云南壮族、苗族、纳西族人群HNA-3基因多态性分布

目的 了解云南地区献血者中少数民族人群的人类中性粒细胞抗原-3(HNA-3)的分布频率。方法 从2012年1月-2014年1月在昆明血液中心献血的云南本地无血缘关系的健康献血者外周血标本中,筛选出壮族196(人)份、苗族209(人)份和纳西族187(人)份,采用血液基因组DNA提取试剂盒提取其DNA,以PCR-SBT方法对其HNA-3作基因分型,利用SPSS 20.0统计学软件分析3个民族的HNA-3等位基因分布频率。结果 本组云南壮族、苗族和纳西族献血人群的HNA-3a/a基因型频率分别为0.59(115/196)、0.48(101/209)和0.45(85/187),HNA-3a/b分别为0.35(69/196)、0.43(90/209)和0.46(86/187),HNA-3b/b分别为0.06(12/196)、0.09(18/209)和0.09(16/187),HNA-3a分别为0.76(298/392)、0.66(276/418)和0.68(254/374),HNA-3b分别为0.24(94/392)、0.34(142/418)和0.32(120/374);云南壮族HNA-3b/b基因型频率明显低于云南苗族和纳西族人群(P0.05)。结论 本组云南3个目标民族人群中HNA-3等位基因频率的分布存在多态性;云南本地苗族和纳西族人产生抗-HNA-3a的风险可能要高于壮族人。     

改良56℃热放散法与冷冻复融放散法对ABO型新生儿溶血病的临床应用价值比较

目的 比较改良56℃热放散法和冷冻复融放散法对检测ABO型新生儿溶血病(ABO-HDFN)的阳性检出率、试验成本等方面进行比较,探讨两种方法的临床应用价值。方法 选择2023年3月本院接收的所有进行新生儿/脐带血标本进行ABO溶血病检测(直接抗人球蛋白试验、游离抗体试验、放散试验),其放散试验时同时进行改良56℃热放散和冷冻复融放散,用统计学方法对两种放散方法结果进行比较分析。结果 共纳入非O型的新生儿/脐带血标本256例进行ABO-HDFN检测,其中A型145例,B型109例,AB型2例。改良56℃热放散法的阳性检测率69.92%,冷冻复融放散法的阳性检出率为64.45%,二者无统计学差异。比较两种方法在不同血型、不同凝集强度、不同直接抗人球蛋白试验结果(阴性/阳性)情况下的放散结果,二者均无统计学差异;仅游离抗体结果为阳性时,两种方法具有统计学差异。结论 在大多数情况下两种放散方法对于ABO-HDFN的诊断价值无统计学差异。各实验室可以结合临床患者的紧急程度以及本实验室的仪器设备、耗材配置、工作人员经验和时间成本等综合考虑,选择适合本实验室的方法。     

荧光定量PCR法检测HTLV核酸方法的建立

目的建立荧光定量PCR (FQ-PCR)法从血浆标本中检测HTLV核酸,用于献血者HTLV筛查。方法在沈阳军区总医院和安徽省血液中心总共收集献血者标本3 043份,用自配核酸提取试剂提取HTLV核酸,用FQ-PCR法检测HTLV核酸。同时用ELISA方法进行anti-HTLV检测,如果ELISA呈反应性,进一步用免疫印迹实验进行确证,如果免疫印迹实验结果为不确定,间隔4周后追踪献血者,以确定是否为真阳性,以验证FQ-PCR检测方法的可行性。结果对留取的献血者标本进行扩增,所有扩增结果均为阴性。用ELISA方法对这些标本进行HTLV抗体检测,共有48份标本ELISA检测呈反应性(包括灰区0.5=S/CO 1.0),对这48份标本做确证实验,有16份标本出现条带,但结果均为不确定。间隔4周后对这16位献血者进行追踪,共追踪到11位献血者,再次留取标本进行检测,结果均为阴性。分别选择7种不同拷贝数的假病毒核酸进行最低检出限的确定实验,最低检出限可以达到1.56 Copies/mL。结论本研究建立的FQ-PCR方法可以检测HTLV核酸,可以用于献血者的HTLV核酸筛查。     

四川骨髓库汉族人群HLA-DPB1与rs9277534等位基因频率及其连锁关系的分析

目的探讨四川骨髓库汉族人群HLA-DPB1和rs9277534等位基因分布及其之间的连锁关系。方法从四川骨髓库中随机选取200例无血缘关系的四川汉族志愿者标本,采用PCR-SBT方法对其HLA-DPB1等位基因分型,Taq Man探针法对其rs9277534等位基因分型并通过测序验证结果。利用Arlequin 3.1软件计算HLA-DPB1与rs9277534之间的连锁不平衡参数。结果本组四川骨髓库汉族人群中的DPB1等位基因:以DPB1*05∶01∶01G频率为最高:0.412 5(165/400);rs9277534等位基因:A和G的频率分别为0.4(160/400)和0.6(240/400),AA、GG、AG基因型频率分别为0.165(33/200)、0.375(75/200)和0.46(92/200)。有10种HLA-DPB1等位基因型与rs9277534等位基因A、G之间存在连锁不平衡,DPB1*04∶02∶01G、DPB1*02∶01∶02G、DPB1*02∶02∶01G和DPB1*17∶01∶01G与rs9277534A完全连锁,DPB1*05∶01∶01G、DPB1*03∶01∶01G、DPB1*13∶01∶01G、DPB1*14∶01∶01G和DPB1*21∶01与rs9277534G完全连锁。DPB1*04∶01∶01G与rs9277534A等位基因之间呈高度连锁不平衡(|D'|=0.95,P0.01)。结论四川骨髓库汉族人群的HLA-DPB1部分等位基因与rs9277534A/G等位基因连锁,对临床选择造血干细胞移植供者有参考价值。     

云南石林和红河地区彝族献血人群HNA-3基因多态性分布比较

目的 了解云南地区彝族人群的人类中性粒细胞抗原-3(HNA-3)的分布频率。方法 从昆明血液中心2012年8月-2012年11月采集的无关健康献血者标本中,选出云南石林彝族标本83例、红河彝族人标本120例,应用PCR-SBT法对其HNA-3系统做基因测序分型,使用SPSS20.0做统计学处理。结果 HNA-3a/a、3a/b和3b/b基因型频率在石林彝族献血人群中分别为47%(39/83)、40%(33/83)、13%(11/83),在红河彝族献血人群中分别为51%(61/120)、44%(53/120)、5%(6/120),其中红河彝族人群HNA-3b/b基因型频率明显低于石林彝族(P0.05);石林彝族和红河彝族献血人群HNA-3a同种免疫风险分别为9.63%和6.94%(P0.05)。结论 云南不同地区彝族人群HNA-3基因分布具有差异。     

载脂蛋白A1基因rs670和rs5069多态性对不同体质量指数青少年血脂的影响

目的 探讨载脂蛋白A1基因(APOA1)rs670和rs5069多态性与不同体质量指数(BMI)健康青少年血脂水平的相关性。方法 根据BMI将723名青少年分成4组,从低到高依次为１组[BMI=(17.80±0.75)kg/m2]、2组[BMI=(19.39±0.32)kg/m2]、3组[BMI=(20.68±0.43)kg/m2]和４组[BMI=(23.40±2.05)kg/m2]。测定身高、体质量、腰围、臀围、血压、心率、血脂及血糖等指标,计算BMI和腰臀比,提取基因组DNA并采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法对研究群体进行APOA1 rs670和rs5069多态性分型。结果 APOA1 rs670和rs5069多态性不同基因型青少年的身高、体质量、BMI、腰围、臀围、腰臀比、血压、心率、血脂及血糖等指标在1、2和3组中差异均无统计学意义,4组rs670多态性A等位基因携带者的收缩压(P=0.017)和血糖水平(P=0.009)显著高于GG基因型青少年,rs5069多态性T等位基因携带者的身高(P=0.013)、体质量(P=0.011)和臀围(P=0.026)显著高于CC基因型青少年。结论 在BMI较高的健康青少年中,APOA1 rs670多态性A等位基因与收缩压和血糖水平相关,降低体质量可能改善A等位基因对收缩压和血糖的增高作用。     

β_2肾上腺素受体基因Gln27Glu变异对高糖低脂膳食诱导的健康青年血脂及载脂蛋白比值变化的影响

目的探讨β2肾上腺素受体基因(β2AR)Gln27Glu多态性对健康青年血脂及载脂蛋白比值的影响及在高糖低脂(HC/LF)膳食诱导的血脂及载脂蛋白比值变化中的作用。方法 56例健康志愿者,给予7d平衡膳食和6dHC/LF膳食,于第1d、第8d及第14d取12h空腹静脉血,测定血脂和载脂蛋白(apo)AI、B100水平,计算甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDL-C)、log(TG/HDL-C)、总胆固醇(TC)/HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)/HDL-C、apoAI/apoB100值。提取基因组DNA,聚合酶链反应-限制性酶切法分析β2ARGln27Glu位点多态性。结果血脂及载脂蛋白比值的基础值及平衡膳食后,无论是受试人群整体还是将男女分组分析,CC基因型受试者与G等位基因携带者之间均无明显差异。HC/LF膳食后,在整体受试人群中,G等位基因携带者log(TG/HDL-C)高于CC基因型受试者(P=0.038);男女分组分析发现CC基因型受试者与G等位基因携带者之间血脂及载脂蛋白比值无明显差异。与HC/LF膳食前相比,在受试人群整体,HC/LF膳食后apoAI/apoB100在CC基因型受...     

β_2肾上腺素受体基因Arg16Gly变异与高糖低脂膳食诱导的健康青年女性血脂及载脂蛋白比值的关联分析

目的探讨β2肾上腺素受体(β2-adrenoceptor,β2AR)基因(β2AR)Arg16Gly多态性对健康青年血脂及载脂蛋白比值的影响及在高糖低脂(high-carbohydrate/low-fat,HC/LF)膳食诱导的血脂及载脂蛋白比值变化中的作用。方法56例健康志愿者,给予7d平衡膳食和6dHC/LF膳食,于第1、8天及第14天取12h空腹静脉血,测定血脂和载脂蛋白(apolipoprotein,apo)AI、B100水平,计算TG/HDL-C、log(TG/HDL-C)、TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C、apoAI/apoB100值。提取基因组DNA,聚合酶链反应-限制性酶切法分析Arg16Gly多态性。结果不同性别AA基因型受试者与G等位基因携带者之间血脂比值的基础值差异无统计学意义(P0.05)。平衡膳食后及HC/LF膳食后,无论是受试人群整体还是将男女分组分析,AA基因型受试者与G等位基因携带者之间血脂及载脂蛋白比值亦无明显差异(P0.05)。与HC/LF膳食前相比,HC/LF膳食后,在受试人群整体,AA基因型受试者TG/HDL-C(P=0.017)、log(TG/HDL-C)(P=0.031)、apoAI/apoB100(P=0.006)显著升高,LDL-C/HDL-C和TC/HDL-C显著降低(P0.01),而G等位基因携带者仅LDL-C/HDL-C和TC/HDL-C显著降低(P0.01)。男女分组分析发现,与HC/LF膳食前相比,男性受试组中HC/LF膳食后LDL-C/HDL-C(AA基因型:P=0.035,G等位基因:P=0.002)和TC/HDL-C(AA基因型:P0.01,G等位基因:P0.01)在AA基因型受试者与G等位基因携带者中均显著下降,apoAI/apoB100仅在AA基因型显著升高(P=0.003);女性受试组中,HC/LF膳食后LDL-C/HDL-C(AA基因型:P=0.011,G等位基因:P=0.043)和TC/HDL-C(AA基因型:P0.01,G等位基因:P0.01)在AA基因型受试者与G等位基因携带者均显著下降,TG/HDL-C(P=0.001)和log(TG/HDL-C)(P=0.001)仅在AA基因型较膳食前显著升高。结论β2肾上腺素受体基因Arg16Gly变异能抑制HC/LF膳食诱导的健康青年女性TG/HDL-C和log(TG/HDL-C)升高,而HC/LF膳食诱导的TG/HDL-C和log(TG/HDL-C)改变在该位点野生型(AA基因型)和变异携带者(G等位基因)健康青年男性之间没有明显差异,可能与apoAI/apoB100有关。     

高速离心方案对乙型肝炎病毒回收效果分析

目的分析不同高速离心方案对乙型肝炎病毒(HBV)回收率的影响。方法通过双因素交互设计方案将实验按离心力与离心时间分成44组,分析离心力、离心时间及两者之间的交互作用对HBV回收率的影响,并用低载量标本实例验证该效果。结果当离心力为固定值时,离心时间0.5~2.0 h对HBV回收率没有显著影响;离心力在(15000~90800)×g时,HBV回收率随着离心力增加而从(41.4±7.5)%增加到(83.8±9.5)%,任意2组离心力比较差异有统计学意义(P<0.05);离心力在(90800~171900)×g时,病毒回收率为71.6%~102.9%,达稳定状态,任意2组比较差异无统计学意义(均P>0.05);经高速离心处理后的低载量标本检出率达100%。结论高速离心技术可通过加大标本取样量使低载量HBV检出率提高,有效保障血液安全。