点突变对ColE2质粒复制起始部位生物活性的影响

为了研究ＣｏｌＥ２质粒复制起始部位中的一些位点和其生物活性的关系，用人工合成寡核苷酸定点引入点突变的方法，对ＣｏｌＥ２质粒复制起始部位的１个位点引入３种突变，并测定了突变的ＣｌｏＥ２质粒重制起始部位的ＲｅＰ蛋白结合和复制活性。     

人直肠及其癌组织DNA的RAPD多态性分析

目的：研究细胞癌变后DNA结构的改变与寻找与癌变有关的DNA片段，方法：采用AP－PCR方法扩增直肠癌及其癌旁和正常组织DNA，结果：引物E1（5′CGGCCCCTGT3′）对直肠癌，癌旁组织和正常直肠组织的DNA扩增产物的电泳图谱表现出多态性，而且分别得到直肠癌组织特异的DNA片段K851和正常直肠组织特异的DNA片段K1072，K776。结论：直肠细胞癌变后DNA结构在引物E1序列处发生了改变，DNA片段K851，K1072和K776可能与细胞癌变有关。     

miR-195重组腺病毒表达载体构建及在细胞中的表达

目的:利用AdEasy系统构建miR-195的腺病毒表达载体,为研究miR-195的功能提供条件.方法:将miRNA-195前体序列从已构建的pcDNA-miR-195载体中克隆进穿梭载体pAdTrack-CMV,通过与骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中高效同源重组,获得完整的重组腺病毒质粒.利用HEK293细胞包装并扩增重组腺病毒Ad-195.Ad-195感染肺癌细胞A549后,利用miRNA的定量RT-PCR技术检测Ad-195在细胞中表达miR-195情况.随后荧光素酶报告基因实验证明,Ad-195表达的miR-195能够作用于BCL2基因上预测的miR-195靶位点.结果:实时定量PCR检测显示,Ad-195感染肺癌细胞A549后,miR-195表达水平有显著的上调.结论:miR-195的腺病毒表达载体构建成功,能够用于在细胞内过表达具有生物学功能的miR-195.     

点突变对ColE2质粒复制起始部位生物活性的影响

为了研究ＣｏｌＥ２质粒复制起始部位中的一些位点和其生物活性的关系，用人工合成寡核苷酸定点引入点突变的方法，对ＣｏｌＥ２质粒复制起始部位的１个位点引入３种点突变，并测定了突变的ＣｏｌＥ２质粒复制起始部位的Ｒｅｐ蛋白结合和复制活性。结果表明，该位点的突变导致ＣｏｌＥ２质粒复制起始部位的生物活性明显下降。说明该位点对ＣｏｌＥ２质粒复制起始部位和Ｒｅｐ蛋白的结合及复制起始都起一定作用。     

生物化学课试用英语教学的探讨

随着科学技术的迅速发展，国际交流日益频繁，这对高校培养能满足现代化需要的科技人才提出了越来越高的要求。要求他们不仅要学好专业知识，而且还要精通英语。然而，现在学生的英语普遍存在着听、说、写能力低，不能熟练地用英语进行交流的现象。这和他们缺少使用英语进行交流的机会密切相关。虽然专业课的英语教学已在国内一些重点高等院校推行，但对专业课的外语教学效果如何，会不会影响专业知识的学习，以及如何进行这一改革，存在着不同的看法。为了积累这方面的经验，我们在生物化学的教学过程中使用英语进行教学，对教学效果进行了…     

重组人角质细胞生长因子的体内外作用研究

 目的研究重组人角质细胞生长因子(K102)在体内和体外的生物活性。方法运用3T3BALB/c细胞和大鼠CCl₄肝纤维化模型对K102在体内体外的生物活性进行测定。结果体外生物活性检测:K102明显抑制成纤维细胞的生长,bFGF对K102有一定拮抗作用,且具有剂量依赖性;体内生物活性检测:治疗给药组血清ALT,AST和肝组织羟脯氨酸含量较CCl₄模型组明显改善。病理组织学检查见K102大、小剂量组肝细胞脂肪变性和水样变性比较轻,汇管区纤维组织仅有轻微增生。结论K102的抗肝纤维化作用可能是通过促进肝细胞增生、合成代谢,以及抑制成纤维细胞生长、减少纤维组织增生而产生的。     

结核分枝杆菌Ag85A在毕赤酵母中的表达、纯化及酶联免疫斑点试验研究

目的利用毕赤酵母表达和纯化结核分枝杆菌AgS5A蛋白,以期得到高效刺激T淋巴记忆细胞产生1．干扰素的特异性抗原。方法用PCR扩增得到Ag85a基因,构建出重组质粒pPic9k085a,通过电转化进入毕赤酵母,经遗传霉素G418抗性筛选、硫酸铵沉淀浓缩及离子交换层析纯化得到目的蛋白。最后以大肠杆菌和毕赤酵母表达的A邸5A分别为抗原刺激物进行酶联免疫斑点（Elispot）试验,分析其刺激BCG免疫小鼠T淋巴细胞产生Υ-干扰素（IFN-Υ）的能力。结果在毕赤酵母中成功克隆并稳定表达了Ag85A蛋白,Elispot检测结果表明,毕赤酵母比大肠杆菌产生的Ag85A蛋白,对小鼠T淋巴细胞的刺激效果更加明显（P〈0．05）,能产生更多的免疫斑点。结论毕赤酵母表达的Ag85A蛋白可以更高效的刺激T淋巴细胞,可用于检测结核杆菌感染诱导的细胞免疫应答。     

3个八肽的胰岛素受体结合和体内生物活性

用固相方法合成了与胰岛素有关的3个八肽。在高浓度时，H－Phe－Phe－Gly－Glu－Arg－Gly－Phe－Phe－OH和H－Val－Gly－Gly－Glu－Arg－Gly－Phe－Phe－OH具有明显的胰岛素受体结合活力；而H－Val－Cys（SSO3-）－Gly－Glu－Arg－Gly－Phe－Phe－OH则无此活力，这表明前2个八肽在空间构象上与胰岛素受体结合部位有部分相似．然而．它们都没有明显的降血糖作用。