盐酸小檗碱对甲状腺素性豚鼠心肌病心肌细胞中I Kr ， IKs和IK1的抑制作用

目的： 研究盐酸小檗碱(berberine,Ber)对甲状腺素性豚鼠心肌病中延迟整流外向钾电流中快激活成分(I _Kr )和慢激活成分(I _Ks )及内向整流电流(I _K1)的抑制作用。方法： 豚鼠腹腔注射L-甲状腺素造成心肌病后,分离单个心肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录钾电流。结果： 在心肌病细胞的I _Kr ,I _Ks 和IK1电流密度均明显增大,Ber 30 mmol/L分别抑制心肌病细胞I _Kr 22.8%（+10 mV）和I _Ks 29.5%（+80 mV）,其对I _Ks 的阻断作用大于I _kr 。Ber 30 mmol/L也能阻断心肌病细胞I _K129.1%（+120 mV）,但不影响其反转电位。Ber(1~300 mmol/L）浓度依赖性地阻断心肌病细胞I _Kr 及I _Ks ,其IC₅₀分别为76 mmol/L和55.37 mmol/L。结论： 甲状腺素性心肌病中出现异常增大的I _Ks ,I _Kr 及I _{K1离子流,Ber有明显阻断作用。}     

小檗碱对腹主动脉狭窄性心肌病大鼠心肌细胞钾电流的抑制作用

目的：研究小檗碱对腹主动脉狭窄性心肌病模型大鼠的心肌细胞中瞬时外向钾电流（Ito）和内向整流钾电流（IK1）的抑制作用,并探讨其作用机制。方法：对大鼠进行腹主动脉狭窄手术建立心肌病模型,以急性酶解法分离大鼠单个左心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录钾电流。结果：相比于假手术组,心肌病模型组大鼠心肌细胞Ito和IK1的电流密度明显增加;小檗碱（10～100μmol.L-1）可浓度依赖性降低模型组大鼠心肌细胞Ito电流密度,IC50为（43.61±4.31）μmol.L-1,并使Ito稳态失活曲线向负电位方向移动,半数失活电压减少,而对Ito稳态激活曲线和Ito失活后恢复曲线无明显影响;此外,小檗碱可显著降低模型组大鼠心肌细胞IK1电流密度。结论：小檗碱对腹主动脉狭窄所致心肌病中出现异常增大的Ito和IK1离子流有明显阻断作用。     

甲状腺素性心肌病时左右心室瞬时外向钾电流的不均一性研究

目的:以正常心肌为对照,研究甲状腺素心肌病左右心室瞬时外向钾电流(Ito)不均一性变化。方法:SD大鼠以0.5mg/kgipL-甲状腺素10d后造成心肌病,以急性酶解法消化大鼠心脏,得到左右心室单个心肌细胞,用全细胞膜片钳技术分别记录Ito。结果:正常心肌细胞中左右心室的Ito存在一定差异,但不明显,然而在甲状腺素心肌病模型中这种差异显著增大。去极化电压为+40mV时,Ito右心室的电流密度从(9.23±0.84)pA/pF增强至(11.19±1.73)pA/pF,而左心室的电流密度从(6.99±1.14)pA/pF降至(4.95±1.84)pA/pF,且离散度增大。病变的右心室细胞半失活电压V1/2从(-68.85±1.37)mV右移至(-49.86±0.69)mV;正常心肌细胞的左右心室失活后恢复常数τ相当,而在病变心肌左右心室的τ值离散度显著增大,分别为(79.16±7.04)ms和(53.19±3.72)ms。结论:在心脏病变中左右心室Ito的不均一性增大可能是肥厚心脏导致心律失常的重要离子基础之一。     

PKCδ在丹酚酸B抗对乙酰氨基酚肝损伤中的作用研究

目的： 探讨PKCδ在丹酚酸B（SalB）抗对乙酰氨基酚（APAP）肝损伤中的作用。方法： 通过MTT法、细胞内还原型GSH含量测定、细胞LDH溢出量测定检测SalB抗APAP肝损伤作用。Western Blot法检测SalB对Nrf2核移位的影响。应用PKCδ抑制剂或siRNA干扰技术,探索PKCδ在SalB抗APAP肝损伤中的作用,Western Blot法检测PKCδ表达及Nrf2激活。结果： SalB可明显减轻APAP造成的HepG2细胞损伤,同时激活PKCδ,促进Nrf2核移位。PKCδ选择性阻断剂Rottlerin可减弱以上保护作用。PKCδ敲除明显减弱SalB对Nrf2核移位的诱导作用。结论： SalB可减轻APAP所致肝细胞损伤,其机制与SalB通过PKCδ激活Nrf2通路有关。