先天性智力低下儿童脆性X综合征的分子流行病学调查

目的根据脆性X综合征的两个分子生物学标志,建立在先天性智力低下患儿中快速分析脆性X综合征智力低下基因1(Fragile X mental retardation gene 1,FMR1)突变的方法,对先天性智力低下儿童进行脆性X综合征的大面积筛查和诊断,调查智力低下儿童中脆性X综合征的发病率。方法应用复式PCR方法检测FMR1基因的(CGG)n重复区CGG重复序列的大小,判断FMR1基因状态(正常、前突变、全突变),快速筛查脆性X综合征可疑患儿。用甲基化特异性PCR方法,检测FMR1基因启动子区CpG岛的异常甲基化情况,进一步诊断脆性X综合征患者,并用Southern印迹技术进行验证。结果1248例先天性智力低下患儿中,筛查出149名不明原因的智低儿童进行了FMR1基因分析,检出脆性X综合征携带者(FMR1基因前突变者)32例(10男22女),脆性X综合征患者(FMR1基因全突变者)12例(9男3女),脆性X综合征检出率为8.05%。结论复式PCR法灵敏、快速、简便,适应于临床和基层开展脆性X综合征筛查。脆性X综合征在先天性智力低下儿童中的发病率高,应对先天性智力低下儿童进行脆性X综合征FMR1基因的分析。     

应用引物原位标记技术快速诊断先天愚型

目的 :为发展快速诊断先天愚型的方法 ,方法 :利用 2 1号染色体α -卫星序列 ,设计特异性引物直接在分裂间期和中期细胞上作引物原位标记。结果 :先天愚型三体型间期细胞核中和中期染色体上观察到 3个标记信号。正常对照组为2个标记信号 ,平均标记效率分别分 90 .8%、91.3%。先天愚型嵌合型显示 2个和 3个标记信号 ,并且各占一定的比例。结论 :引物原位标记技术可直接在淋巴细胞间期核中进行 ,4～ 5h内能对先天愚型患者作出快速、准确的诊断。为先天愚型的快速产前诊断开辟了新的途径     

遗传因素与反复流产

反复流产一般指一对夫妇发生两次或两次以上流产。引起流产的遗传因素包括染色体异常、单基因突变以及多因子遗传。在头３个月的流产胚胎中,５０％以上显示出染色体异常,但对流产的遗传因素的估计显然过低。随着分子生物学技术的发展,一些不能通过细胞学方法检出的微小...     

应用毛细管电泳筛选DNA点突变

毛细管电泳在最近几年得到了迅速发展。它提供了快速、高分辨、自动操作、数据自动获取的在线检测,并且应用于ＤＮＡ的突变分析。本文介绍了利用毛细管电泳来筛选ＤＮＡ点突变,并对未来的发展进行了展望。     

甲基化特异性PCR检测脆性X综合征患者FMR1基因甲基化的应用价值

脆性X综合征95%以上患者的致病分子机制是由于脆性X智力低下基因1(Fragile X mental retardation 1 gene,FMRI)5'端非翻译区一段不稳定的三核苷酸重复序列(CGG)异常扩增;和该基因上游启动子区域CpG岛的异常甲基化,使FMR1基因失活,而产生智力低下等系列脆性X综合征临床症状的疾病.我们用甲基化特异性PCR检测先天性智力低下患儿FMR1基因CpG岛的甲基化状况,并分析其在诊断脆性X综合征中的价值.现报告如下.     

一种罕见X染色体改变与X连锁综合征型耳聋的关系

目的：对一X连锁综合征型耳聋家系进行进一步的遗传学研究,以探讨X染色体结构异常与这种综合征型耳聋的内在关系。方法：用G常规显带、高分辨显带和荧光原位杂交技术对家系成员进行染色体结构和数目分析,同时利用X染色体上的遗传标记分析该家系成员的DNA等位片段数。结果：两例先证者表型正常的母亲及外祖母均存在X（p22-pter）重复; FISH示先证者及其母亲的X染色体全被涂染;DXS7108等位片段分析示先证者III-3有两个拷贝。结论：该X连锁综合征型耳聋家系的异常X染色体源于Xp部分重复,这为将来进一步分离该异常染色体断点的研究工作奠定了基础。     

mRNA的差异剪接与神经系统发育

mRNA的选择性剪接可以使基因产生新的结构与功能,是基因表达调控的重要机制.神经系统中大部分的差异剪接基因与信号传导和调节有关,包括转录因子、受体、离子通道等,这些差异剪接影响细胞内基因的转录调控、信号传导、离子通道的动力学,从而对神经系统的发育、功能以及内环境的稳定性具有重要的调节作用.差异剪接的异常导致神经系统的疾病和肿瘤,因此可以作为治疗的靶标.     

用聚合酶链反应技术对脆性X综合征进行筛查与诊断

目的 建立脆性X综合征大面积快速筛查与诊断的方法。方法 用7-deza-dGTP的PCR法扩增脆性位点智力低下1基因（fragile X mental retardation gene 1,FMR1)的（CGG）的重复区，检测CGG重复数的大小，对脆性X综合征进行诊断。结果 在一家系14个成员中，我们筛查出2例脆性X综合征携带者，5例患者；并用甲基化特异性X综合征男性携带者及患者进行快速鉴定；用甲基化特异性PCR法可以对脆性X综合征患者进行快速诊断。两种方法也适用于脆性X综合征的产前筛查与诊断。     

应用分子遗传学方法进行Wilson病的症状前诊断

目的 采用分子遗传学的方法，为Wilson病（WD）家系中症状前期WD患者明确诊断。方法 采用与Wilson病致病基因紧密连锁的遗传标记。构建染色体单体型。分析先证者与待诊者的异同；检测待诊者是否存在与先证者相同的致病突变，寻找症状前期患者。结果 在10个WD家系中找到了2例症状前期的WD患者其中一例为仅1个月的婴儿；同时为一例血清铜蓝蛋白低于正常的携带者明确了诊断。结论 采用染色体单体型分析结合突变检测的方法，能为WD家系中症状前期病人明确诊断，使之得到及时的治疗。