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我国不同地区天门冬核DNAITS序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究我国不同地区天门冬核DNA ITS序列差异及其与地理位置的关系,为不同居群天门冬的鉴定和道地产区的确定提供理论依据.方法 运用PCR法对25个地区的75个样本ITS序列扩增后双向测序,用软件DNAMAN和MEGA4分析测序结果.结果 每个地区的3个样本的ITS序列基本相同,不同地区样本间的ITS全序列存在一定差异,ITS2片段变异高于ITS1.贵州产天门冬遗传分化度较大,变异位点和信息位点较多.ITS序列构建的系统树表明,同一个地区的3个样本优先聚类,然后是同省的样本聚类,位于北纬24.6°~36.6°和22.2°~24.4°的样本分别聚为1大支;第1大支中包括青海、湖南和贵州省的样本,第2大支则包括浙江、广东、云南和广西4省的样本.结论 ITS序列可鉴定不同产地的天门冬,贵州省是天门冬药材道地产区之一,不同地区天门冬的亲缘聚类主要与纬度相关,与经度关系不大. 相似文献
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天门冬ISSR分子标记技术的建立与体系优化 总被引:8,自引:3,他引:5
目的建立并优化天门冬ISSR-PCR反应体系和扩增程序,为探讨天门冬种质间遗传多样性提供依据。方法采用单因子试验和正交设计法,研究Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、延伸时间及循环次数对PCR扩增的影响。结果天门冬ISSR-PCR的最佳反应体系为25μL的反应体系中含模板DNA 40 ng、Mg2+1.25 mmol/L、dNTP 320μmol/L、引物1.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U。在此基础上,从50条引物中筛选出13条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物,并通过梯度PCR试验,确定引物最佳退火温度。结论建立的天门冬ISSR-PCR反应体系,经过17份天门冬种质检验,证明该体系稳定可靠,可用于天门冬遗传分析。 相似文献
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天门冬组培快繁体系研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 建立天门冬组培快速繁殖体系,保护和合理利用天门冬资源.方法 采用不同基本培养基和不同种类及质量浓度的植物生长调节剂对天门冬不同外植体进行愈伤组织诱导、丛生芽诱导及生根培养研究.结果 愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,pH 5.8;丛生芽诱导的适宜培养基为MS+ 1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L LAA,pH 5.8;生根的适宜培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA,其中培养基中铁盐的质量浓度降低到6.95 mg/L,蔗糖的质量浓度降低至20 g/L,pH值为5.8.结论 天门冬不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中嫩芽诱导愈伤率最高,为天门冬最适组织培养的外植体;利用组织培养技术能够实现天门冬快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础. 相似文献
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目的 运用分子标记,鉴定药用植物天门冬及伪冒天门冬的同属植物.方法 通过对叶绿体基因组两个片段的扩增、测序及序列比对.结果 DelA和De1B两个片段很保守,供试材料除天门冬外序列完全一样;天门冬在DelA和De1B两个片段上存在96个和347个碱基的缺失;经过同源比对,两个片段与psbA基因和rps12基因部分序列类似,这些基因参与编码photosystem Ⅱ protein D1和ribosomal protein S12蛋白.结论 根据天门冬叶绿体能正常的发挥功能,这些缺失不会导致叶绿体功能的变化,推测这两个片段可能是编码photosystem Ⅱ protein D1和ribosomal protein S12蛋白基因的内含子部分;同时该两个缺失片段可以作为天门冬的分子鉴定标记,用于鉴定伪冒的天门冬药材. 相似文献
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目的 研究我国不同地区天门冬核DNA ITS序列差异及其与地理位置的关系,为不同居群天门冬的鉴定和道地产区的确定提供理论依据。方法 运用PCR法对25个地区的75个样本ITS序列扩增后双向测序,用软件DNAMAN和MEGA 4分析测序结果。结果 每个地区的3个样本的ITS序列基本相同,不同地区样本间的ITS全序列存在一定差异,ITS2片段变异高于ITS1。贵州产天门冬遗传分化度较大,变异位点和信息位点较多。ITS序列构建的系统树表明,同一个地区的3个样本优先聚类,然后是同省的样本聚类,位于北纬24.6°~36.6°和22.2°~24.4°的样本分别聚为1大支;第1大支中包括青海、湖南和贵州省的样本,第2大支则包括浙江、广东、云南和广西4省的样本。结论 ITS序列可鉴定不同产地的天门冬,贵州省是天门冬药材道地产区之一,不同地区天门冬的亲缘聚类主要与纬度相关,与经度关系不大。 相似文献
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天门冬组培快繁体系研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立天门冬组培快速繁殖体系,保护和合理利用天门冬资源。方法 采用不同基本培养基和不同种类及质量浓度的植物生长调节剂对天门冬不同外植体进行愈伤组织诱导、丛生芽诱导及生根培养研究。结果 愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,pH 5.8;丛生芽诱导的适宜培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA,pH 5.8;生根的适宜培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA,其中培养基中铁盐的质量浓度降低到6.95 mg/L,蔗糖的质量浓度降低至20 g/L,pH值为5.8。结论 天门冬不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中嫩芽诱导愈伤率最高,为天门冬最适组织培养的外植体;利用组织培养技术能够实现天门冬快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础。 相似文献
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目的 建立并优化天门冬ISSR-PCR反应体系和扩增程序,为探讨天门冬种质间遗传多样性提供依据。方法 采用单因子试验和正交设计法,研究Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、延伸时间及循环次数对PCR扩增的影响。结果 天门冬ISSR-PCR的最佳反应体系为25 μL的反应体系中含模板DNA 40 ng、Mg2+ 1.25 mmol/L、dNTP 320 μmol/L、引物1.2 μmol/L、Taq DNA 聚合酶1.5 U。在此基础上,从50条引物中筛选出13条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物,并通过梯度PCR试验,确定引物最佳退火温度。结论 建立的天门冬ISSR-PCR反应体系,经过17份天门冬种质检验,证明该体系稳定可靠,可用于天门冬遗传分析。 相似文献
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铁皮石斛带节茎段的组培快繁体系研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:建立铁皮石斛带节茎段为外值体的快速繁殖体系,保护和合理利用铁皮石斛资源.方法:以铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)的带节茎段作外植体,比较不同培养基、激素等因素对铁皮石斛诱导、增殖及生根的影响.结果:最适茎段诱导腋芽的培养基为1/2MS+ 2.0mg L-1 6-BA+ 0.2mgL-1 NAA,腋芽诱导率可达93.3%;最适丛生芽增殖的培养基为1/2MS+ 1.5mgL-1 6-BA +0.5mgL-1 NAA,平均增殖系数达到5.46;最适的生根培养基是1/2MS+0.5mgL-1 IBA +0.5mgL-1 NAA+ 0.2% AC,组培苗生根多,生根率达到72%.以上各种培养基琼脂粉浓度均为0.8%,蔗糖浓度均为2%,pH5.6 ~5.8.同时研究发现,组培苗的移栽基质以细木屑为优,具有疏松透气、排水良好等优点,成活率可达88%.结论:利用带节茎段能够实现铁皮石斛快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础. 相似文献
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