鼠内皮细胞抑制素的克隆及在COS-7细胞中的分泌表达

目的从小鼠肝脏中克隆出ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ并在ＣＯＳ－７细胞中分泌表达,为其在肿瘤抗血管基因治疗中的应用打下基础。方法用ＲＴ－ＰＣＲ从鼠肝脏扩增出内皮细胞抑制素ｃＤＮＡ并克隆入测序载体ＰＵＣ－Ｔ测序证实后,装入分泌表达载体ｐＳＥＣ－ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ,用ＤＥＡＥ－葡聚糖转染ＣＯＳ－７细胞,从ｍＲＮＡ水平及蛋白水平检测内皮细胞抑制素的表达。结果测序结果显示所克隆的小鼠ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ ｃＤＮＡ     

抗白介素6单抗诱导系统性红斑狼疮外周血T细胞凋亡的研究

近年来在细胞凋亡研究中观察到白介素2(IL-2)、IL-6等具有抑制淋巴细胞凋亡的作用。因此IL-2、IL-6分泌异常增高可能与SLE患者淋巴细胞凋亡缺陷有关。针对自身免疫性疾病中的这种细胞异常,人们发展了多种较特异性的疗法以期能保护和诱导淋巴细胞的正常凋亡作用[1]。但抗细胞因子抗体与淋巴细胞凋亡的关系深入研究不多。文献中有抗IL-2单抗诱导T细胞凋亡的作用[2],但抗IL-6单抗与T细胞凋亡的关系尚未见报道。我们研究了抗IL-6单抗(AH-65)与SLE患者外周血T细胞凋亡的关系,报道如下。一、材料和方法(一)SLE患者为我院附属第一、第…     

脂质体介导的鼠内皮细胞抑制素基因治疗人肝癌的研究

目的：利用内皮细胞抑制素进行肿瘤抗血管基因治疗的尝试。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ从鼠地脏扩增出内皮细胞抑制素ｃＤＮＡ,经测序证实后,装入分泌表达载体ｐＳＥＣ－ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ,用ＤＥＡＥ－葡聚糖将其转染ＣＯＳ－７细胞,从ｍＲＮＡ水平及蛋白水平检测内皮细胞抑制素的表达,并观察分泌上肖是否具有特异性抑制ｂＦＧＦ刺激的内皮细胞增殖作用,并通过ＴＤＴ介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记法和琼脂糖电泳来探讨其作用机制。     

靶向性肿瘤基因转移研究进展

肿瘤基因治疗安全性是治疗应用中需考虑的一个重要问题。利用异常表达的原癌基因启动子，病毒基因特异性启动子，组织特异性表达的调控序列等手段将治疗基因局限于肿瘤局部表达而特异性杀伤肿瘤是提高肿瘤基因治疗安全性的一个手段。本文主要从以上这几个方面侧重阐述了逆转录病毒、腺病毒载体靶向性研究进展     

SLE患者外周血T细胞bcl-2蛋白的表达

<正>淋巴细胞bcl-2蛋白表达增强能使其对常见的凋亡激发因素如电离辐射,糖皮质激素和多种细胞毒药物产生较强的抵抗性.研究表明bcl-2蛋白在T细胞生长发育、免疫记忆等方面都具有重要作用,其表达异常与SLE疾病的发生发展密切相关.本文应用流式细胞仪定量检测了不同病期SLE患者外周血T细胞bcl-2基因表达情况,旨在从分子水平上探讨SLE免疫功能紊乱的基因调控机制,为今后SLE治疗提供新线索和途径.     

白介素18和胞嘧啶脱氨酶基因对小鼠肝癌的联合基因治疗

目的观察白介素18和胞嘧啶脱氨酶基因对小鼠肝癌MM45T.Li联合基因治疗的效果.方法将小鼠IL-18基因克隆入pGCEN中,构建成pGCEN/IL-18.包装成逆转录病毒,感染小鼠肝癌细胞MM45T.Li,制出具有生物活性的MM45T.Li/IL-18瘤苗,灭活后对荷瘤小鼠进行皮下接种.同时利用AdCD/5FC对小鼠肝癌原位注射,进行联合基因治疗.结果在接受治疗30d后,MM45T.Li对照组肿瘤体积1580～1625mm3,MM45T.Li/IL-18治疗组(366±159)mm3,AdCD/5FC治疗组(438±65)mm3,IL-18和AdCD/5FC联合治疗组体积(15±7)mm3(P＜0.05).MM45T.Li对照组中位生存期50.0～51.5d,MM45T.Li/IL-18治疗组65d,AdCD/5FC治疗组57d,联合治疗组76d,和单独治疗组相比,联合治疗组中位生存期明显延长(P＜0.05).联合基因治疗组肿瘤组织周围有更多CD4+及CD8+淋巴细胞浸润.结论IL-18和CD基因的联合治疗组,其疗效要明显好于IL-18或CD基因单独治疗组.进行联合基因治疗,既有效地减少了肿瘤负荷,又充分调动了机体的抗肿瘤免疫,提高了疗效.