香烟诱导支气管上皮细胞外泌体释放miR-34a靶向CASP2促进肺成纤维细胞增殖

目的：研究香烟模拟物（cigarette smoke extract, CES）通过调控16 HBE支气管上皮细胞中外泌体miR-34a的表达，从而影响MRC-5肺成纤维细胞的增殖。方法：从市售香烟中制备CES，后将6HBE细胞经过CES处理，收集上清中的外泌体miR-34a用于MRC-5细胞培养；使用RT-PCR检测外泌体miR-34a的表达水平；MRC-5细胞增殖能力通过细胞计数试剂盒CCK-8测定；通过Western blot检测CASP2的表达，利用双荧光素酶验证miR-34a与CASP2基因的靶向结合。结果：透射电镜下，16 HBE上清液中的外泌体呈球状，粒径在100 nm左右；经过CES处理后，外泌体miR-34a的表达显著增加。进一步研究表明，通过CES诱导的外泌体miR-34a能够促进MRC-5细胞的增殖；miR-34a与CASP2存在靶向结合关系；miR-34a mimic显著抑制了CASP2的表达。结论：在CES诱导的16HBE细胞中，外泌体miR-34a通过与CASP2基因的靶向结合，对成纤维细胞增殖起着关键作用。     

miR-873通过靶向Beclin1基因调控细胞自噬促进支气管上皮细胞炎症与凋亡

目的：探究miR-873对支气管上皮细胞凋亡、自噬的影响，以及对Beclin1的调控作用。方法：使用miR-873 mimic转染16HBE细胞48 h,qRT-PCR检测miR-873的mRNA水平，并使用CCK-8实验评估细胞活力。使用ELISA试剂盒检测细胞上清液中IL-2、IL-6、IL-10和TNF-α的含量，并采用TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。利用免疫荧光技术检测LC-3蛋白表达情况，以及通过qRT-PCR和Western blot技术检测Beclin1基因的mRNA和蛋白表达水平。同时，采用双荧光素酶报告基因技术检测miR-873与Beclin1的结合位点。结果：miR-873 mimic转染显著上调了16HBE细胞中miR-873的mRNA水平，抑制了16HBE细胞的增殖，并促进了其分泌IL-2、IL-6和TNF-α，同时抑制了IL-10的分泌。此外，miR-873还促进了16HBE细胞的凋亡并抑制了LC-3的表达。双荧光素酶报告基因证实miR-873与Beclin1基因存在结合位点，并可以靶向抑制Beclin1的mRNA和蛋白表达。结论：miR-873可能通过靶向...     

化瘀理肺方对肺纤维化大鼠肺组织miR-27a与α-SMA表达的影响

目的：探究化瘀理肺方对博莱霉素诱导大鼠肺纤维的抑制作用与对miR-27a、α-SMA表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分成正常组、模型组和化瘀理肺方治疗组各10只。采用注射博莱霉素构建肺纤维化大鼠模型。化瘀理肺方治疗组在造模7 d后给与化瘀理肺方灌胃治疗7 d。于造模后第14天分组处死大鼠。取右肺进行HE染色，Masson染色和免疫组化观察α-SMA的表达。通过qRT-PCR检测miR-27a的表达，同时采用双荧光素酶报告基因技术检测miR-27a与ACTA2(α-SMA蛋白编码基因)的结合位点。结果：与模型组比较，化瘀理肺方治疗组大鼠肺组织的病理形态学变化明显减轻，肺泡炎及纤维化明显降低，肺组织中胶原沉积明显减少，α-SMA蛋白表达明显降低。同时，化瘀理肺方治疗组肺组织miR-27a表达显著上升，双荧光素酶报告基因证实miR-27a与ACTA2基因存在结合位点。结论：化瘀理肺方可以抑制博莱霉素诱导大鼠肺纤维化，其机制可能与促进miR-27a表达有关。