自身免疫性早发性卵巢功能不全患者血清免疫指标分析

目的探讨采用双LVIS支架套叠辅助弹簧圈栓塞治疗对颅内血泡样动脉瘤(BBA)患者疗效及围术期并发症的影响。 方法行支架辅助弹簧圈栓塞治疗的BBA患者41例,将其分成非双LVIS支架组25例、双LVIS支架组16例,对两组手术效果、围术期并发症发生情况、血流动力学指标血清可溶性细胞间黏附分子-1(SICAM-1)、中枢神经特异性蛋白(S100β)水平及术后3、6个月时的复发率进行比较。 结果双LVIS支架组术后SICAM-1、S100β水平均较非双LVIS支架组降低(P＜0.05)。双LVIS支架组术后3个月复发率较非双LVIS支架组降低(P＜0.05),而术后6个月差异无显著性(P＞0.05)。双LVIS支架组术后红细胞聚集指数均较非双LVIS支架组降低(P＜0.05),而红细胞变形指数较非双LVIS支架组升高(P＜0.05)。 结论采用双LVIS支架套叠辅助弹簧圈栓塞治疗BBA,效果好且并发症少,能显著降低SICAM-1、S100β水平,改善血流动力学,降低术后3个月复发率,应用价值高。     

Peli1对免疫性早发性卵巢功能不全小鼠调节性T细胞生物学特性的影响

目的 Peli1对免疫性早发性卵巢功能不全(POI)小鼠调节性T细胞(Treg)的生物学特性尚未阐明。文章旨在探讨Peli1对免疫性POI小鼠Treg增殖、凋亡及功能的影响。方法 从小鼠脾中分离Treg细胞,采用分子生物学方法构建过表达Peli1慢病毒载体,转染Treg细胞。实验分为6组：正常空白组(正常小鼠Treg细胞)、正常上调组(正常小鼠Treg细胞+过表达Peli1慢病毒)、正常空载组(正常小鼠Treg细胞+空载病毒)、模型空白组(POI小鼠细胞Treg细胞)、模型上调组(POI小鼠Treg细胞+过表达Peli1慢病毒)、模型空载组(POI小鼠Treg细胞+空载病毒)。采用qRT-PCR及Western blot检测各组Peli1的mRNA及蛋白水平,CCK8法检测Treg细胞增殖,Annexin V-APC/PI法检测Treg细胞凋亡率,流式细胞仪检测Teff细胞增殖水平评估Treg细胞免疫抑制功能,ELISA检测细胞培养上清液中IL-10、TGF-β表达水平。结果 模型上调组Peli1 mRNA及蛋白相对表达水平显著高于模型空载组、模型空白组(P<0.05);正常上调...     

免疫性早发性卵巢功能不全患者血清miR-21及外周血单核细胞Peli1的表达及意义

目的 探讨免疫性早发性卵巢功能不全(aPOI)患者血清miR-21及外周血单核细胞(PBMC)中Peli1的表达水平及临床意义.方法 选取南方医科大学珠江医院2018年4月-2019年10月未经治疗的初诊为aPOI的26例患者(aPOI组)及30名健康青年女性(对照组)为研究对象.记录两组的一般资料,检测血清miR-2...     

微RNA-21和Peli1在自身免疫性早发性卵巢功能不全小鼠体内的表达及意义

目的探讨miR-21和其下游靶基因Peli1在自身免疫性早发性卵巢功能不全（POI）模型小鼠的表达和意义。方法将24只雌性BALB/c小鼠随机均分为POI组和对照组（n=12）,分别予皮下注射ZP3多肽和生理盐水。通过小鼠卵泡计数,观察动情周期和检测血清中E2、FSH和AMH评估卵巢功能,酶联免疫吸附法(ELISA)测定炎性因子IFN-γ和IL-10,流式细胞仪分析脾脏Treg细胞比例,生物信息学预测miR-21的靶基因,qRT-PCR法检测外周血、卵巢组织miR-21表达和外周血、脾脏Treg细胞Peli1表达。结果二次免疫6周后,POI组小鼠基本无动情期,而对照组动情周期均正常。Peli1为miR-21的靶基因。POI组小鼠各级卵泡计数,E2、AMH、IL-10水平,脾脏Treg细胞比例,miR-21、Peli1表达均明显较对照组低（p＜0.05）,而FSH、IFN-γ水平明显较对照组高(p＜0.05)。结论miR-21和其下游靶基因Peli1在自身免疫性POI小鼠模型中的表达均明显降低,提示miR-21和Peli1可能参与自身免疫性POI的发病。     

过继转移过表达Peli1的Treg细胞对自身免疫性早发性卵巢功能不全的修复作用

目的探讨过继转移过表达Pellino-1（Peli1）的调节性T细胞（Treg细胞）对自身免疫性早发性卵巢功能不全（POI）的卵巢功能是否有修复作用以及对其免疫功能是否具有调控作用。方法采用透明带3多肽（pZP3）构建自身免疫性POI小鼠模型,将构建的过表达Peli1的慢病毒表达载体（LV-Peli1）转染至Treg细胞,最后将过表达Peli1的Treg细胞过继转移到模型小鼠体内。POI模型小鼠随机分为4组（n=5）,分别为LV-Peli1-POI组、LV-POI组、Treg-POI组及POI模型组。H-E染色观察各组卵巢结构并行各级卵泡计数,免疫组化实验（IHC）检测Ki-67增殖蛋白及CD3+T细胞表达水平,TUNEL法检测卵巢颗粒细胞凋亡情况,ELISA法检测各组小鼠血清卵巢激素促卵泡激素（FSH）、雌二醇（E2）及细胞免疫因子IL-10、TGF-β的表达水平,考察过表达Peli1对自身免疫性POI的作用。结果与LV-POI组、Treg-POI组及POI模型组相比,LV-Peli1-POI组中各阶段卵泡数目（始基卵泡488.00±19.24个、初级卵泡320.00±29.15个、次级卵泡472.00±23.87个、成熟卵泡41.00±7.42个）均增加、增殖蛋白Ki-67表达增强、卵巢颗粒细胞凋亡减少、FSH表达水平下降、E2表达水平升高（P＜0.05或P＜0.01）;LV-Peli1-POI组的CD3+ T细胞的表达数量减少,细胞免疫因子IL-10和TGF-β表达水平升高（P＜0.05或P＜0.01）。结论 过继转移过表达Peli1的Treg细胞可有效促进POI卵巢颗粒细胞增殖、抑制其凋亡,同时改善POI小鼠的卵巢内分泌功能和调节免疫因子,对自身免疫性POI有一定的修复作用。     

人骨髓间充质干细胞来源外泌体分离、鉴定及卵巢摄取

目的 提取及鉴定人骨髓间充质干细胞(hBMSC)来源外泌体，探讨颗粒细胞及自身免疫性早发性卵巢功能不全(POI)小鼠卵巢摄取外泌体的情况。方法 取P3至P9代hBMSC培养上清液，倒置显微镜下观察P4代hBMSC细胞形态，超高速离心法提取外泌体；纳米流式仪测外泌体粒径；透射电镜观察外泌体形态；Western blot检测外泌体标志蛋白CD63、CD9、肿瘤易感基因(TSG)101表达。外泌体采用DiR进行荧光标记；共聚焦显微镜观察人卵巢颗粒细胞(KGN)共孵育24 h和48 h摄取外泌体的情况；用ZP3蛋白多肽构建自身免疫性POI小鼠模型，在建模成功后的第1、7天腹腔注射150μg DiR标记的外泌体。在第2次注射外泌体后的第14天通过活体成像仪监测小鼠卵巢摄取情况。结果 h BMSC呈纺锤状，大小均一，提取出的外泌体平均直径为(81.12±17.23)nm。透射电镜显示外泌体结构为双层膜状；外泌体表面相关特异性蛋白CD63、CD9和TSG101呈阳性。共聚焦显微镜下观察到KGN细胞能够摄取外泌体，并与共孵育24 h比，48 h摄取的外泌体量更多。在自身免疫性POI小鼠模型中观察到小鼠...