二甲双胍靶向Notch信号通路抑制胰腺癌干细胞自我更新

目的探讨二甲双胍对胰腺癌干细胞自我更新及其Notch信号通路活性的影响。方法通过细胞球培养法获取Panc1胰腺癌干细胞。通过CCK-8检测二甲双胍对Panc1普通胰腺癌细胞和胰腺癌干细胞的半数抑制浓度(IC 50)。通过CCK-8检测二甲双胍对Panc1胰腺癌干细胞自我更新能力的抑制;通过实时定量PCR检测二甲双胍对Panc1胰腺癌干细胞中Notch4、DLL1、DLL3、Jagged1和HES1 mRNA水平的影响。结果Panc1普通胰腺癌细胞悬浮培养于干细胞培养基后,全部细胞聚集成球状、团块状;5 d后悬浮培养得到的Panc1胰腺癌干细胞与Panc1普通胰腺癌细胞相比体积小,呈梭形或圆形。二甲双胍对Panc1普通胰腺癌细胞的IC 50为27.97 mmol/L,对Panc1胰腺癌干细胞的IC 50为16.10 mmol/L。在加入20 mmol/L二甲双胍后,体外培养的Panc1胰腺癌干细胞增殖能力明显受到抑制(P<0.01),细胞中Notch4、DLL1、DLL3、Jagged1、HES1 mRNA水平明显下调(P<0.01)。结论二甲双胍对Panc1胰腺癌干细胞的IC 50低于对Panc1普通胰腺癌细胞的IC 50,提示Panc1胰腺癌干细胞对二甲双胍更为敏感;二甲双胍可抑制Panc1胰腺癌干细胞自我更新,并可显著抑制其Notch信号通路活性,提示抑制该通路活性可能是二甲双胍抑制胰腺癌干细胞自我更新的机制之一。     

茅莓提取物体内抗乙型肝炎病毒的实验研究

目的：观察茅莓提取物（乙酸乙酯部位）体内抗乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus,HBV）的作用。方法：采用聚合酶链反应（polymerasechain—reaction,PCR）法筛选3日龄鸭乙型肝炎病毒（duck hepatitisBvirus,DHBV）阳性麻鸭50只,将麻鸭随机分为盐水对照组、茅莓提取物高、中、低剂量组和拉米夫定组,于用药前、用药第7、14、21天及停药后第3、7天,取各组麻鸭静脉血,作鸭血清DNA斑点杂交,计算鸭血清DHBV—DNA密度,最后一次取血后取肝脏组织进行病理组织学观察。结果：体内实验显示,盐水对照组动物血清DHBV—DNA水平与用药前比较未见变化（P〉0．05）,拉米夫定组血清DHBV—DNA于用药第14天和第21天与用药前比较明显减低（P〈0．01）,与盐水对照组用药第7天、第14天和第21天血清DHBV-DNA比较明显降低（P〈0．05和0．01）。与盐水对照组比较,茅莓提取物各剂量组21d疗程各时点血清DHBV—DNA未见变化（P〉0．05）。肝脏病理检查示各组差异无显著性。结论：茅莓提取物抗HBV作用主要是通过其原形发挥作用,该原形在麻鸭体内经过代谢后,失去抗HBV的作用。     

增加埃索美拉唑剂量根除幽门螺杆菌的疗效观察

目的评价增加埃索美拉唑剂量是否能够安全有效提高根治幽门螺杆菌的根治率。方法收集我院幽门螺杆菌阳性慢性胃炎患者210例,随机分为对照组及治疗组,两组使用抗生素均为阿莫西林1．0gBid,克拉霉素0．5Bid,疗程14d。对照组服用埃索美拉唑20mgBid,治疗组服用埃索美拉唑40mgBid;两组在治疗后停药4周后,用C—UBT检测幽门螺杆菌根治情况,统计两组不良反应发生率。结果治疗组幽门螺杆菌根治率、不良反应发生率分别为86．81％、6．59％,对照组分别为72．16％、4．12％。两组对比,幽门螺杆菌根治率差异有统计学意义（P〈0．05）;而不良反应发生率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论适当增加埃索美拉唑剂量提高幽门螺杆菌的根治率既安全又有效。     

靶向沉默miR-345表达对胃癌细胞周期的影响及其机制

目的探讨miR-345影响胃癌细胞生长周期的作用机制。方法采用脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45以沉默miR-345表达,采用实时英光定量PCR(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting)检测胃癌细胞中p21Cip1水平,随后检测CDK4、CDK6、Cyclin D1、p-Rb、Rb蛋白水平,进一步克隆形成实验比较其增殖能力,流式细胞术检测miR-345对胃癌细胞周期的影响。结果脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45可以抑制miR-345的表达;p21Cip1的mRNA和蛋白水平在低miR-345表达的胃癌细胞系中升高;下调miR-345的表达后MGC803、MKN45细胞中CDK4、CDK6、Cyclin D1和总Rb蛋白的表达水平无明显变化,但Rb蛋白的磷酸化水平显著降低。结论沉默miR-345的表达能够明显阻滞胃癌细胞从G1期向S期的进程,减慢细胞生长速度;其机制与上调p21Cip1进而抑制Rb蛋白的磷酸化有关。     

miR-345在胃癌中的表达特点及其临床意义

目的探讨miR-345在胃癌中的表达特点及其临床意义。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测人胃黏膜上皮细胞GES-1、3株胃癌细胞系(SGC7901、MGC803、MKN45)及48例配对的胃癌与癌旁组织中miR-345的表达水平,并对miR-345表达水平与患者临床病理特征、生存预后的关系进行相关性分析,最后通过PicTar和TargetScan软件预测miR-345潜在的重要靶基因。结果与正常组织比较,胃癌细胞系及胃癌组织中miR-345表达明显升高(P<0.05);miR-345的表达与胃癌的分化程度(P=0.005),TNM分期(P=0.003),原发肿瘤的浸润深度(P<0.001)和淋巴结转移(P<0.001)密切相关;过度表达的miR-345预示胃癌患者的术后生存期更短;miR-345潜在的重要靶基因为CDKN1A、BBC3和RUNX3。结论 miR-345与胃癌的发生、发展密切相关,可能成为胃癌诊治和评估预后的潜在生物学指标。     

CHB抗病毒治疗近况

慢性乙型肝炎病毒感染是一个严重公共卫生问题,它在全球范围内分布广泛并且可能导致严重的后果,不同地区HBV感染的流行强度差异很大。我国属HBV感染高流行区,一般人群的HB-sAg阳性率约为10％。据世界卫生组织报道,全球约20亿人曾感染过HBV,其中3．5亿慢性HBV感染者,每年约有100万人死于HBV感染所致的肝脏衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌（HCC）.     

重症急性胰腺炎内科两种治疗方法疗效分析

重症急性胰腺炎是一种临床常见急性危重疾病。其病情急、进展快、并发症多、变化复杂、致病因素多，发病机制尚未完全清楚。目前其治疗方案尚末完全统一。现将其近年来临床上较为广泛采用的两种治疗方案综述如下。     

重症急性胰腺炎大鼠肝内胆管组织病理学变化及胆管细胞凋亡情况

目的 探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝内胆管组织病理学变化、胆管细胞凋亡情况及巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在SAP大鼠肝内胆管细胞损伤中的表达和作用.方法 选择48只SPF级的雄性大鼠,将其进行随机分4组,每组12只大鼠.对照组(SO组)和SAP组——SAP 3 h组、6 h组、12 h组,利用胆胰管反方向注射浓度为5%的牛黄胆酸钠溶液,最后制备出合格的大鼠模型.模型准备完成后对每组大鼠的血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIPA)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBA)及总胆汁酸(TBiL)水平进行检测,同时根据HE染色法对每组大鼠的胰腺、肝脏以及胆管的病理生理情况进行研究,应用免疫组化S-P法检测肝内胆管细胞MIF表达情况,TUNEL法检测大鼠肝内胆管细胞的凋亡率.结果 SAP大鼠血清AMY、LIPA、ALT、ALP、TBA、TBiL水平明显升高,肝功能指标中ALP、TBA、TBiL明显增高,表明胆管细胞有损伤存在,与SO组比较,差异有统计学意义(P<0.05).SAP组大鼠胰腺、肝脏及肝内胆管细胞病理损伤明显,病理评分伴随胰腺炎病情进展逐渐升高,与SO组比较,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化结果 显示SAP各组大鼠肝内胆管细胞MIF表达较SO组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).TUNEL法检测发现SAP组大鼠肝内胆管细胞凋亡率较SO组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 SAP时,大鼠肝内胆管细胞出现不同程度功能及病理损伤,肝内胆管细胞中MIF表达水平随SAP的病程进展出现明显升高趋势,肝内胆管细胞的凋亡率亦逐渐增高,表明MIF可能在SAP并发肝内胆管细胞损伤的发病过程中发挥重要作用.     

清胰汤联合西医治疗轻症急性胰腺炎疗效观察

目的探讨清胰汤联合常规西医治疗轻症急性胰腺炎的疗效。方法将84例轻症急性胰腺炎患者随机分为对照组36例,治疗组48例。对照组按轻症急性胰腺炎的西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗的基础上联合清胰腺汤治疗。结果治疗组较对照组住院时间短,临床症状、体征持续时间短,2组比较有显著性差异(P均<0.05);治疗组和对照组总有效率分别为98%和93%,2组比较无显著性差异(P>0.05)。结论清胰汤联合西医治疗轻症急性胰腺炎总有效率无明显提高,但可显著缩短患者住院时间、临床症状及体征持续时间。