HIV-1 P24人源化单克隆抗体的制备及鉴定

目的 通过建立新型人源化抗HIV-1 P24单克隆抗体制备技术平台,研制1～2种抗HIV-1 P24抗体.方法 使用连接P24的磁珠分选特异性分泌P24抗体的B细胞,有限稀释后,提取总mRNA,采用逆转录和巢式PCR扩增免疫球蛋白重链和轻链基因,经测序鉴定后克隆到真核表达载体Cloning vector AbVec-hIgG1、Cloning vector AbVec-hIgKappa、Cloning vector AbVec-hIgLambda中;通过瞬时转染293T细胞得到重组抗体;使用proteinA亲和层析纯化抗体.结果 成功筛选到5对抗HIV-1 P24的人源单克隆抗体基因.结论 本研究初步成功地建立了人源化HIV-1 P24单克隆抗体的制备及纯化方法,为HIV早期诊断以及筛选其他人源化单克隆抗体奠定了基础.     

豫东地区影像技术人才需求与培养模式调查研究

目的：探索高职影像技术专业的人才定位标准和发展路径。方法：采用自制问卷和访谈对河南省商丘市及周边县市卫生医疗机构影像技术专业人才需求状况和商丘医学高等专科学校影像技术专业“2＋1”人才培养方案进行实践调查。结果：影像技术人员年龄结构趋于老年化,学历以大中专为主,其中40-49岁（36.1%）,50-56岁（28.4%）;文化程度：中专（29.6%）,大专（33.3%）;从专业综合素质能力对影像技术人才培养提出建议,进一步促进了专业学科建设与人才培养模式的改革。结论：＂校院融合,实景教学＂的办学宗旨和影像技术专业“2＋1”人才培养方案得到了认可并为专业发展提出了中肯的建议。     

东北某地水源水及生活饮用水微生物指标调查

目的调查东北某地水源水及生活饮用水微生物指标状况,为提高饮水微生物指标合格率提供基础数据。方法于2015年夏、秋两季,分别对东北某地的水源水和生活饮用水进行采集,共计92份,依照《生活饮用水标准检验方法微生物指标》（GB／T5750．12—2006）、《饮用天然矿泉水检验方法》（GB／T8538—2008）和《食品安全国家标准食品微生物学检测》（GB4789—2013）对样品进行微生物指标检测,检测项目包括菌落总数、总大肠菌群、大肠埃希菌3项卫生微生物学指标和大肠埃希菌0157：H7、沙门菌、志贺菌及金黄色葡萄球菌4项病原微生物学指标。依照《生活饮用水卫生标准》（GB5749—2006）、《生活饮用水水质卫生规范》（卫生部,2001）和《Protocol for Developing Pathogen TMDLs, First Edition》（USEPA,2001）对检测结果进行判定,其中任何一项指标不合格者则判定为该份水样不合格。结果经消毒处理的水、自备井水、水源水的微生物指标不合格率分别为20．00％、95．45％和54．00％。其中,自备井水污染尤为严重,不合格样品中总大肠菌群和大肠埃希菌最高浓度分别为5600MPN／100mL和344MPN／100mL,是造成水样不合格率较高的主要因素。三种不同来源的水样三种微生物间相关性各异,可能与各自的生存环境有关。在水源水中检出1株以色列沙门菌和2株肠沙门菌双相亚利桑那亚种,其它三种致病菌在所有水样中均未检出。另外,该地区丰枯水期水源水微生物污染状况差异有统计学意义（X2=9．742;P=0．002）,经消毒处理的水和自备井水微生物污染状况丰水期和枯水期差异无统计学意义。结论该地区存在水源受粪便污染风险,应加强饮水微生物监测,预防介水传染病的发生。     

北京一次空气重污染过程室内外微生物气溶胶的浓度变化及影响因素分析

目的 分析北京一次空气重污染黄色预警期间室内外微生物气溶胶的浓度和粒径变化特征及相关影响因素。方法 采用Andersen空气微生物采样器在北京市空气重污染黄色预警期间对室内外环境进行采样、培养,同时记录采样时的环境因素、颗粒物以及气态污染物的浓度。结果 在本次北京市空气重污染期间室外细菌和真菌气溶胶浓度显著高于室内细菌和真菌气溶胶浓度(P<0.01),室内外细菌和真菌浓度变化趋势具有显著正相关(P<0.01),发现63.62%~96.70%的细菌或真菌气溶胶粒子直径小于5μm,Spearman相关分析表明室外细菌气溶胶浓度与温度具有显著正相关(P<0.01),与相对湿度具有显著负相关(P<0.01),室内细菌气溶胶浓度与温度和相对湿度具有显著正相关(P<0.01),室外真菌气溶胶浓度与SO2、PM10、PM2.5和AQI指数具有显著正相关(P<0.01),与相对湿度具有显著负相关,室内真菌气溶胶浓度与温度、SO2、PM10、PM2.5和AQI指数具有显著正相关(P<0.01),与O3浓度具有显著负相关(P<0.01)。结论 本次空气重污染预警期间,室外微生物气溶胶浓度显著高于室内,超过60%的室外或室内微生物气溶胶粒子直径小于5μm,室内外微生物气溶胶浓度受多个环境因素参数影响。     

环境水体中痢疾志贺菌荧光定量PCR检测方法研究

目的对环境水体中痢疾志贺菌荧光定量PCR检测方法进行研究和评价。方法根据痢疾志贺菌侵袭性质粒抗原H(invasion plasmid antigen H,ipa H)基因设计引物,利用普通PCR方法扩增其ipa H基因并将其与T载体进行连接以获得ipa H-T重组质粒;对重组质粒进行梯度稀释后进行荧光定量PCR,观察其标准曲线及最低检出限;提取17株可在环境水样中存在的多种致病菌DNA并以同样反应体系进行荧光定量PCR,验证该方法的特异性;将痢疾志贺菌加标于地表水水样中,测试该方法的环境样品检测能力。结果成功扩增痢疾志贺菌ipa H基因并连接T载体;通过荧光定量PCR检测各梯度浓度重组质粒的Ct值间隔相近,检出限低至10 copies;17株致病菌DNA的检测结果均为阴性,显示该方特异性好;在环境地表水菌落总数为3.5×103 CFU/ml、痢疾志贺菌加标浓度低至5 CFU/ml时,仍可以通过该方法检出,显示该方法的抗干扰能力强,可用于环境水样的直接检测。结论通过荧光定量PCR方法可实现对水中痢疾志贺菌进行快速检测,检测时限3 h以内,检测浓度5 CFU/ml,特异性及抗干扰性好,可用于污染水样的快速直接检测。     

饮用水臭氧水机评价方法初探

目的探讨饮用水臭氧水机的评价方法,为市场准入提供安全有效的检测评价方案。方法在臭氧水机的额定产水量内,自来水以1.0 L/min流速流经该净水器,通过中和剂鉴定、总体性能、饮用水消毒效果、臭氧水定量杀菌等试验对饮用水臭氧水机的安全及应用效果进行评价。结果含0.2%硫代硫酸钠、0.2%吐温-80的0.03 mol/L PBS溶液的中和剂和中和产物对大肠杆菌及培养基无不良影响。总体性能试验、饮用水消毒效果试验符合《生活饮用水消毒剂和消毒设备卫生安全评价规范》(试行)和GB 5749—2006《生活饮用水卫生标准》的要求;当作用时间达到30 min时,该臭氧水机产生的臭氧水对染菌载体上的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌杀灭的对数值均大于3,符合《消毒技术规范》(2002)的要求。结论通过中和剂鉴定、总体性能、饮用水消毒效果、臭氧水定量杀菌等指标可对臭氧水机的使用安全性能及消毒应用效果等做出全面的评价。