小鼠IgG亚类抗血清的制备

<正> 近年来,国内应用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)的工作迅速开展,急需鉴定小鼠 Ig 类及其亚类。我室在制备成功小鼠 IgG_1抗血清的基础上,相继制备成功成套的抗小鼠 IgG_1、IgG_(2a)、IgG_(2b)、IgG_a 四种抗血清。现简介如下。     

抗人IgM重链单克隆抗体的特性分析

本文报道取正常人混合血清纯化 IgM,经断链后获得(Fo)_5μ片段作为免疫原免疫动物,应用杂交瘤技术获得16株分泌抗人IgM McAb的细胞株。用琼脂双扩散、免疫电泳、ELISA等方法证实所分泌的 McAb对人 IgM 呈高特异性。杂交瘤细胞诱生腹水的抗体效价在双扩散试验中可达1:256,在ELISA 中可达10~(-7)。用被动血凝抑制试验及ELISA试验比较了其中4种McAb(M_5、M_(12)、M_(23)、M_(25))的抗原结合力大小,表明M_(12)有较高亲和力。用ELISA固相竞争试验分析,证明该4种McAb针对同一抗原的不同决定簇。该 16种McAb除 M_(22)为 IgA外,余均属 IgG1亚类。     

抗小鼠IgA血清的研制

<正> 抗小鼠IgA血清是鉴定鼠单克隆抗体Ig类属的必需试剂之一,国外均利用小鼠骨髓瘤细胞培养物或癌腹水为原材料,提取抗原制备相应抗血清。但国内缺乏这类细胞,若用小鼠血清为原材料,其中IgA含量少,纯化较困难。本文报道选用分泌小鼠IgA类抗体的杂交瘤细胞培养物,经纯化小鼠IgA后免疫羊制成相应的抗血清。以期提供系列参考试剂。     

小鼠IgG_1抗血清的制备

<正> 小鼠IgG分有IgG_1、IgG_(2a)、IgG_(2b)和IgG_3四种亚类,现用B淋巴细胞杂交瘤所分泌的单克隆抗体(McAb),均属一定的Ig及其亚类,因此需用相应的抗血清进行鉴定。这类抗血清制备较难、国内尚无产品供应。我们利用杂交瘤细胞在培养液中分泌的McAb为原料,经纯化和免疫家兔,制得较为满意的兔抗鼠IgG_1血清,鉴于本法操作简便、经济实效,特介绍如下。     

用(BALB/c×SSB)F_1小鼠制备单克隆抗体的经验

制备单克隆抗体的免疫原——杂交瘤细胞之亲代细胞系,目前大多取自BALB/c系小鼠。另据Brader等报道,应用BALA/c×Swiss Webster/HPB杂交一代小鼠制备单克隆抗体,取得了腹水量大、连续收获时间长的良好结果。且雄鼠得率不亚于雌鼠。我们于1986年6月应用BALB/c系(?)与SSB系(?)杂交的F_1小鼠制备单克隆抗体,取得了一定收获,     

正常小鼠血清中三种免疫球蛋白的检测

实验小鼠已成为免疫学研究的有力工具,不同品系个鼠在发生肿瘤和自身免疫病方面,有其品系的特征,据推测这种疾病的遗传与免疫球蛋白的合成量有关。而小鼠免疫球蛋白的含量随品系而异。因此在分析体液免疫反应时,首先要考虑小鼠品系的免疫球蛋白正常水平。迄今有关不同品系小鼠免疫球蛋白的遗传背景和因增龄而引起变动的资料为数不多,其主要原因是各类免疫球蛋白的抗血清制造较难,供应不多。本文目的是用自制的抗小鼠IgG(Fcr)、IgA、lgM血清,通过琼脂单向免疫扩散和速率散射比浊法,检测普通级小鼠中3类(IgG、IgA、IgM)免疫球蛋白,以了解其在不同品系、性别和年龄组小鼠中的     

用简单一步法选择杂交瘤制备单克隆抗体

本文报道融合后一步选择和克隆杂交瘤的简单方法,此法比常规的有限稀释法更易获得大量细胞和收获许多独立的杂交瘤克隆。这样既不需要再克隆化,又省去了大量组织培养。所以本技术特别适用于分离大量的杂交瘤,筛选得到不同的单克隆抗体。     

荧光核染色法检查细胞培养物中污染的支原体

本文报道了用荧光染料HOECHST 33258核染色,检查细胞培养物中支原体污染的方法,并将荧光法与电镜及常规培养法进行了比较。荧光法与电镜法的结果基本一致,但荧光法简便、快速、结果可靠、又经济,适用于常规实验室检查细胞培养物中支原体污染用。     

抗人IgG单克隆抗体的研究 Ⅲ.8株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性分析和初步应用

本文报道8株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体的血清学特性,其中4种属抗全IgG,3种是对IgG_4无反应的抗IgG,1种是对IgG_3无反应的抗IgG。各单克隆抗体之间的效价和结合抗原的能力有所差异。根据组合试验,选出A_2与B_1二种单克隆抗体进行组合,用以检测正常人血清中IgG含量,与常规抗血清相比较呈良好的相关性(r=0.90)。用以制备亲和层析柱,纯化人IgG,得率比常规抗血清高7.3倍。据此认为,研制这类单克隆抗体将为临床免疫检测提供有效的试剂。