YY1 在胰岛素瘤中的表达及意义

目的探讨YY1在良、恶性胰岛素瘤组织中的表达情况及意义。方法收集2000~2014年南方医院19例胰腺神经内分泌 肿瘤组织蜡块,利用免疫组化法检测19例标本中YY1的蛋白表达水平。结果YY1在良恶性胰岛素瘤中组织中都有表达,恶性 胰岛素瘤组织中YY1表达强度高于良性胰岛素瘤组织（P=0.042）,YY1表达强度与胰岛素瘤的良恶性质存在正相关关系（P= 0.037）,YY1表达强度高的胰岛素瘤更具恶性潜能。结论YY1的高表达强度与胰岛素瘤发生发展有一定关系,YY1有望成为 检测胰岛素瘤恶性转化的新肿瘤标志物。     

一测多评法测定皿培式培养牛樟芝中3种樟芝酸类成分的含量

建立皿培式培养牛樟芝Antrodia camphorate中3种樟芝酸类成分(25S)-antcin K,(25R)-antcin K,(25S)-antcin C的一测多评法,该研究优化了皿培式培养牛樟芝质量控制的HPLC指纹图谱条件,实现其主含成分(25R)-antcin K和(25S)-antcin K的基线分离。以(25S)-antcin C为内参物,测定(25S)-antcin K和(25R)-antcin K的相对校正因子,计算皿培式培养牛樟芝中难以大量制备的这一对差向异构体的含量,实现一测多评。同时,采用外标法测定皿培式培养牛樟芝中3种樟芝酸类成分的含量,并将其含量测定结果与一测多评法测定结果进行比较,结果显示一测多评法与外标法测定结果无显著差异。因此,以(25S)-antcin C为内参物,利用一测多评法测定(25S)-antcin K和(25R)-antcin K可应用于皿培式培养牛樟芝的定量分析。     

肠道病毒71型对Vero细胞线粒体的损伤作用及机制

目的探讨肠道病毒71型（EV71）对Vero细胞的损伤作用及机制,为分析EV71的致病机制提供新思路。方法将临床分
离的一株EV71接种于Vero细胞,观察细胞的形态改变,用免疫荧光方法检测EV71抗原在Vero细胞中的表达,用透射电镜观察
Vero细胞超微结构的改变,用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测试分析病毒颗粒直径和面积密度以及空泡化线粒体的比例和
面积密度。结果EV71感染后Vero细胞形态发生改变,由梭形变为圆形或死亡,免疫荧光检测显示EV71抗原定位于胞质,超
微结构观察可见胞质中有大量呈团块状分布、晶格状排列的高电子密度病毒颗粒,颗粒平均直径为16.3 nm,平均面积密度为
38.3%;线粒体肿胀、变性并空泡化、崩解,空泡化线粒体数量约占90.9%,平均面积密度为89.2%;部分线粒体内可见EV71病毒
颗粒。结论EV71感染Vero细胞后在其胞质中增殖,并可侵入线粒体,导致线粒体直接损伤并致细胞死亡;线粒体是EV71在
Vero细胞内的作用靶标。
     

Beta-TC-6细胞的免疫组化及分子生物学属性分析

目的探讨Beta-TC-6细胞免疫组化及分子生物学基本属性及基本鉴定指标。方法 (1)用针对小鼠细胞种属特异且敏感的cox-I基因引物,以Beta-TC-6细胞的基因组DNA为模板行PCR及后续琼脂糖凝胶电泳;(2)将Beta-TC-6细胞制备成细胞蜡块,用免疫组化S-P法检测细胞蜡块胰岛素标记物(INS)和神经内分泌细胞特异性分子标记物突触素(Syn)、嗜铬素(Cg A)及神经特异性烯醇化酶(NSE)的表达,并检测细胞增殖指标Ki67和P53。(3)用计算机图像分析技术测试活细胞面积及细胞蜡块中细胞的大小。结果 (1)cox-I基因引物经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳后在目的泳道上得到单一目的条带;(2)免疫组化检测:INS、Syn、Cg A、Ki67及P53均表达阳性,Ki67的阳性指数为99%,NSE表达呈阴性;(3)体外培养状态下活细胞的面积均值为696.59μm2,细胞蜡块切片中细胞及核的面积分别为60.54μm2、32.17μm2,核浆比1.32。结论 cox-I基因引物PCR扩增并联合免疫组化检测指标INS、Syn、Cg A、Ki67及P53可对BetaTC-6细胞属性进行甄别。