胞增殖,与对照组差异有统计学意义(P0.001);蛋白质免疫印迹和茜素红染色显示,处理组OPN和ALP表达降低(P0.01),矿化结节生成数量减少(P0.001),与对照组比较差异均有统计学意义;免疫荧光结果显示,细胞原纤毛长度增加(P0.001),免疫印迹结果显示acetylated-α-tubulin和γ-tubulin蛋白的表达均升高(P0.001)。结论5 mg/mL CRP显著抑制ROB增殖与成骨分化矿化并且显著激活细胞原纤毛。CRP为炎症因子典型代表,这些数据表明炎症因子激活细胞原纤毛发挥其抑制成骨细胞的增殖与分化作用,提示抑制原纤毛或阻断炎症因子的释放可以治疗炎症引起的骨丢失疾病。     

滑膜软骨瘤病研究进展

滑膜软骨瘤（Synovial chondromatosis,SC）又称滑膜软骨化生（synovial chodrometaplasia）,是一种发病机制不明的关节滑膜或滑膜囊、腱鞘发生异常增殖的疾病,与软骨、成骨和血管形成异常有关。其主要发生在膝关节,多在关节内形成软骨结节,临床上多使用MRI等进行诊断,SC多手术治疗,其在非手术治疗方面进展不大。本文就其发病机制、临床表现、诊断及鉴别诊断,以及治疗进行综述。