改良4-VO法在脑缺血动物模型制作中的应用

目的：建立一种可靠且易操作的活体脑缺血动物模型用于进一步研究脑缺血疾病的发生机制以及临床防治。方法：采取腹背侧双重入路（Ⅰ组）的大鼠四血管阻断法（4-VO）法及单纯腹侧手术入路（Ⅱ组）即改良4-VO法，经水迷宫检测各组大鼠的行为学改变，从形态学组织切片上观察海马区神经元变化。结果：经比较Ⅱ组动物的手术创伤明显减小，死亡率大幅下降，术后恢复好。行为学改变和海马区神经元形态变化方面二者差别无显著性意义。结论：改良4-VO法能大幅下降实验动物的死亡率，并能保证传统方法导致的动物行为学和形态学双重改变。     

解剖学教材建设的思考

<正>"教,上所施,下所效也"。医学教育与人类生命休戚相关,培养优秀的医学人才是每一个医学教育工作者的最高理想。医学的发展日新月异,医学教育模式也在创新中不断完善,教材是教学内容的载体,不仅要反映学科最新进展,还要生动体现教育思想和观念的更新,所以医学生对教材质量的需求也在不断提升~([1])。人体解剖学是一门讲授人体基本形态结构的古老学科,被视为其他医学学科的奠基石,本文对目前国内解剖学教材特点、现状和建设进行了调查和思考,旨在为加强解剖学教材建设     

不同脑缺血方式对大鼠学习记忆能力的影响

目的建立一种合适的脑缺血动物模型对于探寻疾病的发生以及防治至关重要.方法 本研究采用双侧颈总动脉(CCA)永久性结扎法、双侧椎动脉(VA)电凝并双侧颈总动脉反复夹闭法、双侧颈总动脉反复夹闭并全身低血压3种不同的脑缺血模型制作方法处理大鼠,并于术后15 d、30d、60d、90d4个不同时间点进行Morris水迷宫测试,应用SPSS11.0统计软件分析各组大鼠的行为学检测结果,采用平均逃避潜伏期和搜索策略两个指标评价大鼠学习记忆能力.结果脑缺血30d以内,大鼠的学习记忆能力以双侧VA电凝并双侧CCA反复夹闭法和双侧CCA反复夹闭并全身低血压制作的模型组最差[术后30d,逃避潜伏期分别为:(29.23±5.39)s,(30.03±8.84)s;综合得分:(766.20±173.55)分,(610.20±73.81)分];脑缺血30～60d,以双侧CCA永久性结扎法和双侧VA电凝合并双侧CCA反复夹闭法制作的模型组最差[术后60d,逃避潜伏期为:(18.56±4.15)s,(20.61±4.87)s,综合得分:(449.4±95.45)分,(437.4±80.22)分];60d以上,以双侧CCA永久性结扎法制作的模型组成绩最差[术后90d该组的逃避潜伏期:(16.63±3.00)s;综合得分:(410.8±92.37)分].结论不同脑缺血方式对大鼠学习记忆能力的影响和不同的缺血时间密切相关,适合于不同病因诱发的脑缺血梗死疾病的研究.     

活化的小胶质细胞在大鼠海马神经元缺氧损伤中的作用

目的 探讨缺氧诱导活化的小胶质细胞在SD大鼠海马神经元缺氧损害中的作用机制.方法 建立共培养体系,应用原位缺口末端标记(TUNEL)法、化学发光法探讨不同组别神经元生长状况以及Caspase-3活性;采用免疫荧光法、格里斯试剂法(Griess Reagent)、还原WST-1法、酶联免疫吸咐测定(ELISA)等方法检测各组培养液中NO、O-2以及TNF-α的表达水平.结果 缺氧12h, N9细胞培养液可抑制常规培养的神经元生长增殖活力,同时可加重由缺氧抑制的共培养体系中神经元活力;既可诱导常规培养的神经元凋亡,又可促进共缺氧培养的神经元凋亡;较之于单纯神经元培养系和常规共培养系,共缺氧培养系的培养液中NO、O-2、TNF-α 3类应激性神经毒性因子产量最高.结论 小胶质细胞活化在缺氧诱发的神经元损害中发挥了重要的作用,其活化后产生的神经毒性分子是效应分子.     

几类神经营养因子在血管性痴呆治疗中的应用前景

血管性痴呆(vascular dementia,VD)是指各种脑血管性疾病引起脑功能障碍而产生的获得性智能损伤综合征。基础研究表明VD大鼠海马区Ach含量持续降低,神经元数目减少,神经元的超微结构发生变化。神经营养因子(neurotrophic factor,NTFs)是指能支持神经元存活,促其生长、发育、分化,维持其功能的一类化学因子。这类因子能提高出现认知损伤的老年大鼠的ChAT水平,增加存活胆碱能神经元的功能,防止或抑制各种损害引起的神经元死亡;其不足、缺乏或失常均可能导致神经系统某些疾病的发生,或老年性神经系统的退行性变,或神经系统损伤后神经再生的失败。近年来,人们将它们用于治疗中枢神经系统退行性疾病,如早老性痴呆、帕金森病、脊髓侧索硬化症取得一定的疗效。因此,从NTFs角度研究痴呆的治疗是目前研究痴呆的最新研究方向。     

RT-PCR法检测神经源性分化因子mRNA在大鼠脑发育过程中的表达

目的 观察大鼠不同发育时期脑内神经源性分化因子（NeuroD）mRNA表达量的变化,探讨其对神经细胞的分化和成熟发挥的作用。方法 提取不同发育阶段大鼠不同脑组织中的mRNA,RT-PCR法反转录扩增NeuroD和β-actin,利用凝胶成像系统检测其相对表达量。 结果 NeuroD在受孕7.5d（E7.5）时出现表达,在E10.5和E21.5时分别达到两次高峰,平均吸光度值为20437.88±598.28和14482.23±1134.49,表达水平显著高于其他各组（P<0.01）,NeuroD/β-actin比值在E12.5、E18.5和E21.5分别为1.59±0.09、1.61±0.07和1.70±0.11,显著高于其他时间段（P<0.01）。 结论 在大鼠脑发育过程中,NeuroD mRNA的表达呈明显时间特异性,在E10.5左右大鼠各原始脑泡的形成过程中,NeuroD-mRNA明显增高;在胚胎发育的晚期,脑组织形态进一步完善和成熟的过程中NeuroD达到第二次表达高峰,与鼠脑的发育过程相符。推测NeuroD对鼠脑的早期神经细胞分化以及晚期细胞的成熟均起一定作用。     

人参皂苷Rb1抗SD大鼠海马神经元的缺氧损伤作用

目的 探讨人参皂苷Rb1对脑缺氧状态下SD大鼠海马神经元的保护作用.方法 以19 d的SD胎鼠脑作为取材对象,经过条件培养基纯化培养,建立海马神经元原代培养体系;选用人参皂苷Rb1作为干预药物,通过MTT法观察缺氧环境对海马神经元生长活力的影响;通过免疫荧光细胞化学法检测胞内caspase-3活性表达;通过TUNEL法观察缺氧环境对海马神经元凋亡的影响;通过化学发光法检测胞内ATP的表达水平.结果 与缺氧组相比,Rb1提高了经缺氧损害致凋亡的海马神经元生长增殖活力;对缺氧诱导的海马神经元caspase-3活性增高有明显的抑制作用;还可减轻因缺氧降低的胞内ATP水平.结论 人参皂苷Rb1能够减轻缺氧诱导的细胞损害和海马神经元损伤程度.     

不同脑缺血方式对大鼠学习记忆能力的影响

目的建立一种合适的脑缺血动物模型对于探寻疾病的发生以及防治至关重要。方法本研究采用双侧颈总动脉(CCA)永久性结扎法、双侧椎动脉(VA)电凝并双侧颈总动脉反复夹闭法、双侧颈总动脉反复夹闭并全身低血压3种不同的脑缺血模型制作方法处理大鼠,并于术后15d、30d、60d、90d4个不同时间点进行Morris水迷宫测试,应用SPSS11.0统计软件分析各组大鼠的行为学检测结果,采用平均逃避潜伏期和搜索策略两个指标评价大鼠学习记忆能力。结果脑缺血30d以内,大鼠的学习记忆能力以双侧VA电凝并双侧CCA反复夹闭法和双侧CCA反复夹闭并全身低血压制作的模型组最差[术后30d,逃避潜伏期分别为:(29.23±5.39)s,(30.03±8.84)s;综合得分:(766.20±173.55)分,(610.20±73.81)分];脑缺血30~60d,以双侧CCA永久性结扎法和双侧VA电凝合并双侧CCA反复夹闭法制作的模型组最差[术后60d,逃避潜伏期为:(18.56±4.15)s,(20.61±4.87)s,综合得分:(449.4±95.45)分,(437.4±80.22)分];60d以上,以双侧CCA永久性结扎法制作的模型组成绩最差[术后90d该组的逃避潜伏期:(16.63±3.00)s;综合得分:(410.8±92.37)分]。结论不同脑缺血方式对大鼠学习记忆能力的影响和不同的缺血时间密切相关,适合于不同病因诱发的脑缺血梗死疾病的研究。     

缺氧对小胶质细胞N9生物学功能的影响

目的:通过观察缺氧环境中小胶质细胞N9生物学功能的变化,进一步探讨活化态小胶质细胞在缺血缺氧性脑病中的作用机制.方法:通过建立N9细胞缺氧培养系,观察细胞形态学及其生长增殖活力的改变.利用RT-PCR、还原WST-1法及荧光探针DAF-FM DA法检测胞内TNF-α、iNOS、O2-等因子的表达水平;通过JC-1荧光和ELISA检测细胞线粒体膜电位和胞质及线粒体内细胞色素C的含量.结果:在缺氧早期,N9细胞增殖随缺氧时间延长而下降;细胞的形态在缺氧12 h时变化最典型.在缺氧早期N9细胞内O2-、TNF-α含量以及iNOS相对活性等多种神经毒性因子的表达水平增加.缺氧可导致N9细胞线粒体结构与功能改变,线粒体膜电位呈时间依赖性下降;线粒体细胞色素C的含量随缺氧时间延长而增加.结论:缺氧可诱导N9细胞生物学功能改变,呈现应激活化状态,主要表现在细胞生长增殖活力先上调后下降,神经毒性因子表达水平显著增高,细胞线粒体功能改变等方面.