LncRNA RP11-79H23.3在膀胱癌细胞中的作用及其发生、发展的研究

背景与目的：虽然许多长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)的异常表达与膀胱癌的发生有密切关系，但对于lncRNA RP11-79H23.3暂未见报道。该研究旨在探讨lncRNA RP11-79H23.3在膀胱癌EJ细胞中的作用及其发生、发展的机制。方法：采用微阵列方法对4对膀胱癌患者的癌和癌旁组织进行组学分析，随后用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR)检测膀胱癌组织、癌旁组织及正常人膀胱上皮细胞sv-HUC-1、膀胱癌EJ细胞中RP11-79H23.3的表达。通过转染pIRES2-RP11-79H23.3上调该基因后，采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8，CCK-8)和EdU的方法检测EJ细胞的增殖活性，通过Transwell小室和平板划痕实验分别检测EJ细胞的侵袭和迁移能力，应用流式细胞术、Hoechst33342及Tunel检测细胞凋亡，应用细胞免疫荧光检测PTEN在膀胱癌细胞中的定位，采用鬼笔环肽染色观察细胞骨架形成，应用蛋白［质］印迹法(Western blot)分析过表达RP11-79H23.3后EJ细胞中PI3K/AKT信号通路中相关蛋白的表达情况。结果：LncRNA RP11-79H23.3在膀胱癌组织和膀胱癌EJ细胞中表达下调(P ＜0.001，P＜0.01)，pIRES2-RP11-79H23.3转染EJ细胞结果显示，RP11-79H23.3的表达量较转染前显著增加(P＜0.01)。上调RP11-79H23.3的表达可诱导膀胱癌EJ细胞的凋亡，相反，转染pIRES2-EGFP可促进EJ细胞的增殖、侵袭和迁移能力，同时，Western blot结果显示，转染pIRES2-RP11-79H23.3后可上调PTEN在EJ细胞中的表达，下调p-PI3K、p-AKT及p-Gsk3β蛋白的表达(P＜0.05)。结论：LncRNA RP11-79H23.3在膀胱癌组织和膀胱癌EJ细胞中低表达(P＜0.001，P＜0.01)，并且过表达RP11-79H23.3会降低膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移能力，其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。提示lncRNA RP11-79H23.3在膀胱癌恶性肿瘤中发挥重要的作用，可能会成为治疗膀胱癌的药物作用靶点。     

对医学生临床学习成绩的综合评价分析

医学是一门实践性较强的学科,如何公正、客观地评价医学生的临床学习成绩仍是目前高等医学教育中值得探讨的问题.我们认为,对医学生临床学习成绩的评价应包括理论知识和临床技能两个方面.因此,我们在临床医学专业本科学生的诊断学考试中,采用传统理论考试的同时,应用标准化病人进行临床技能的考试,并对考试成绩进行了分析,以寻求正确评价医学生临床学习成绩的途径.     

miR-130b-3p有望作为人膀胱癌的标志物

目的进一步了解miRNA在膀胱癌中的潜在机制。方法芯片分析4对人膀胱癌组织和相邻正常组织中的miRNA的表达。并用RT-q PCR来验证两个最上调的miRNA及其靶基因的表达是否符合miRNA/mRNA芯片结果。通过相关性分析和双荧光素酶报告实验推断并验证miR-130b-3p可以靶向PTEN。应用CCK8、EDU、流式细胞术、划痕、Transwell和细胞骨架等实验证明miR-130b可以影响膀胱癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。用Western blot检测PI3K/AKT和整合素β1/FAK信号通路的关键靶蛋白。结果人膀胱癌中miR-130b-3p表达高于癌旁且与PTEN表达呈负相关。miR-130b-3p可下调PTEN表达,导致PI3K/AKT和整合素β1/FAK信号通路的激活,且与膀胱癌EJ细胞的增殖、迁移和侵袭相关。细胞转染miR-130b-3p抑制剂时,可以重排细胞骨架。结论本结果揭示miR-130b/PTEN有望用于人膀胱癌诊断和治疗的标志物。