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目的 建立细菌感染患者早期病原及耐药性分子诊断技术,以便尽早实施有效的抗感染治疗方案,改善患者预后。方法 扩增细菌23S rRNA基因序列,同时扩增多种耐药基因,设计探针,通过基因芯片杂交技术识别其差异序列,鉴别细菌,检测耐药基因,用于病原早期诊断和耐药谱测定;收集血培养标本223份,脑脊液、胸水、腹水标本339份,尿液标本514份,比较所建立方法与传统方法的一致性,验证所建立技术的可靠性。结果 基因诊断方法可正确检出常见病原菌,并检测其是否携带mecA、SHV、CTX-M-1组和CTX-M-2组耐药基因。检测血、尿及脑脊液等无菌体液标本时,所建立的快速检测方法与常规方法的符合率分别为96.4%、99.8%和99.7%,总体符合率为99.1%,耐药性检测与传统药物敏感结果的符合率为95.7%,其准确性与常规方法相当,检测时间比常规方法平均减少(2.09±1.15)d。结论 多重PCR-基因芯片杂交技术可用于耐药菌感染的病原早期诊断和耐药感染的同步检测,应用于临床可望改善患者的预后。 相似文献
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利用基因芯片快速检测多种临床常见致病菌及其耐药性基因 总被引:4,自引:11,他引:4
目的快速、准确、灵敏地检测临床常见的致病菌及其耐药基因。方法采用基因芯片技术,利用细菌23S rRNA基因序列信息和某些耐药基因作为检测靶基因,设计针对不同菌属的寡核苷酸探针和耐药基因探针的基因芯片,聚合酶链反应(PCR)扩增并荧光标记目的DNA片段,通过杂交反应检测致病菌及其耐药基因。结果在理想状态下(检测试剂盒抽提的细菌基因组DNA)检测的结果与国内外文献报道的灵敏度相当(10^3~10^6细菌/ml),并在部分临床分离株、耐药标准菌株中进行验证,显示该方法有良好的特异性及可重复性。细菌种类能鉴别到种水平的有16种,能鉴别到属水平的有7类。覆盖了临床常见的多种病原菌,并且还可同期检测超广谱β内酰胺酶(ESBLs)基因耐药。结论DNA芯片检测具有快速、高特异性和高灵敏度的特点,是常规鉴定方法的一种有益补充。 相似文献
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基因芯片检测血清标本的丙型肝炎病毒基因型 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)基因分型检测芯片在临床的初步应用及意义。方法:基因芯片检测150例血清标本中HCV基因型,并与HCVRNA定性及测序结果进行比较。结果:HCV基因分型检测芯片检出的阳性结果与HCV—RNA定性及测序结果的相对符合率为100.0%。结论:HCV基因分型检测芯片是一种准确性好、灵敏度高、特异性强、操作简便快速的基因检测方法,可以为临床诊断、治疗提供有力保证。 相似文献
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宫内宫角同时妊娠14周+2宫角破裂一例 总被引:1,自引:0,他引:1
患者 2 6岁 ,孕 1产 0。因停经 3月 + ,突发腹痛 1h ,头晕半小时于 2 0 0 2年 11月 16日晚急诊入院。患者既往月经规律 ,末次月经为 2 0 0 2年 7月 6日。停经后曾自测尿妊娠实验 (+) ,未进行过B超检查。停经 4 0d+ 出现早孕反应至今 ,停经后无阴道出血。近期时感右下腹胀痛 ,但能自行缓解。 1h前突发腹痛 ,不缓解并逐渐加重 ,半小时前开始出现头晕、出虚汗、心慌等症状 ,急来我院。身体检查 :血压4 0 / 0mmHg(1mmHg =0 133kPa) ,脉搏 12 1次 ,面色苍白 ,表情淡漠 ,精神萎靡 ,眼睑苍白 ,心率快 ,心音弱 ,无杂音 ,腹平 ,板状 ,压痛及反跳痛… 相似文献
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基因芯片法特异性检测丙型肝炎病毒的基因分型 总被引:6,自引:0,他引:6
目的:采用基因芯片特异性检测血清中丙型肝炎病毒(HCV)并进行基因分型。方法:设计HCV基因型特异探针,将其固定在玻璃片上制成微阵列芯片。阳性组血清60份,阴性组血清15份,乙型肝炎血清5份(抗HCV阴性)。经核酸提取,多聚酶链式反应(PCR)扩增,与芯片上的探针杂交,最后分析结果并与测序分型结果比较。结果:阳性组血清全部检测到HCV-RNA,均有基因芯片分型结果。基因芯片分型结果与测序分型结果一致者56例。阴性组血清HCV-RNA全部阴性。乙型肝炎血清全部阴性。结论:基因芯片可准确对HCV感染血清做定性检测并同时检测HCV基因型,简便快捷,特异性好,并且不需荧光标记和昂贵的荧光扫描仪器,与乙型肝炎血清无交叉反应。可替代基因测序分型,适于临床大量样品的检测。 相似文献
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目的用甲基化敏感性高分辨率熔解曲线法(MS-HRM)定量检测结直肠癌组织及外周血中MGMT基因甲基化水平,并结合结直肠癌病理参数分析探讨MGMT基因甲基化的临床意义。方法以33例结直肠癌组织和配对的正常黏膜组织以及其中16例患者的外周血为研究对象,用MS-HRM进行MGMT基因甲基化检测,分析MGMT基因甲基化与结直肠癌临床病理特征的关系和MS-HRM的方法特点。结果 MS-HRM从33例结直肠癌患者的癌组织中检测到12例(36.4%)MGMT基因启动子不同程度的甲基化(甲基化5%1例,5%~10%3例,10%~25%3例,25%~50%2例,50%~75%3例),对应的正常结直肠组织中仅检测到甲基化5%1例(3.0%)。16例外周血中检测到甲基化小于5%3例(18.8%)。MGMT基因甲基化与患者的年龄、性别、肿瘤部位无相关性(P0.05),但与结直肠癌的病理分期和分化程度的相关性有统计学意义(P0.05)。结论 MS-HRM可定量检测结直肠癌MGMT甲基化水平。MGMT基因甲基化与结直肠癌的进展评估有关。 相似文献
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目的分析25例感染中毒症患者血培养致病菌的种类、耐药谱及预后。方法回顾性分析我院住院诊断为感染中毒症的25例患者的临床资料。结果25例感染中毒症患者血培养共分离出致病菌26株:革兰阳性菌12株,革兰阴性菌10株,真菌4株。大部分菌株对常用抗生素出现多重耐药。25例患者治愈17例(68%),死亡4例(16%),放弃治疗3例。结论革兰阳性菌是感染中毒症的主要菌群,并且呈多重耐药,早期应用抗真菌药物有必要。 相似文献