miR-519d-3p通过调控TLR4/NF-κB通路促进脂多糖诱导的肺上皮细胞凋亡

目的 探讨miR-519d-3p对脂多糖LPS诱导的肺上皮细胞A549细胞凋亡的影响,并研究其具体作用机制。方法 LPS处理A549细胞构建急性肺损伤体外细胞模型,细胞内转染miR-519d-3p拮抗剂或miR-519d-3p激动剂构建miR-519d-3p下调或者上调的细胞模型。NF-κB抑制剂 Bay 11-7082预处理用来抑制细胞内NF-κB通路活性。qRT-PCR检测A549细胞内miR-519d-3p水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法检测凋亡相关蛋白和TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达,细胞免疫荧光检测 NF-κB p65蛋白细胞核移位情况。结果 LPS处理A549细胞后,细胞内miR-519d-3p水平上升,并呈浓度依赖性;上调miR-519d-3p能够促进A549细胞凋亡,而下调则降低细胞凋亡;进一步分子机制研究表明miR-519d-3p通过影响TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达及其磷酸化,诱导NF-κB蛋白细胞核移位而影响细胞凋亡;NF-κB抑制剂可缓解miR-519d-3p上调引起的细胞凋亡。结论 miR-519d-3p通过调控TLR4/NF-κB通路影响LPS诱导的肺上皮细胞凋亡。     

溃疡性结肠炎患者肠组织FOXP3 和miR-664a-3p的表达关系及意义

目的 研究FOXP3和miR-664a-3p在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)患者肠组织中的表达关系及临床意义。方法 分别选择收治的50例UC患者为病例组,50例结肠息肉患者为对照组,通过qRT-PCR法、Western blot法、免疫组化检测两组样本结肠组织中FOXP3、miR-664a-3p的表达;观察FOXP3、miR-664a-3p与UC患者临床病情程度的关系;通过Pearson方法分析FOXP3和miR-664a-3p表达水平的相关性。结果 与对照组比较,UC组中FOXP3和miR-664a-3p表达水平明显升高(P<0.01)。患者结肠组织中FOXP3、miR-664a-3p与临床病情严重程度呈显著正相关(P<0.01)。FOXP3和miR-664a-3p表达水平呈正相关(P=0.000)。结论 UC患者肠组织中FOXP3和miR-664a-3p表达显著增加,二者呈正相关且与患者的临床病情严重程度相关,有助于对UC的病情进展及预后分析。     

miR-519d-3p调控TLR4抑制脂多糖所致THP-1源性巨噬细胞炎症的机制研究

目的 探究miR-519d-3p在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症中的作用和分子机制.方法 用PMA诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,LPS刺激细胞产生炎症反应作为后续实验的细胞模型,应用荧光定量PCR检测miR-519d-3p表达;利用antago-miR-519d-3p及antago-NC或者miR-519d-3...     

慢性阻塞性肺病患者血清中长链非编码RNA GM15621的表达变化及意义

目的 探讨长链非编码RNA GM15621(LNCRNA GM15621)在慢性阻塞性肺病患者血清中的表达变化及其意义。方法 qPCR检测198例慢性阻塞性肺病(COPD)患者和140例健康对照者血清中长链非编码GM15621HG表达,通过酶联免疫吸附试剂盒检测血清中炎症相关因子的表达,在COPD患者来源的炎症细胞中添加不同浓度的miR-15621 mimics或PI3K(磷脂酰肌醇-3激酶)抑制剂, 处理24h后收获细胞,免疫印迹分析检测过表达LNCRNA GM15621对磷酸化AKT(蛋白激酶B)的影响。结果 COPD患者血清中LNCRNA GM15621表达显著低于正常健康对照者(P<0.05),炎症因子表达显著升高,抗炎因子水平明显降低,且LNCRNA GM15621低表达与不良预后相关,慢性阻塞性肺病患者来源的炎症细胞中添加miR-15621 mimics或PI3K抑制剂处理24h后,p-AKT表达显著降低(P<0.05),炎症因子表达显著降低,抗炎因子水平明显升高。结论 COPD患者血清中LNCRNA GM15621表达降低,LNCRNA GM15621低表达与患者不良预后相关,而过表达LNCRNA GM15621可以通过抑制PI3K/AKT信号通路抑制炎症因子的表达,上调抗炎因子水平。