前列腺癌干细胞分离方法的对比及筛选

背景：前列腺癌干细胞是前列腺癌复发侵袭的重要原因,目前研究难点在于前列腺癌干细胞分离技术效率较低。目的：探索高效地从人前列腺癌PC-3及LNCap细胞株分离前列腺癌干细胞的方法。方法：采用含血清贴壁培养法及无血清悬浮培养法培养PC-3及LNCap细胞株,然后利用流式细胞表面标记CD133及CD44检测两种细胞在不同培养条件下可获取前列腺癌干细胞的比例,同时采用诱导分化实验初步鉴定前列腺癌干细胞特性。结果与结论：PC-3及LNCap细胞能在添加生长因子的无血清培养基中形成悬浮细胞球,接种在含血清培养基后可以诱导分化为贴壁细胞;无血清培养组的CD44^＋/CD133^＋细胞比例：PC-3为0.59%,LNCap为1.71%,含血清培养组中的CD44^＋/CD133^＋细胞比例：PC-3为0.32%,LNCap为0.73%,其中LNCap细胞采用两种方法所获的CD44^＋/CD133^＋细胞均高于PC-3所获的的细胞（P〈0.05）,在两种细胞中无血清悬浮培养和含血清贴壁培养差异无显著性意义（P〉0.05）,但无血清悬浮培养周期长,获得细胞数相对较少,直接影响分选后肿瘤干细胞功能测定。因此可以证实含血清贴壁培养LNCap细胞较无血清悬浮培养法更能高效快捷的获取前列腺癌干细胞。     

TVT-A与TVT-O治疗女性压力性尿失禁术后发生腹股沟疼痛情况分析

目的:比较使用改良式经闭孔经阴道无张力尿道中段悬吊术(tension-free vaginal tape-abbrevotm,TVT-A)与传统经闭孔无张力尿道中段悬吊术(tension-free vaginal tape-obturator,TVT-O)治疗女性压力性尿失禁术后发生腹股沟疼痛情况。方法:回顾性分析2014年1月至2016年4月87例采用TVT-A治疗压力性尿失禁及33例采用TVT-O治疗压力性尿失禁患者的临床资料,比较分析两组患者的术后效果及术后腹股沟疼痛的发生情况。结果:TVT-A和TVT-O两组手术均顺利完成,平均手术时间、术中出血量及治愈率差异无统计学意义(P0.05);术后腹股沟疼痛发生率TVT-A组明显小于TVT-O组,差异有统计学意义(P0.05);疼痛VAS评分TVT-A组小于TVT-O组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:TVT-A治疗女性压力性尿失禁,安全有效,TVT-A较TVT-O术后腹股沟疼痛的发生率明显降低。     

骨髓间充质干细胞作为重组腺病毒白细胞介素10表达系统载体细胞的研究

探讨间充质于细胞(MSC)作为重组腺病毒白细胞介素10基因表达系统(Ad.rIL-10)的载体细胞的可行性。方法 应用密度梯度离心结合贴壁法原代培养,并于体外扩增出MSC,运用流式细胞仪对MSC进行鉴定。用ELISA法检测外源基因rIL-10在MSC中的表达情况。结果 原代培养扩增出的MSC高表达CD29,CD105和CD166,不表达CD45,其中第4代MSC生长状态良好,12h贴壁率达90％。腺病毒包装IL- 10可以高效感染MSC,感染48 h后IL-10表达增加(48 h Ad.rIL-10组136.2μg/L;对照组5.1μg/L),并可持续维持高表达2周以上。结论 含外源基因IL-10的MSC高效而持久的表达目的基因,尤其是第1代至第4代的MSC,是基因治疗良好的细胞载体。     

基于住院医师规范化培训效果的方法评价学研究

目的 通过对住院医师规范化培训的效果进行分析,发现住院医师规范化培训中存在的问题并探寻对策进一步健全住院医师规范化培训制度,并为医院的管理提供决策咨询。方法 对2015年—2019年安徽医科大学第二附属医院住院医师的规范化培训成绩和考核结果进行讨论和分析。结果 对规范化培训效果的评价分析研究表明每年各项考核项目均比前一年有较大提升。结论 考核评价是住院医师规范化培训的重要环节。通过对考核评价的分析,可以判断和保证培训效果,为检验考核效果、提高培训质量提供依据。     

腹腔镜下腹膜外膀胱根治和原位新膀胱术的初步体会

目的 评估腹腔镜腹膜外全膀胱切除和原位新膀胱术的安全性及疗效。方法 回顾性分析安徽医科大学第二附属医院2021年3月至2022年2月行腹腔镜腹膜外全膀胱切除和原位新膀胱术的8例膀胱癌患者,收集患者的基本资料、手术相关数据及术后随访相关情况。结果 所有患者均顺利完成手术,年龄为[65(40～78)]岁,BMI为[23.85(19.59～29.07)]kg/m2,手术时间为[280.5(235.0～366.0)]min,术中出血量为[100(50～200)]ml,通气时间为[3(2～4)]d,术后住院时间为[11.5(10.0～20.0)]d,淋巴结清扫数目为[13.5(8.0～29.0)]枚。术后分别有一例患者出现切口愈合不良和漏尿。6例患者进行了术前新辅助治疗,其中2例患者术后病理为T0期。中位随访时间为11个月,其中1例出现骨转移,1例出现泌尿道感染,1例出现肾积水。结论 腹腔镜下腹膜外全膀胱切除及原位新膀胱术是安全可行的,因其极大程度地保留了腹膜的完整性及避免长时间经腹腔操作对肠道造成干扰,有利于减少肠道并发症,缩短住院时间,值得临床推广。     

微小RNA-101对前列腺癌干细胞EZH2表达及增殖迁移的影响

目的 调控前列腺癌干细胞(PCSCs)中微小RNA-101(miR-101)表达,观察细胞中EZH2表达及其增殖迁移能力的变化.方法 通过流式分选从LNcap细胞株中获取PCSCs;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot、双荧光素酶、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移实验观察miR-101对前列腺癌干细胞EZH2表达及增殖迁移能力影响.结果 在PCSCs中转染miR-101后,实验组较未处理组EZH2表达量下降46％ (P ＜0.05);双荧光素酶实验证实PCSCs中miR-101直接调控EZH2;凋亡实验中,实验组细胞凋亡率为(3.79±0.24)％,较对照组凋亡率明显增加(P＜0.05);周期实验中,实验组细胞G1期比例为(82.95±0.78)％,较对照组比例增加(P＜0.05),细胞被阻滞在G1/S期;迁移试验中,细胞迁移率为0.38±0.01,明显低于对照组(P＜0.05).结论 过表达miR-101能下调前列腺癌干细胞中EZH2的表达并能降低细胞的增殖迁移能力.     

肾癌中Card9的表达及作用机制研究

目的探讨肾癌中Card9表达水平及其调节机制。方法免疫组化法及Westernblotting法检测。肾癌细胞、正常细胞、肾癌组织和癌旁组织中Card9表达情况;MTr法检测抑制Card9表达后对肾癌细胞增殖的影响,同时Westernblotting法检测抑制Card9对IKK-α表达及磷酸化的影响。结果免疫组化及Westernblotting检测发现肾癌细胞及组织中Card9表达明显增高;MTT法检测发现抑制Card9的表达可以明显抑制肾癌细胞的增殖,Westernblotting结果表明抑制肾癌细胞内Card9的表达可以抑制IKK-α表达及磷酸化。结论Card9在肾癌内高表达,参与调节肾癌细胞增殖和IKK-α表达及磷酸化;其可能是肾癌的潜在治疗靶点之一。     

腹膜后入路腹腔镜输尿管离断吻合术治疗腔静脉后输尿管

【摘要】 目的 介绍利用后腹腔镜输尿管离断成形术治疗腔静脉后输尿管的经验。方法2008年2月至2012年11月,11例腔静脉后输尿管患者于我中心接受了后腹腔镜输尿管离断吻合术,收集统计病例资料。结果 所有患者手术均于后腹腔镜下顺利完成,无1例中转开放手术,术中无出现下腔静脉等脏器损伤并发症,平均手术时间为119(85~160)分钟;术中平均出血量约为22(10~40)mL。随访结果显示患者肾积水情况有不同程度缓解。结论 后腹腔镜输尿管离断吻合术治疗腔静脉后输尿管是安全、有效的手术方法,手术时间短,患者术后恢复快、创伤小,可以作为此类疾病的首选治疗方案。