急性髓系白血病中RAGE-1基因的表达

摘要本研究通过检测RAGE-1基因在急性髓系白血病（AML）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中的表达,探讨其表达水平与临床变量的相关性。应用RQ-PCR方法检测94例初诊AML患者BMMNC中RAGE-1基因表达水平,分析其与患者年龄、性别、血象、诊断分型和预后的关系,并比较治疗前后RAGE-1表达量的变化。结果表明：26例（28％）AML患者存在着RAGE-1转录本的过表达（1．34-16．34,中位3．07）;RAGE-1过表达阳性组与阴性组在性别、年龄、血象和FAB亚型之间均无显著性差异;不同核型预后分组之间RAGE-1过表达频率无显著性差异,且不同类型核型AML患者中RAGE-1转录本过表达频率也无差异。治疗后获得完全缓解的患者RAGE-1表达水平较治疗前明显降低。RAGE-1过表达组与阴性组患者的总体生存时间并无显著性差异。结论：RAGE-1基因过表达是AML中的一个常见分子事件,但对患者预后并无明显影响。     

夏菇消瘿散治疗良性单纯性甲状腺结节临床观察

目的观察夏菇消瘿散治疗肝郁脾虚痰瘀互结证良性单纯性甲状腺结节的临床疗效及安全性。方法选取内分泌科、名中医工作室诊断为良性单纯性甲状腺结节肝郁脾虚痰瘀互结证的门诊及住院患者80例,从中随机抽取1/2数量设为对照组(40例),仅给予基础治疗(健康教育、忌碘饮食、心情舒畅),另外1/2数量设为夏菇消瘿散治疗组(40例),予基础治疗+夏菇消瘿散(150 ml每日2次,口服),8周后对其进行临床疗效观察等。结果夏菇消瘿散不会引起患者的甲状腺功能及甲状腺抗体的变化,安全性好。8周后,与干预前及对照组相比,夏菇消瘿散口服能缩小良性单纯性甲状腺结节患者的结节大小(P 0. 05)。结论夏菇消瘿散可有效改善肝郁脾虚痰瘀互结证患者甲状腺结节的大小,且具有良好的安全性,患者服药依从性高,适于临床推广。     

建立PCR-高分辨率熔解曲线分析法检测淋巴瘤MYD88基因突变

髓系分化起始反应基因88(MYD88)位于染色体3p22,编码蛋白为Toll样受体(TLR)信号传导途径中的一个重要接头分子,结构上主要包括2个功能域:N端的死亡域(DD)和C端的Toll域(TIR),在天然免疫应答和炎症反应中发挥着重要的调控作用[1-2].最近的研究发现39%活化B细胞(ABC)型弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者中存在MYD88基因的获得性突变[3],其中位于TIR域的L265P突变发生率最高(29%).高分辨率熔解曲线分析(High resolution melting curve analysis,HRMA)是一种新型的突变分析技术,具有灵敏度高、特异性好、成本低廉、高通量检测的优点,已在临床上得到越来越多的应用[4].我们拟建立HRMA法对MYD88 L265P突变进行检测.     

高分辨熔解曲线分析法检测急性髓细胞白血病IDH2基因突变

目的建立高分辨熔解曲线分析(HRMA)技术检测急性髓细胞白血病(AML)中可溶性异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)基因突变。方法针对IDH2突变位点设计PCR扩增引物,建立带有温度内标校准品的PCR扩增体系,对98例AML患者标本进行PCR扩增,用HRMA技术对PCR产物进行突变分析,并通过DNA测序技术对HRMA结果进行验证。结果对98例AML样本的PCR产物进行HRMA检测,发现5例存在异常熔解曲线,对此5例标本及随机选择的HRMA显示为野生型的35例IDH2标本进行DNA测序验证,结果表明,存在异常熔解曲线的5例标本为4例R140Q突变和1例R172K突变,其余35例经DNA测序证实为野生型IDH2;对不同浓度梯度的R140Q质粒HRMA检测结果表明其灵敏度为2%。结论成功建立HRMA技术检测IDH2突变,其可用于AML标本的临床检测。     

慢性髓系白血病PDLIM4基因表达与其启动子甲基化水平的关系

目的:分析慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者PDLIM4(PDZ and LIM domain 4)基因转录本表达状况、启动子高甲基化改变及临床相关性。方法:应用实时定量PCR(RQ-PCR)及实时定量甲基化特异性PCR(RQ-MSP)技术分别检测CML患者PDLIM4基因转录本及启动子甲基化水平。结果:8/36例(22%)CML患者存在PDLIM4低表达,低表达率与21例对照组间差异有统计学意义(P=0.021);PDLIM4表达水平和CML患者bcr/abl融合基因转录本正相关(r=0.434,P=0.043)。13/59例(22%)CML患者出现PDLIM4启动子高甲基化改变,而24例对照未显示高甲基化,两组差异有统计学意义(P=0.016)。PDLIM4高甲基化与患者血液学相关参数无明显相关性。PDLIM4启动子高甲基化频率随疾病进展而增高,在慢性期、加速期及急变期中分别为16%(7/44)、33%(2/6)及44%(4/9)。结论:PDLIM4基因启动子甲基化改变可能与CML的疾病发展有关。     

黄芪桂枝五物汤联合针灸治疗糖尿病周围神经病变疗效观察

目的关于糖尿病周围神经病变经中医疗法治疗的临床价值探究。方法选取80例来我院诊断与治疗疾病患者进行研究,待确诊为糖尿病周围神经病变后,分组分别采用西药(对照组)、中药汤剂-黄芪桂枝五物汤+针灸(观察组)治疗,记录与对比两组患者疾病治疗期间的相关数据。结果观察组患者治疗结果好,数据较之于对照组差异大,有统计学意义P0.05。结论临床治疗糖尿病周围神经病变期间,要求医生可结合患者患病基本情况,采用疗效好、安全性高的中药方剂联合针灸的中医疗法进行治疗,促使患者发病症状得到有效改善。     

急性和慢性髓系白血病患者SALL4基因的表达

本研究旨在探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)和慢性髓系白血病(chronic myeloidleukemia,CML)患者中SALL4基因的水平状态及其临床意义。应用RQ-PCR方法检测35例AML、12例CML患者和24例缺铁性贫血患者(作为对照)骨髓单个核细胞(BMMNC)SALL4 mRNA表达水平。结果表明,AML患者SALL4表达水平(0%-14%,中位1.43%)明显高于对照组(0%-1%,中位0%)(P<0.001),65.7%(23/35)AML患者中SALL4转录本呈阳性,SALL4表达频率依次为M2(86.7%,13/15)、M3(75.0%,6/8)、M1(60.0%,3/5)、M4(14.3%,1/7),4组间的差异有显著性(P=0.008);SALL4表达频率与AML患者年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白浓度、血小板计数和染色体异常均无相关性(P>0.05)。13例CML患者中SALL4转录本均为阳性表达,相对含量为1%-128%(中位19.39%),明显高于对照组(P<0.001)。采用接收者操作特征曲线(receiver operatingcharacteristic curve,ROC曲线)分析显示,AML和CML曲线下面积(AUC)分别为0.983(95%可信区间0.95-1.017)和0.997(95%可信区间0.986-1.007)。结论:SALL4基因表达是AML和CML中常见的分子事件并且可考虑作为AML和CML辅助诊断的分子标记。     

PDLIM4基因低表达与急性髓系白血病患者预后良好相关

本实验旨在研究急性髓系白血病（AML）患者中PDLIM4基因表达模型,并分析其临床相关性.运用EvaGreen实时定量PCR（RQ-PCR）方法检测AML患者中PDLIM4基因表达量.结果表明,与21例对照相比,94例AML患者PDLIM4转录本水平降低非常显著（P＜0.01）,共有42例（45％）AML患者为PDLIM4转录本低表达,M1/M2/M3亚型的PDLIM4低表达率非常显著地高于M4/M5/M6亚型（56％对20％,P＜0.01）,AML中PDLIM4低表达患者的总体生存时间（OS）显著长于非低表达者（P＜0.05）;受试者工作特征曲线（ROC）分析显示,ROC曲线下面积为0.865（95％可信区间：0.801-0.930）,表明PDLIM4低表达对AML具有诊断意义.结论：PDLIM4低表达是一个常见事件,且对AML预后具有良性影响,可能成为潜在的诊断肿瘤的分子标记.     

慢性粒细胞白血病患者HAGE基因启动子的低甲基化

目的： 探讨中国人群慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）患者螺旋酶抗原(helicase antigen,HAGE)基因启动子的甲基化状况和临床相关性。方法： 应用甲基化特异性PCR（methylation specific PCR,MSP）技术对50例不同临床分期的CML患者骨髓标本HAGE基因启动子的甲基化状态进行检测。结果： 13例（26%）CML患者存在HAGE基因启动子的低甲基化改变,而24例对照均无HAGE基因低甲基化,两组比较差异有统计学意义（P=0.007)。HAGE基因启动子低甲基化改变与CML患者的年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白含量、血小板计数、临床分期及染色体异常均无相关性（P>0.05）。慢性期、加速期和急变期患者中HAGE基因启动子低甲基化频率分别为25%（9/36）、25%（1/4）和30%（3/10）（P>0.05）。结论： HAGE基因启动子低甲基化是CML中的常见分子事件。