尼古丁对口腔癌前病变细胞中Prx1表达及MAPK信号通路活化的影响

目的 通过检测尼古丁对口腔癌前变细胞株DOK细胞中抗氧化蛋白Prx1表达及MAPK三种激酶JNK、ERK、p38的磷酸化水平的影响,探讨尼古丁对口腔癌前病变细胞凋亡的作用机制,以期为口腔癌前病变的防治提供科学依据及新的生物靶点.方法 1μmol/L尼古丁长期处理口腔癌前病变细胞DOK 7天,采用荧光定量PCR和Western Blot的方法,检测尼古丁组与对照组中Prx1 mRNA与蛋白的表达及磷酸化JNK、ERK、p38蛋白(p-JNK、p-ERK、p-p38)的表达情况.结果 倒置显微镜下观察,1μmol/L尼古丁长期处理口腔癌前变细胞株DOK细胞7天后,细胞形态未见明显变化.与对照组相比,尼古丁组DOK细胞中Prx1 mRNA及蛋白表达水平均显著增高(P=0.011,P=0.044).p-p38(P=0.030)和p-JNK(P =0.017)蛋白表达与对照组相比降低,p-ERK的蛋白表达增高(P=0.035),差异有统计学意义.结论 Prx1、JNK、ERK及p38可能在烟草相关口腔癌前病变细胞凋亡中发挥重要作用.     

尼古丁对口腔鳞状细胞癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究尼古丁在口腔鳞状细胞癌细胞增殖和诱导凋亡中的作用,初步探讨尼古丁对口腔鳞状细胞癌发生的作用机制.方法 采用甲基噻唑基四唑法、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素及碘化丙啶双染法和2＇,7＇-二氯荧光黄双乙酸盐荧光探针法检测/不同浓度(0.1、1、10μmol/L)尼古丁作用相同时间(48 h)和相同浓度(1μmol/L)尼古丁作用不同时间(24、48、72 h),对口腔鳞状细胞癌SCC15细胞活力、细胞凋亡和细胞内活性氧含量的影响,以0μmol/L尼古丁为对照组;应用酶联免疫吸附测定、免疫荧光方法检测1 μmol/L尼古丁作用不同时间后口腔鳞状细胞癌SCC15细胞内核因子κB DNA结合活性及核因子κB表达变化.结果 不同浓度尼古丁处理SCC15细胞48 h,流式细胞术检测各组细胞内活性氧水平分别为(98.24±0.04)％、(98.50±0.06)％及(98.61±0.07)％,均较对照组[(96.01±0.58)％]显著增加(P=-0.000);同时各浓度尼古丁处理组细胞生长被促进,且呈浓度依赖性,0.1、1、10μmol/L尼占丁组细胞A值分别为2.19±0.08、2.20±0.11及2.38±0.08,均显著高于对照组(1.93 ±0.13)(P＜0.05).1μmol/L尼古丁处理组的SCC15细胞凋亡率显著高于对照组及0.1、10 μmol/L处理组(P-0.000).1μmol/L尼古丁作用于SCC15细胞72 h细胞生长被显著抑制,与对照组相比差异有统计学意义(P =0.022);1μmol/L尼古丁作用于SCC15细胞24 h后诱导SCC15细胞凋亡最显著且显著高于尼古丁作用48 h和72 h组(P=0.000),各组细胞核内代表DNA结合活性的A值分别为1.509、1 093、0.746,与对照组(A值为0.544)相比核因子κB DNA结合活性均有不同程度增高,提示核因子κB从胞质向胞核中转移,其中尼古丁作用24h活性最高.结论 尼古丁能促进口腔鳞状细胞癌SCC15细胞增殖并诱导少量细胞凋亡,可能是通过激活核转录因子核因子κB发挥作用.     

Prx1调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在实验性口腔黏膜癌变中的作用

目的 检测口腔黏膜癌变过程中线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin表达变化及抗氧化蛋白Prx1对其调控作用,探讨Prx1在口腔黏膜癌变中的作用机制.方法 利用4NQO化学诱导Prx1+/+和Prx1+/-小鼠舌黏膜癌变模型,采用免疫组织化学染色及Q-PCR方法 ,检测PINK1、Parkin在小鼠舌正常黏膜、白斑、...     

自噬在漏芦提取物抑制口腔癌生长中的作用

目的 通过检测天然产物漏芦乙酸乙酯提取物[rhaponticum uniflorum (L.)DC.ethyl acetate, RUEA]对口腔癌裸鼠移植瘤自噬相关蛋白表达的影响,探讨自噬在RUEA抑制口腔癌生长中的作用机制。方法 利用口腔鳞状细胞癌细胞株SCC15细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型。实验分为4组：空白对照组、溶剂对照组、高剂量RUEA组和低剂量RUEA组。HE染色对各组口腔癌组织进行组织学观察;免疫组化染色法检测RUEA对各组移植瘤组织自噬及其通路相关蛋白p62、LC3B、mTOR、ULK1表达的影响;以自噬及其通路相关蛋白为模型,采用AutoDock计算模拟其与RUEA的主要化合物分子对接模型,预测其潜在的结合蛋白及结合位点。结果 RUEA处理导致口腔癌移植瘤组织出现明显坏死。与溶剂组相比,自噬相关蛋白mTOR、p62在低剂量组、高剂量组口腔癌组织中表达显著降低（P<0.05）;而ULK1、LC3B在低剂量组、高剂量组口腔癌组织中表达显著升高（P<0.05）,差异具有统计学意义。Autodock预测RUEA主要化合物与p62、LC3B、mTOR、ULK1存在不...     

粪便中miRNA-424在结直肠癌诊断和筛查中的应用

目的研究miRNA(miR-150,miR-424,miR-29b,miR-96)在结直肠癌组织和粪便中的表达情况。方法纳入77例结直肠癌患者以及43名正常志愿者。运用实时定量PCR技术,对miRNA在结直肠癌患者与正常人群的粪便中的表达情况进行检测,并比较二者的差异。结果 miR-150在正常人群和结直肠癌患者粪便中表达有显著差异(P<0.05);miR-424在正常组中的表达量显著低于肿瘤组(P<0.05)。miR-29b和miR-96在两种人群粪便中的表达量无显著差异(P>0.05)。miR-424的曲线下面积为0.756,而miR-150的曲线下面积为0.661。结论 miR-424在结直肠癌患者和正常人群的粪便中表达存在明显差异。     

生存素、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在口腔癌前病变及口腔癌中的表达

目的 探讨生存素(survivin)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)在口腔癌发生中的作用,以期为口腔癌的监测和治疗提供参考.方法 选取首都医科大学口腔医学院病理科存档石蜡标本45例,其中口腔白斑伴上皮轻-中度异常增生16例,口腔白斑伴上皮重度异常增生12例,口腔高-中分化鳞状细胞癌17例;正常口腔黏膜组织10例.采用免疫组化SP法对生存素、caspase-3的表达进行检测;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法对细胞凋亡指数进行检测.结果 生存素表达在正常黏膜、白斑伴上皮轻-中度异常增生、白斑伴上皮重度异常增生及口腔癌中逐渐增加,阳性细胞率分别为(1.05±1.21)%、(6.06 ±4.87)%、(12.49 ±8.41)%和(21.89±10.45)%;caspase-3的表达在3个病例组中逐渐下降,正常对照、白斑伴上皮轻-中度异常增生、白斑伴上皮重度异常增生及口腔鳞状细胞癌组阳性细胞率分别为(12.37 ±5.48)%、(19.51 ±13.15)%、(9.76±7.83)%和(6.08 ±6.91)%;正常对照、白斑伴轻-中度异常增生、白斑伴重度异常增生及口腔鳞状细胞癌组凋亡指数分别为(0.89 ±0.46)%、(1.29 ±0.63)%、(0.65 ±0.40)%和(0.21 ±0.12)%,前3组与口腔鳞状细胞癌组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 生存素在口腔癌的发生过程中起重要作用,随着生存素表达的增加,caspase-3和凋亡指数呈下降趋势;生存索可能通过抑制caspase-3的表达,从而抑制细胞的凋亡,促进口腔癌的发生.     

正常大鼠颌下腺上皮细胞极性培养

目的 为了探索简便，有效的涎腺上皮细胞的体外培养方法。方法 采用自制鼠尾胶原胶为底物，在培养液中加入一些促进上皮细胞生长分化的刺激物，对出生一天的Ｗｉｓｔａｒ大鼠颌下腺上皮细胞进行原代培养。通过相差显微镜，光镜，扫描及透射电镜对上皮细胞的生长及生化进行观察和研究。结果 培养的大鼠颌下腺上皮细胞呈多层生长且为极性分化，保留了腺泡导管分泌单位的三种上皮成份。结论本研究所采用的方法是一种简便，可行，有效     

细胞角蛋白(CK)13及其基因在术后性上颌囊肿衬里上皮中的表达

目的研究CK13蛋白和CK13-mRNA在术后性上颌囊肿(post operative maxillary cysts,POMCs)衬里上皮细胞中的表达,进而探讨CK13在纤毛柱状上皮向鳞状上皮化生过程中的意义.方法本研究采用免疫组织化学染色法和RT-PCR法分别检测CK13蛋白和CK13-mRNA在32例POMCs衬里上皮中的表达.结果免疫组织化学染色显示CK13蛋白在鳞状上皮中呈阳性表达,在纤毛柱状上皮中呈阴性;RT-PCR法检测出CK13-mRNA在所有囊肿衬里上皮均呈阳性表达,其中13例纤毛柱状上皮呈弱阳性,14例既有纤毛柱状上皮又有鳞状上皮的混合上皮呈中等强度表达,5例鳞状上皮呈强阳性.结论 POMCs衬里的纤毛柱状上皮中存在CK13-mRNA,提示化生的鳞状上皮细胞可能来源于纤毛柱状上皮.在纤毛柱状上皮向鳞状上皮化生时CK13蛋白可能起着重要作用.     

危机管理在口腔门诊护理管理中的应用

目的探讨危机管理在口腔门诊护理管理中的应用。方法 2009年开始建立动态危机管理体系,根据体系的要求细化管理环节、建立危机管理对策,并根据动态反馈信息调整危机管理措施。至2011年回顾评价服务质量和服务安全方面的效果。结果 2011年服务满意度（98.80%）、治疗时间/总就诊时间（95.00%）、患者接受健康宣教比例（98.50%）逐年明显的提高,与2008年（90.00%、72.00%、73.90%）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。2011年护理投诉、职业暴露、护理差错、医源性感染、器材丢失发生数量呈下降趋势,与2008年比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论危机管理是一个长期的过程,需要不断发现隐患、不断改进管理措施、不断地关注危机因素的变化,随时更新危机管理技术和危机管理方案。