间歇给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂抑制耐药黑色素瘤细胞增殖的研究

目的 探讨ERK1/2通路在耐药黑色素瘤药物成瘾性中的作用,并在此基础上,探究间歇性给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂对耐药黑色素瘤细胞增殖的影响。方法 体外培养黑色素瘤药物敏感株（A375和M14细胞）和对威罗菲尼耐受的细胞株（A375/R0.5、A375/R2.0、M14/R0.5和M14/R2.0）,用MEK抑制剂U0126抑制ERK1/2激活,用Western-blot检测ERK1/2等蛋白的表达,用克隆形成实验观察细胞的增殖能力。利用活性分子TBHQ激活ERK1/2通路,利用ML329抑制MITF,二者均可上调ERK1/2-MITF通路活性,导致下游MITF抑制。采用耐药细胞A375/R2.0观察“撤除威罗菲尼”联合“TBHQ或ML329”对细胞增殖的影响。结果 克隆形成实验显示,在撤除威罗菲尼后,耐药细胞增殖减慢,如在撤药同时,用MEK抑制剂U0126抑制ERK1/2活化,可逆转撤药导致的增殖抑制,证明ERK1/2活化是耐药细胞药物成瘾性的关键机制。相反,如在撤除威罗菲尼同时,添加ERK1/2激活剂TBHQ或MITF抑制剂ML329,以进一步激活ERK1/2-MITF通路,结果发现,二者均可进一步抑制耐药细胞的增殖,提示撤药和ERK1/2-MITF通路活化产生了协同抑瘤效应。结论 本研究从新的角度证明了ERK1/2通路在耐药黑色素瘤细胞药物成瘾性中的作用,并提示间歇性给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂可更有效地抑制耐药黑色素瘤增殖,有望为防治黑色素瘤耐药提供新思路。     

利用IL-1A-eGFP慢病毒载体构建SASP细胞监测模型的研究

目的 本文拟建立基于IL-1 A基因启动子驱动增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)表达的细胞衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)监测模型,以便通过荧光判断SASP是否产生及其强度....     

能量代谢异常促进黑色素瘤靶向治疗耐药的研究进展

目的 总结能量代谢参与黑色素瘤靶向治疗耐药的相关研究,分析代谢表型转换调控黑色素瘤耐药的机制,探讨靶向代谢重编程对黑色素瘤药物敏感性的影响,为干预和延缓黑色素瘤耐药提供新思路。方法 以“黑色素瘤、耐药、靶向治疗、代谢、MAPK通路、BRAF^V600E、BRAF^V600K、谷氨酰胺、线粒体、肿瘤微环境”为中文关键词,以“melanoma、resistance、targeted therapy、metabolism、MAPK pathway、BRAF^V600E、BRAF^V600K、glutamine、mitochondria、tumor microenvironment”为英文关键词,检索PubMed和中国知网数据库,共检索到中文文献23篇,英文文献548篇。纳入标准：(1)黑色素瘤流行病学、生物学和预后;(2)糖酵解参与黑色素瘤靶向耐药的机制;(3)代谢转换对黑色素瘤靶向耐药的影响。排除标准：(1)研究对象为黑色素瘤靶向治疗外的其他治疗方法;(2)会议论文、报告和信函等。根据标准共纳入文献61篇,中文...