小鼠不同细胞间表观遗传修饰的变化对Pdx-1基因转录表达的影响

目的:通过比较小鼠不同细胞类型之间Pdx-1基因转录起始区的表观遗传修饰差异,探讨表观遗传修饰对Pdx-1基因转录表达的作用。方法:采用免疫共沉淀-实时定量PCR法检测小鼠胚胎干细胞(mES)、小鼠成纤维细胞株NIH3T3细胞和小鼠β细胞株NIT-1细胞Pdx-1和MLH1基因转录起始区DNA甲基化和组蛋白修饰(H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化)的状况。同时采用实时定量RT-PCR检测上述3种细胞各基因mRNA表达水平。分析基因的DNA甲基化水平、H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化修饰与基因表达之间的相互关系。结果:(1)以mES细胞为对照,NIT-1细胞的Pdx-1基因转录起始区呈低DNA甲基化和高H3K4m3修饰(P0.05),NIH3T3细胞的Pdx-1基因的转录起始区的DNA甲基化、H3乙酰化、H3K4m3和H3K9m3修饰水平明显增高(P0.05);(2)Pdx-1基因仅在NIT-1细胞表达,其表达与DNA甲基化存在等级负相关(r=-0.802,P0.01),与H3K4m3修饰存在直线相关(r=0.997,P0.01),与H3K9m3修饰存在等级负相关(r=-0.879,P0.01);(3)管家基因MLH1的表达与所检测的表观遗传修饰无相关性。结论:DNA甲基化、H3K9m3与H3K4m3修饰能相互协调,共同调控Pdx-1基因的表达,对胚胎干细胞向β细胞分化具有重要意义。     

经胸乳径路腔镜甲状腺手术180例的临床研究

目的探讨经胸乳径路腔镜甲状腺手术技巧及其并发症的防治。方法回顾分析2005年3月至2009年12月经胸乳径路腔镜甲状腺手术180例患者的临床资料。结果本组178例腔镜甲状腺手术顺利完成,2例中转开放手术,其中1例为结节性甲状腺肿,因甲状腺体积大,空间狭小中转开放手术,另1例为原发性甲状腺功能亢进,因粘连严重、创面广泛渗血中转开放手术。全组手术时间70～190 min,平均110 min。术中出血量5～75 ml。术后出现皮肤瘀斑2例,抽搐1例,均于2周后恢复正常。声音嘶哑1例,1个月后恢复正常。住院时间3～6 d,平均4.5 d。结论经胸乳径路腔镜甲状腺手术是一种极富技巧性的手术,甲状旁腺损伤和喉返神经损伤是其严重并发症,规范手术操作能有效减少并发症的发生。     

H3K4m3和H3K9m3修饰对胰岛组织特异性基因表达的影响

目的 通过比较不同细胞类型之间胰腺十二指肠同源盒1(Pdx-1)、配对盒基因4(Pax4)、MafA(mast cell function associated antigen)和Nkx6.1等胰岛组织特异性基因其转录起始区的H3K4m3和H3K9m3修饰的差异,探讨H3K4m3和H3K9m3修饰对胰岛组织特异性基因表达的作用.方法 采用染色质免疫共沉淀一实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测小鼠胚胎干细胞(mES,1×10~7)、小鼠成纤维细胞株NIH3T3细胞(1×10~7)和小鼠β细胞株NIT-1细胞(1×10~7)三者中的胰岛组织特异性基因、Oct4基因和MLH1基因转录起始区H3K4m3和H3K9m3修饰的状况.同时采用实时定量逆转录(RT)-PCR检测上述3种细胞各基因mRNA表达水平.分析H3K4m3和H3K9m3修饰改变与基因表达之间的关系.结果 NIT-1细胞中Pdx-1、Pax4、MafA、Nkx6.1等胰岛组织特异性基因转录起始区的H3K4m的修饰水平分别为:(4.84±0.05)%、(9.91±1.33)%、(10.64±0.87)%、(0.23±0.03)%,与mES细胞比较明显增高(P<0.05),基因表达;NIH3T3细胞中Pdx-1、Pax4、MafA、Nkx6.1等胰岛组织特异性基因转录起始区的H3K9m3的修饰水平分别为:(0.64±0.21)%、(7.04±1.29)%、(0.39±0.10)%、(2.35±0.81)%,与mES细胞比较明显增高(P<0.05),基因不表达.结论 H3K4m3与H3K9m3修饰能相互协调,共同调控胰岛组织特异性基因的表达.     

胰腺实质性假性乳头状瘤的诊治分析

目的探讨胰腺实质性假性乳头状瘤的诊断和治疗方案。方法本文收集5例胰腺实质性假性乳头状瘤切除术后患者，所有病例术中均保留脾脏，其中3例行开放式胰腺肿瘤切除术，另2例行腹腔镜辅助下胰尾切除术。肿瘤行病理学HE染色检测和免疫组织化学组化分析。结果肿瘤免疫组化结果示：Vimentin、NSE、A．ACT和PR阳性率100％（5／5），AAT、CD10阳性率80％（4／5），ER、Imulin和CK广谱均为阴性。开放式病例手术时间（230&#177;165）min，出血量（133&#177;58）mL，住院时间（20&#177;18）d，腹腔镜病例平均手术时间180min，平均出血量60mL，平均住院时间11d。病例随防观察时间为4～28个月，中位随防时间10个月，随防期间，患者均无复发与转移的征象。结论免疫组化检测有助于胰腺实质性假性乳头状瘤的进一步明确诊断；保留脾脏的胰体或胰尾部分切除术是安全有效的，对于胰尾部的实质性假性乳头状瘤可行腹腔镜辅助下保留脾脏的胰尾切除术。     

超声引导下负压吸引旋切术治疗乳腺肿瘤的疗效和安全性分析

目的:评价超声引导负压吸引旋切刀治疗乳腺肿瘤的疗效和安全性。方法:选取收治的790例乳腺肿瘤患者,随机分为观察组和对照组,其中观察组395例,采用负压吸引旋切刀术治疗,对照组395例,采用传统切除术治疗,观察并比较两组患者临床疗效、患者满意度及不良反应的发生率。结果:两组患者术后病理结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组有效率为98.37%,对照组有效率为96.96%,两组患者有效率相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组切口感染、瘢痕形成等并发症的发生率均低于对照组,相比较差异有统计学意义(P<0.05),两组患者肿瘤复发及局部血肿的发生率相比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组临床满意度比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用超声引导下负压吸引旋切术治疗乳腺肿瘤疗效好,并发症的发生率低,值得在临床上予以推广。     

胸乳径路腔镜甲状腺手术180例

我院于2005年3月至2009年12月共开展了180例胸乳径路腔镜甲状腺手术.现总结报道如下. 临床资料 1.一般资料:本组男33例,女147例;年龄16～62岁,平均36岁.均因颈前肿物就诊.术前诊断:甲状腺腺瘤47例,结节性甲状腺肿113例,甲状腺功能亢进20例.     

延续护理在乳腺癌改良根治术患者中的应用效果

目的:探讨乳腺癌改良根治术患者延续护理措施应用效果。方法:选取2016年1月~2017年6月我院收治的196例乳腺癌患者为研究对象,并随机等分为对照组和观察组,两组均实施改良根治术治疗,对照组采取常规护理;观察组采取延续护理,比较两组手术相关指标和护理满意度。结果:观察组护理满意度优于对照组(P0.05),住院时间短于对照组(P0.05),功能锻炼依从性高于对照组(P0.05),术后并发症少于对照组(P0.05)。结论:在乳腺癌改良根治术中实施延伸护理,患者护士服务满意度高,提高了手术效率,减少了术后并发症发生,值得推广。     

小鼠不同细胞间组蛋白修饰变化对MafA基因转录表达的影响

目的通过比较不同细胞类型之间MafA基因转录起始区的组蛋白修饰差异,探讨组蛋白修饰对MafA基因转录表达的作用。方法采用染色质免疫共沉淀-实时定量PCR法检测小鼠胰岛素瘤β细胞(NIT-1)、NIH小鼠成纤维细胞(NIH3T3)及小鼠胚胎干细胞(mES)三者中的MafA和MLH1基因转录起始区组蛋白修饰(H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化)的状况。同时采用实时定量RT-PCR检测上述三种细胞各基因mRNA表达水平。分析基因的H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化修饰与基因表达之间的相互关系。结果 (1)以mES细胞为参照,NIT-1细胞MafA基因的转录起始区的H3K4m3修饰水平明显增高(P<0.05),H3K9m3修饰水平明显降低(P<0.05);NIH 3T3细胞MafA基因的转录起始区的H3K9m3修饰水平明显增高(P<0.05),H3K4m3修饰水平明显降低(P<0.05);(2)MafA基因的仅在NIT-1细胞表达,其表达与H3K4m3修饰存在直线相关(相关系数0.995);与H3K9m3修饰存在直线负相关(相关系数-0.751);(3)管家基因MLH1的表达与所检测组蛋白修饰无相关性。结论 H3K9m3与H3K4m3修饰能相互协调,共同调控MafA基因的表达,对胚胎干细胞向β细胞分化具有重要的意义。