川芎嗪预处理增强骨髓间充质干细胞外泌体对脑缺血大鼠的神经保护和抗神经元凋亡作用

[目的]探讨川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）预处理的骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）源性外泌体（exosomes, Exos）对脑缺血大鼠的神经保护和抗神经元凋亡作用。[方法] TMP预处理BMSCs 48 h，采用超高速离心法分离提取外泌体并鉴定。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型，实验分为假手术组、模型组、BMSCs源性Exos(BMSC-Exos)组和TMP预处理的BMSCs源性Exos(exosomes from TMP-pretreated BMSCs,TMP-BMSC-Exos)组。脑缺血90 min后，给药组分别经尾静脉注射BMSC-Exos(100μg/500μL)和TMP-BMSC-Exos(100μg/500μL)。采用Longa评分和角实验评价大鼠神经功能，2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyltetrazole chloride,TTC）染色检测大鼠脑梗死体积，神经元特异...     

川芎嗪调控miR-139-5p/CXCR4通路促进骨髓间充质干细胞迁移

[目的] 探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)是否通过调控miR-139-5p/ 趋化因子受体4(chemokine receptor 4，CXCR4)促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)迁移。[方法] 采用全骨髓贴壁法培养SD大鼠BMSCs，50、100 μmol·L-1的TMP预处理BMSCs 24 h，脂质体3000转染miR-139-5p mimic、inhibitor，以细胞划痕和Transwell实验检测BMSCs迁移能力，双萤光素酶报告基因系统检测miR-139-5p与CXCR4之间的靶向性，实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction，Real-time qPCR)检测miR-139-5p表达，免疫印迹法检测CXCR4蛋白表达。[结果] 与正常对照组比较，转染miR-139-5p mimic后，细胞划痕愈合减慢(P<0.01)，Transwell小室迁移的细胞数量减少(P<0.01)，CXCR4蛋白表达下调(P<0.05)，而转染miR-139-5p inhibitor的作用相反。双萤光素酶报告基因检测结果表明，CXCR4是miR-139-5p的潜在靶基因(P<0.01)。与正常对照组比较，50、100 μmol·L-1 TMP预处理均下调miR-139-5p表达(P<0.01)；与TMP组比较，TMP+miR-139-5p mimic组划痕愈合减慢(P<0.01)，Transwell 小室迁移的细胞数量减少(P<0.01)，CXCR4蛋白表达下调(P<0.01)，TMP+miR-139-5p mimic NC组无明显变化(P>0.05)。[结论] TMP可促进BMSCs迁移，其机制可能与下调miR-139-5p，增加CXCR4的表达有关。