冬虫夏草真伪鉴别方法研究进展

冬虫夏草为传统的名贵中药材,近年来由于疯狂的采挖使得其资源急剧减少,濒临灭绝。目前市场上冬虫夏草价格堪比黄金,掺伪现象严重。本文从性状鉴别、显微鉴别、分子生物学鉴别和化学鉴别（理化鉴别、光谱鉴别、色谱鉴别和色谱-光谱联用鉴别）四个方面,对近10年来国内外冬虫夏草真伪鉴别方法研究文献进行了概括和总结,为市场上冬虫夏草的真伪鉴别提供科学参考依据。     

灭菌注射用水pH升高原因之初步探讨

生产灭菌注射用水的厂家都会碰到相同的一个问题，就是生产出来的灭菌注射用水的pH总是偏高，《中国药典》规定的灭菌注射用水pH的合格范围是5．0～7．0，而实际的检测结果往往是接近上限。一般情况下新鲜制出来的注射用水pH不会超过6．0，为了寻找灭菌注射用水pH升高的原因，作者设计了几个实验，在灭菌注射用水生产过程中，分别在不同阶段取样，     

灭菌注射用水pH升高原因之初步探讨

目的查找造成灭菌注射用水pH升高的原因,寻求可能的解决方法。方法在灭菌注射用水生产过程中,分别在不同阶段取样,或以不同的工艺条件和不同生产厂家的安瓿来考察,并根据《中国药典》(2005年版)二部的规定对灭菌注射用水的pH值进行检测。结果高压灭菌时的高温使安瓿玻璃中的弱碱性成分分解释放到注射用水中是造成灭菌注射用水pH升高的主要原因。结论将安瓿经过注水后再煮沸的预处理方法能较好的解决灭菌注射用水的pH值升高问题。     

医学媒介生物微量组织直接扩增DNA条形码序列方法的研究

目的 为保证DNA条形码序列模板DNA来源的单一性,和最大程度减少凭证标本的形态破坏,建立一种从医学媒介生物微量组织中免提取,直接扩增DNA条形码序列的方法。方法 以螨、蚤、蜱单个个体以及小至蝇类后足1/5跗节的组织块为材料,通过优化裂解液浓度、裂解液和缓冲液配比,优化反应体系和反应条件,用KOD FX DNA聚合酶进行DNA条形码序列的直接扩增,反应产物测序,与NCBI基因库中的序列进行比较以验证其是否被污染。结果 裂解液优化为NaOH 50 mmol/L;裂解液和缓冲液配比优化为9∶1;反应体积优化为每50μl反应体系中2×KOD FX DNA聚合酶buffer（含Mg2 ＋）25μl、2mmol/LdNTP10μl、KOD FX DNA聚合酶（1U/μl）1μl、正向引物LCO1490（20μmol/L）、反向引物HCO2198（20μmol/L）各1μl;反应条件优化为：95℃3 min;98℃10 s,50℃30 s,68℃1 min,35个循环;68℃7 min。测序结果显示无污染,均为有效序列。结论 该方法操作简单而且省去了DNA提取的步骤,节约了时间和费用,适合螨、蚤、蜱单个个体以及小至蝇类后足1/5跗节的组织块DNA条形码序列的直接扩增。     

NaCl胁迫对披针叶黄华愈伤组织生理特性的影响

目的 研究NaCl胁迫对披针叶黄华Thermopsis laceolata愈伤组织生长及生理特性的影响,拟从细胞水平上探讨其适应盐环境的生理机制。方法 在附加0.2%～1.2% NaCl的继代培养基上对愈伤组织进行胁迫培养,测定其中的可溶性糖、可溶性蛋白质、脯氨酸、丙二醛（MDA）量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性,并对其进行分析。结果 当NaCl小于或等于0.8%时,随盐离子质量分数的增加,愈伤组织生长量下降,但与对照均无显著差异,而当NaCl大于0.8%时,愈伤组织生长极为缓慢;可溶性糖和脯氨酸量随NaCl质量分数的升高总体呈先上升后下降趋势,但均高于对照;可溶性蛋白质、SOD、CAT和POD酶活性随NaCl质量分数升高呈先上升后下降趋势;丙二醛量在0.8% NaCl及以下时积累缓慢,而NaCl高于0.8%时急剧增加。结论 披针叶黄华愈伤组织具有适应一定质量分数（≤0.8% NaCl）盐渍生境的能力,其在受到盐胁迫时可以通过增加可溶性渗透调节物质如脯氨酸、可溶性糖类以降低渗透势及增强抗氧化酶活性来缓解盐伤害。     

冬虫夏草纯粉制剂中8种药用辅料添加的鉴别研究

目的 建立鉴别冬虫夏草纯粉制剂中可能添加的8种药用辅料的方法。方法 采用液相色谱、溶解度差异、显色反应等理化鉴别方法,设计合理的鉴别流程,对可能添加的8种药用辅料进行鉴别。结果 8种药用辅料的含量为1%时可进行有效的鉴别;对8批冬虫夏草纯粉制剂盲样进行检测,其综合识别正确率为98%。结论 该方法操作简便、结果准确可靠,可用于冬虫夏草纯粉制剂中8种药用辅料的鉴别,有益于冬虫夏草纯粉制剂质量控制水平的提高。     

灭菌注射用水pH升高原因之初步探讨

OBJECTIVE The reason for the rising pH value of sterile water for injection was investigated and the capable solving method was found.METHODS In the production process,the pH value of sterile water for injection was detected according to Chinese Pharmacop     

基质稀释同位素质谱法测定微量富氘生物样品δD值

目的建立一种分析检测方法——基质稀释同位素质谱法,并测定微量富氘生物样品的6I）值。方法通过优化实验条件,如基质的选取、氧化燃烧的温度及时间、样品和氧化剂吸附水的脱除及氧化剂的用量等,建立基质稀释同位素质谱法,并用该法测定基质牛血清白蛋白（BSA）及两组微量富氘生物样品（A和B）的δDVSMOW值。结果本研究成功地构建了基质稀释同位素质谱法,最终选取BSA为基质,用量为5mg;氧化剂用量为CuO（500nag）,V2O5（50mg）;100℃条件下脱吸附水20min;燃烧氧化温度为850℃,反应时间为30min。基质稀释同位素质谱法成功地测定了基质BSA及用A、B两种富氘生物样品制备的系列样本的δDVSMOW值。δDVSMOW值变化随生物样品A和B的加入量呈现良好的线性关系（R2〉0．99）,两条直线的截距分别为-75和-74,与基质BSA的测定结果相吻合。结论基质稀释同位素质谱法能够用于测定微量富氘生物样品的δDVSMOW值。     

基于HPLC-MS的冬虫夏草蛋白特征图谱快速分析

目的 采用高效液相色谱-质谱联用技术建立冬虫夏草蛋白特征图谱的快速分析方法。方法 采用Sepax Bio-C₄色谱柱(4.6 mm×150 mm, 3μm),以0.1%甲酸(A)-0.1%甲酸/乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.6 mL·min^-1,柱温30℃,质谱检测器。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)对冬虫夏草色谱图进行处理,并计算所有批次的相似度。结果 建立了冬虫夏草蛋白对照特征图谱,标示出了4个共有峰,12批冬虫夏草与对照特征图谱相似度均大于0.90,22批冬虫夏草混淆品的相似度均<0.10。结论 本研究建立的方法可有效鉴别冬虫夏草及其混淆品,为冬虫夏草的真伪鉴别技术的提升提供了技术支持。