猪CD163分子在PRRSV感染PAM细胞中的作用研究

目的研究CD163分子在PRRSV感染PAM细胞中的作用。方法生物学软件分析猪CD163分子的结构,将其胞外区分为4个片段进行扩增,分别克隆到PET-32a原核表达载体中构建4种重组表达质粒并获得4种融合蛋白,用这4种融合蛋白分别免疫小鼠制备多克隆抗体,经间接ELISA方法检测4种多抗克隆抗体效价分别为1∶10 240、1∶12 800、1∶25 600和1∶12 800。饱和硫酸铵盐析法和DE-52离子交换层析技术二步法提取并纯化得到4种纯度较高的特异性抗体。用制备的4种抗体以及4种抗体的混合物分别封闭PAM细胞1 h,经PRRSV感染24 h和48 h,用已建立的绝对荧光定量PCR方法检测感染细胞中PRRSV的m RNA水平,用Graph Pad Prism 5软件进行处理所得到的数据。结果鼠抗猪CD163-P3抗体能够阻碍PRRSV感染PAM细胞,提示CD163-P3(SRCR5-6)可能参与PRRSV感染PAM细胞过程,其他片段不影响PRRSV感染宿主过程。结论用本试验方法所制备和纯化的抗体具有生物学活性,且CD163在PRRSV感染宿主细胞过程中发挥作用,发挥功能作用的部分是CD163-P3(SRCR5-6)。     

病毒性心肌炎小儿外周血FOXP3 mRNA、GARP mRNA、miR98的变化与预后的关系研究

目的 探讨病毒性心肌炎小儿外周血FOXP3 mRNA、GARP mRNA、miR98水平及与预后的关系.方法 选取2018年1月至2019年4月在我院治疗的病毒性心肌炎患儿97例(观察组),根据左心室射血分数(LVEF)水平,轻症患儿62例,重度患儿35例;同时选取健康体检儿童90例作为对照组.检测外周血FOXP3 m...