迷走神经兴奋和胃肠激素对胃液、胰液、胆汁分泌调节的相互关系

本系列科研曾获1986年国家教育委员会科学技术进步奖二等奖。现将申请此奖时国家教委要求上报的项目、理由、工作内容简介如下。 1 当前国内外同类理论上的新发展概况消化腺活动受神经和激素的调节。在     

人肝刺激因子对实验性急性肝损伤的保护作用及其机制的研究

从健康孕妇水囊引产4～6月龄的胎儿取肝,按 LaBrecque 法提取人肝刺激因子(hHSS)。将 hHSS 注入切除34%肝的 SD 大鼠腹腔,用~3H—胸腺嘧啶掺入肝 DNA 法,证实所提取 hHSS 具有生物学活性。用半乳糖胺(D—Gal)给昆明种小鼠造成急性肝损害。观察 hHSS 对这种急性肝损伤动物的保护作用及其机制。结果如下:(1)hHSS 明显降低 D—Gal 中毒小鼠的死亡率。(2)hHSS 显著降低 D—Gal 引起的血清 CPT 和 GOT 升高的幅度。(3)预先给 hHSS,则 D—Gal 引起的肝组织形态变化均减弱或不出现。(4)电子显微镜检查,hHSS 处理后由 D—Gal 引起的一些细胞器的变化均减轻或不出现。(5)hHSS 明显降低 D—Gal 所引起肝组织丙二醛的含量,说明 hHSS 有抗脂质过氧化作用。(6)hHSS 能保证膜流动性正常和脆性正常。根据上述实验资料,肯定了人肝刺激因子的存在,hHSS 具有保肝作用,其保肝机制为 hHSS 可抗膜脂质过氧化,保护肝细胞质膜、线粒体膜和微粒体膜的流动性和正常脆性。人胎肝产生 hHSS,hHSS 又可以保护肝细胞,这一肝细胞自我保护物质及其机制的阐明,对肝炎的防治可能具有应用价值。     

大鼠再生肝细胞对四氯化碳的耐受

本工作采用肝部分切除(PH)后96h 大鼠的离体肝细胞,以细胞存活率、介质中 GPT、GOT 含量作为肝损伤指标,观察其抗四氯化碳损伤作用。在不加四氯化碳条件下,肝细胞温育3h 或5h 后,细胞存活率、漏入介质中GPT、GOT 活性在假手术组和 PH 组间无显著差异。但在有四氯化碳损伤条件下则不同,在温育3h 或5h 后,存活率在假手术组分别降到52.8±5.9%和43.5±5.8%,而 PH 组分别为69.2±5.8%和60.9±3.2%。漏出的 GPT和 GOT 活性在假手术组也明显高于 PH 组(P<0.01)。提示大鼠离体再生肝细胞有明显的抗四氯化碳损伤作用。     

人胎肝刺激因子对大鼠实验性肝纤维化影响的研究

本工作从健康孕妇水囊引产４～６个月龄的胎儿取肝，采用ＬａＢｒｅｃｑｕｅ方法提取肝刺激因子，称人肝刺激因子（ｈｕｍａｎＨｅｐａｔｉｃＳｔｉｍｕｌａｔｏｒＳｕｂｓｔａｎｃｅ，ｈＨＳＳ）。将ｈＨＳＳ注入肝部分切除之大白鼠体内，用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入肝ＤＮＡ法测定其生物活性。结果表明，我们提取的ｈＨＳＳ刺激肝细胞ＤＮＡ合成较对照组增加６倍。采用皮下注射６０％ＣＣｌ４豆油溶液和饮用低浓度的乙醇制备慢性肝损伤动物模型，以观察ｋＨＳＳ对大鼠实验性慢性肝纤维化的影响。实验结果表明，（１）ｈＨＳＳ可以明显降低ＣＣｌ４－乙醇所致慢性肝损伤时肝组织羟脯氨酸含量的升高，在实验第２８、４２天差异具显著性（Ｐ＜０．０５，０．０１）。（２）病理组织学观察表明，ｈＨＳＳ可以明显降低ＣＣｌ４－乙致慢性肝损伤时肝组织纤维化的程度。在实验的第４２天差异具显著性（Ｐ＜０．０１）。本工作结果提示，肝再生刺激因子可能是一种有希望应用于临床治疗慢性肝病的生物制剂。     

急性胰腺炎时XOD和GSH的变化及栀子的影响

以去氧胆酸钠诱发大鼠(200-250g)急性胰腺炎,随机分为三组:正常组,胰炎+盐水组,胰炎+栀子组。观察了急性胰腺炎时黄嘌呤氧化酶(XOD)和还原型谷胱甘(GSH)的变化及栀子的影响。结果显示如下:(1)胰炎时,胰腺组织中 XOD 明显高于栀子组和正常组(P<0.01),而血清中 XOD无显著差异。(2)胰炎+盐水组的胰腺和血清中 GSH 均明显降低(P<0.01)。(3)用栀子治疗后,XOD 和 GSH 与正常相近,表明栀子可能是通过抗自由基产生与清除增强而保护胰腺的。     

电刺激兔迷走神经对胆汁分泌的效应

本工作用22只家兔进行实验观察,看到: (一)在麻醉情况下,家兔胆汁流量较多,流速均匀。 (二)在电刺激膈下迷走神经后,22例实验动物中有14例出现胆汁分泌抑制现象,6例出现胆汁分泌增多或暂停的交替现象,这二现象的刺激与反应之间的潜伏期均很短,在1—2秒钟之内。2例无改变。 (三)10例实验动物的胆囊胆管被结扎,然后用电刺激迷走神经,均出现胆汁分泌抑制现象。 (四)7例实验动物于静脉注射自身胆汁引起胆汁流量明显增多的情况下,刺激迷走神经,结果4例出现胆汁流量暂停,2例无变化,1例出现胆汁流量增多。 (五)6例实验动物于静脉注射阿托品后刺激迷走神经,其中4例的胆汁流量不发生改变,2例出现抑制现象。根据这些结果似乎可以认为,电刺激膈下迷走神经可以抑制胆汁流出,这可能是由于胆管收缩或痉挛所致。     

酸化胆道排石汤对狗胆汁分泌的效应

本工作利用10条狗作急性实验,分别向狗的十二指肠内灌注排石汤,弱酸化排石汤和强酸化排石汤,以及灌排石汤加静脉注射胰泌素,从狗的总胆管内插入一塑料导管,记录20或30分钟的胆汁分泌量,其结果如下:(1).酸化胆道排石汤的利胆效应比非酸化的排石汤强,而强酸化排石汤的效应更强。(2).排石汤与睫泌素相结合,其利胆效应比单独灌注排石汤强。我们设想,酸化排石汤可以促使内源性胰泌素释放,胰泌素与排石汤这二利胆因素共同发挥作用时,可以加强利胆效应。故酸化胆道排石汤应用于非手术的总攻疗法中,有可能提高肝内和肝外胆结石的疗效。     

胆囊收缩素族激素和促胰液素对豚鼠肝胆汁分泌的相互作用

用具备胃瘘和胆瘘的豚鼠于人工维持胆汁酸池恒定的条件下,观察促胰液素(SEC)和胆囊收缩素(CCK)族激素[包括雨蛙肽(CAE)、五肽胃泌素(G5)和内源性CCK]对肝胆汁分泌的影响及其相互作用。结果表明:静脉灌注SEC、CAE或肠内灌注左旋苯丙氨酸(L-PHE,促内源性CCK释放剂)后,胆汁流量、胆汁HCO_3~-和Cl~-排出量均显著增多,并呈量-效关系,但静脉注射G5则无利胆效应。在恒速灌注SEC的背景下,CAE或CCK对胆汁HCO3_3~-排出的效应分别大于它们单独给予时的效应(P<0.05或P<0.01)。这些激素对胆汁酸的排出量均无影响。上述结果表明,SEC、CAE和内源性CCK均有利胆作用,所刺激的肝胆汁属于不依赖胆汁酸部分。G5无利胆效应。在胆汁中HCO_3~-的排出方面,SEC与CAE或内源性CCK共同作用时有相互加强作用。     

人胎肝刺激因子对肝毒剂致小鼠亚细胞器的功能变化的影响

人胎肝刺激因子具有明显的保肝作用。本文采用Ｄ－半乳糖胺及ＣＣｌ４损伤小鼠肝脏，进一步观察人胎肝刺激因子（ｈＨＳＳ）对肝损伤引起的微粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和混和功能氧化酶（Ｐ４５０）活性的保护作用，结果发现，肝损伤后，两种酶活性均明显降低，而预先经ｈＨＳＳ处理后，上述两种酶活性均有不同程度的恢复或增加。结果表明，ｈＨＳＳ的保肝作用，可能与保护肝细胞的钙稳定及加强肝细胞代谢酶活性有关。     

钙离子与胆囊或胆管肌条收缩的关系 Ⅰ.细胞内、外钙对激动剂引起豚鼠胆囊或胆管肌条收缩的影响

为了估计豚鼠离体胆囊和胆管肌条收缩过程中细胞内、外钙的相对关系,本实验设计在有钙或无钙的 Krebs 氏液中激动剂—ACh 或雨蛙肽刺激肌条收缩的效应,结果如下:(1)无论是在有钙还是无钙液内激动剂均引起肌条收缩,在有钙液内激动剂的作用较大。(2)在无钙液中激动剂引起的胆囊收缩将减小50～60%,P<0.001,胆管减小70.8～82.5%,P<0.001。ACh引起肌条收缩达峰值的时间显著延长,而雨蛙肽则缩短。(3)在无钙液中激动剂引起肌条最大收缩后,再加 CaCl_2,胆囊收缩可恢复到有钙水平,胆管恢复到有钙水平的40.2～62.3%。(4)在无钙液中阿托品极明显地减弱 ACh 刺激胆囊收缩的效应,补充钙后肌条收缩可以恢复。这些结果提示,激动剂刺激胆囊或胆管肌条收缩时,细胞内、外钙离子均有作用,以细胞外钙的作用较强,而胆管收缩更依赖于细胞外钙。阿托品还可能阻碍细胞内钙的释放而发挥作用。