Shh协同骨髓间充质干细胞对造血干细胞增殖的影响

目的:探讨Shh协同骨髓间充质干细胞在体外非接触共培养中对造血干细胞增殖的影响及其机制。方法:采用全骨髓贴壁培养法体外培养间充质干细胞,采用miniMACS磁珠分选仪分选人骨髓CD34+细胞,流式细胞术鉴定两种细胞纯度;将CD34+细胞与MSC分别种至Transwell上下室进行非接触共培养,并添加外源性shh蛋白进行干预。收集非接触共培养d 7的样本检测HSC及MSC细胞数量、RNA总量、HSC的ki67的mRNA表达量,以了解HSC增殖情况;测量HSC细胞Tie-2 mRNA表达量和MSC的VEGF、Ang-1 mRNA表达量,以了解细胞因子的表达情况。结果:非接触共培养d 7,共培养组2种细胞数量、RNA总量以及ki67、Tie-2、VEGF、Ang-1相对表达量增加并呈以下趋势:MSC+HSC组和shh+HSC组均高于HSC组(P 0.05),MSC+shh+HSC组高于MSC+HSC组(P 0.05)。结论:shh可协同MSC体外非接触共培养促进HSC增殖,其机制可能与血管生成因子相关。     

通过社会实践促进医学生临床能力培养的初步研究

【目的】 临床能力是医务工作者综合能力的重要体现,但目前医学院校实践性教学资源的普遍缺乏影响了医学生临床能力的培养。自上世纪末高校招生规模不断膨胀以来,许多二本类医学院的普教招生规模增长了数倍甚至10倍,医学生平均的实践性教学资源的匮乏不仅影响了医学教育和毕业生的质量,而且严重影响了医学生执业医师考试的通过率和从业就业的竞争实力。本项目研究了以社会实践活动去补充医学院校的实践性教学资源不足并促进医学生临床能力培养的可行性。 【方法】 首先,根据全球及我国本科医学教育人才培养的相关标准自行设计调查问卷及访谈提纲。其次,采取整群随机抽样的方法对本校五个年级的1 000名在校本科医学生进行问卷调查;同时采取访谈的方式对社会实践活动的组织者、参与者、受益人及医学专业课教师进行了访谈。第三,同参与过省级大学生急救知识科普项目的志愿者进行了专题研讨活动。 【结果】 回收有效答卷986份(有效回收率98.6%),访谈记录15份和专题研讨活动资料1套。将以上资料定量、定性分析后发现:第一,71.90%的医学生认为接触病人的机会少,限制了自己临床能力的培养;65.52%的医学生认为学校未能提供足够的实践机会和场所,以保障学生临床能力的培养。第二,80.34%的医学生认为可以通过社会实践促进自己临床能力的培养,64.13%的医学生希望参加同所学专业相关的医疗服务类社会实践活动。第三,100%的参与过省级大学生急救知识科普项目实践的医学生志愿者表示参与该活动后自己的临床能力有所提升。 【结论】 开展同临床医学专业知识相关的社会实践活动符合绝大多数医学生的愿望,这类社会实践活动对医学生临床能力的培养及促进作用得到了活动参与者、教师的高度认可,政府、社会和学校应该对开展促进医学生临床能力和综合素质培养的医学专业相关的健康教育类社会实践活动提供全方位、多角度的支持。     

CXCL12、CXCR4、MVD在多发性骨髓瘤骨髓微龛中表达及意义

目的 探讨趋化因子配体12(CXCL12)、趋化因子受体4(CXCR4)、微血管密度(MVD)在多发性骨髓瘤(MM)骨髓微龛中的表达、分布、意义及其相互关系.方法 收集MM患者63例作为试验组,选择健康人42例作为对照组.采用免疫组织化学方法检测两组骨髓活检片中CXCL12、CXCR4、MVD表达及分布.结果 试验组骨髓活检组织中CXCL12、CXCR4、MVD表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),三者在骨髓中表达与性别、年龄、免疫球蛋白分型、轻链分类表达差异无统计学意义(P＞0.05);CXCL12表达与CXCR4、MVD表达均呈正相关(P＜0.05).结论 MM中CXCL12、CXCR4、MVD表达可能与疾病发生相关;CXCL12/CXCR4生物轴促进MM骨髓微龛血管新生.     

在不同培养条件下微血管内皮细胞对骨髓造血干细胞增殖影响的比较

目的:探讨在体外不同培养条件下微血管内皮细胞(microvascular endothelial cells,MEC)对骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)增殖的作用。方法:将来源于C57BL/6小鼠肺组织的MEC与来源于GFP小鼠骨髓的HSC用于非接触共培养、2 D接触共培养,并设置对照组HSC单独培养及MEC单独培养。采用细胞计数和CCK-8实验比较各组悬浮细胞在1、3、5和7 d的增殖情况。结果:MEC呈贴壁生长。HSC共培养组及单独培养组细胞在体外培养过程中悬浮细胞计数均有所增加; 2 D接触培养组与非接触共培养组中悬浮细胞比对照组中悬浮细胞更早进入对数生长期; 2 D接触培养组悬浮细胞增殖多于非接触共培养组及HSC单独培养组(P 0. 05);非接触共培养组悬浮细胞增殖多于HSC单独培养组(P 0. 05)。结论:体外培养HSC能使HSC增殖;M EC能促进HSC增殖; M EC还可以通过与HSC非接触共培养促进HSC增殖,这一效应与M EC分泌的细胞因子促HSC增殖作用有关; MEC与HSC直接接触培养对HSC的增殖作用比非接触共培养更强,这一效应与细胞-细胞接触对HSC增殖的调控有关。     

微血管内皮细胞对小鼠造血干细胞增殖的影响

目的 探索微血管内皮细胞(MECs)对造血干细胞(HSCs)增殖的影响,以建立一种促进HSCs增殖的方法.方法 选取C57BL/6小鼠和C57系GFP小鼠,处死获取肺叶组织.(1)MECs的分离、培养和鉴定:肺组织经Ⅰ型胶原酶消化获得的细胞在含20％胎牛血清(FBS)、2 ng/mL血管内皮生长因子(VEGF)、100U/mL肝素、0.1 mg/mL青霉素及链霉素的DMEM-F12培养基培养,第8天进行CD31荧光鉴定,“铺路石”细胞用于共培养并以流式细胞仪(FCM)检测八因子相关抗原(vWF)、CD31、CD34、CD45表达率.(2)GFP小鼠HSCs的分离、鉴定:密度梯度离心法和MACs-CD117+磁珠法分选HSCs,FCM检测纯度及CD117 CD34共表达率.(3)MECs促HSCs增殖:设立对照组(HSCs)、共培养组(MECs+ HSCs),培养7d,观察HSCs生长情况并计数、计算扩增倍数;第7天,收集共培养组HSCs,FCM检测CD117 CD34共表达率.结果 (1)肺MECs:第3天形成细胞簇,第6天成“血管样”改变,第14天为“铺路石”外观.培养第8天CD31阳性率为54.5％.vWF、CD31、CD34、CD45阳性率分别为81.39％、45.80％、57.48％、0.17％.(2)平均每只小鼠骨髓经MACs分选后可获约4.7×105个CD117+细胞,纯度为99.51％.(3)随着培养时间的延长,两组HSCs计数均有所增加,但共培养组HSCs扩增倍数大于对照组(P＜0.05).第1～7天共培养组与对照组细胞数相对变化倍数分别为1.21、1.35、1.50、1.72、1.71、1.75和1.78(P＜0.05),第4天变化最明显.共培养7d后HSCs的CD117 CD34共表达率为92.06％.结论 MECs对HSCs增殖有促进作用,共培养第4天促进作用最明显,并且MECs可以促进HSCs CD34的表达.     

解剖型顶棒辅助后路C2椎弓根钉内固定治疗寰枢椎不稳对咽后壁软组织的影响

目的 分析解剖型顶棒辅助后路C2椎弓根钉内固定治疗寰枢椎不稳对咽后壁软组织的影响.方法 回顾性分析自2015-08-2017-12采用解剖型顶棒辅助后路C2椎弓根钉内固定治疗的31例寰枢椎不稳,记录随访期间咽后壁黏膜损伤与软组织增厚情况,记录黏膜损伤者与非黏膜损伤者、软组织增厚者与非软组织增厚者置入导针所需的压力与时间...     

钩钢板或空心螺钉联合锚钉治疗劈裂型肱骨大结节骨折

目的探讨钩钢板或空心螺钉联合锚钉治疗劈裂型肱骨大结节骨折的疗效。方法回顾性分析我院2016年2月至2018年10月收治的劈裂型肱骨大结节骨折28例患者资料,男17例,女11例;年龄22~68岁,平均(45.2±16.4)岁。其中,18例患者采用钩钢板联合锚钉固定,10例患者采用空心螺钉联合锚钉固定。采用美国肩肘外科协会(American shoulder and elbow surgeons,ASES)评分、视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS)、Constant-Murley评分评价疗效。结果28例患者均获随访,随访时间8~23个月,平均(14.3±6.2)个月,骨折愈合时间平均(3.2±0.5)个月,术后无一例患者出现骨折移位或内固定失败。钩钢板组末次随访时VAS评分为(1.1±0.7)分,ASES评分为(87±5)分,Constant-Murley评分为(89±5)分;螺钉组末次随访时VAS评分为(1.3±1.0)分,ASES评分为(89±9)分,Constant-Murley评分为(88±7)分。两组患者术后疼痛及肩关节功能评分与术前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于劈裂型肱骨大结节骨折,空心螺钉或钩钢板联合锚钉固定能为该骨折类型提供有效的固定强度,疗效满意。